低氧环境对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化及MAPK信号通路相关蛋白表达的影响

目的探讨低氧环境对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSMC）表型转化及MAPK信号通路相关蛋白表达的影响。方法体外培养SD大鼠CCSMC,采用细胞免疫荧光法对原代CCSMC进行鉴定。设常氧组（21%O2）与低氧组（1%O2）分别培养48h,在倒置显微镜下观察两组CCSMC形态学变化;采用Westernblot法检测表型转化及MAPK信号通路相关蛋白表达。结果体外培养的CCSMC生长良好,抗α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和抗肌间线蛋白（Desmin）抗体免疫荧光均为阳性,融合后可观察到大部分细胞,且细胞核与细胞质重合在一起,证实分离培养的细胞是同种细胞,即CCSMC。常氧组CCSMC多呈长梭形,而低氧干预48h后CCSMC胞体趋向肥大。与常氧组比较,低氧组缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、胶原蛋白Ⅰ（CollagenⅠ）相对表达量均明显升高（均P＜0.05）,α-SMA、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38MAPK）蛋白相对表达量明显降低（P＜0.05）,而磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）蛋白相对表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。结论低氧可造成CCSMC发生表型转化及p-JNK、p-p38MAPK蛋白表达下降。     

MAPK信号通路与勃起功能障碍关系的研究进展

MAPK信号通路在细胞的分化、增殖及凋亡等过程中起着十分关键的作用。MAPK家族的信号通路主要包括细胞外信号调节蛋白激酶(ERK),应激活化蛋白激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)等。从目前的研究来看,ERK、JNK、p38MAPK 3条信号通路与ED的发生发展紧密联系。本文根据相关文献对MAPK信号通路与勃起功能障碍作一综述。     

林胜友教授治疗肿瘤放化疗后不寐经验

[目的]总结林胜友教授治疗肿瘤放化疗后不寐的临床经验。[方法]通过随师临证,记录、分析整理林胜友教授治疗肿瘤放化疗后不寐的临床病案,从病因病机、辨证论治及用药特点等方面总结林胜友教授的临床经验,并列举验案加以佐证。[结果]林胜友教授认为,肿瘤患者放化疗后以正气虚弱为基础,热毒、药毒导致阴阳失衡、痰瘀互结而致心神不宁,夜寐不安。临证可分为阴虚火旺、脾虚湿阻、脾肾两虚、肝郁脾虚4大证型。治疗上强调"补其不足,泻其有余,调其虚实"的用药方法,同时合理运用健脾、益气、补肾等中药整体改善肿瘤患者放化疗后脾气亏虚、肾气不充的证候,整体调护,夜寐得安。验案中患者胃癌术后,加之长期化疗,导致脾胃气虚、心神失养,以补气健脾、养血安神为主要治法,疗效确切。验案精准辨治,充分体现了林胜友教授治疗肿瘤放化疗后不寐的临床经验。[结论]林胜友教授治疗肿瘤放化疗后不寐注重整体阴阳的调节,强调分清虚实正邪的关系,以"补其不足,泻其有余,调其虚实"为治则,重视补脾益肾,整体调护,临床疗效显著,值得借鉴。     

H_2O_2对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞connexin43蛋白表达的影响及红景天苷的干预作用

目的:探讨红景天苷对H_2O_2所致大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)缝隙连接蛋白43(Cx43)表达下调的干预作用。方法:体外分离、培养SD大鼠CCSMC,并利用免疫细胞荧光技术进行细胞鉴定。MTT法检测H_2O_2对CCSMC存活率的影响,以确定最佳干预浓度。利用最佳浓度H_2O_2于体外对CCSMC进行干预,并设立干预时间梯度;利用H_2O_2处理CCSMC的同时,加入低(16μg/ml)、高浓度(64μg/ml)红景天苷进行干预,最终提取获得各组别蛋白,并通过Western印迹检测Cx43表达。结果:原代培养的CCSMC生长状态正常,细胞鉴定结果显示阳性率达90%以上。MTT试验确定用于体外实验的H_2O_2最佳浓度为200μmol/L。利用200μmol/LH_2O_2处理CCSMC 0、1、2、4 h,与空白组相比,1、2、4 h组CCSMC中Cx43蛋白水平显著下降(P0.01);与1 h和2 h组相比,4 h组CCSMC中Cx43蛋白水平显著下降(P0.01)。利用200μmol/LH_2O_2处理CCSMC的同时,分别加入低剂量和高剂量红景天苷进行干预,与正常对照组相比, H_2O_2处理组CCSMC中Cx43蛋白表达明显下降(P0.05),高剂量红景天苷处理后可抑制该现象(P0.01),且高剂量红景天苷组CCSMC中Cx43蛋白水平与正常对照组相比无统计学差异(P=0.322 2)。结论:红景天苷在体外具有调节H_2O_2所致大鼠CCSMC中Cx43蛋白表达下降的作用。