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1.
人胰岛素样生长因子在pET-DsbA载体中的克隆及表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 通过重组技术,对胰岛素样生长因子IGF-Ⅰ基因进行缺失、突变以获得最有利于高水平表达的IGF-Ⅰ cDNA.构建原核表达载体,并进行表达,以获得能够高水平表达高活性产物的基因工程菌珠.方法 提取人肝脏组织总RNA,RT-PCR后琼脂糖电泳初步鉴定产物.将cDNA回收、补平后插入克隆质粒KS,酶切鉴定后,对IGF-Ⅰ基因进行序列分析.采用PCR法从克隆质粒中扩增IGF-Ⅰ片段,亚克隆至pET-DsbA原核表达载体,酶切鉴定,并进行序列测定.转化到大肠杆菌BL21(DE3)PLysS中,IPTG诱导表达,聚丙稀酰胺凝胶电泳、Western Blot分析目的蛋白.结果 成功构建原核表达载体pET-DsbA-IGF-Ⅰ,测序结果与预期序列完全一致,并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS表达出IGF-Ⅰ融合蛋白.结论 IGF-Ⅰ融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3) PLysS中的表达,对进一步研究IGF-Ⅰ的功能及开发其生物制品具有重要意义.  相似文献   
2.
我国是乙型肝炎病毒 (HBV)感染的高发区 ,大约有 50 %左右的人群受过HBV的感染。近年来发现 ,HBV感染后临床产生的不同疾病谱与病毒本身密切相关[1] ,因此 ,HBV前C区基因变异被广泛研究。整合在肝细胞染色体中的HBV-DNA拷贝数较少 ,并且常常出现基因片段的丢失 ,不易被常规方法检测出来。本文报道核酸杂交法检测HBV前C区基因变异的方法及结果。1 资料与方法1 1 标本 HBV前C区 1 76 2和 1 76 4变异阳性血清由第一军医大学基础部生物医学诊断研究中心提供 ,4 0例HBVDNA阳性患者血清由深圳市人民医院感染…  相似文献   
3.
陈德珩  戴勇  李体远 《广东医学》2003,24(12):1355-1356
目的 研究深圳地区儿童头发、血清中铅的含量。方法 采用石墨炉原子吸收光谱法测定975例小于13岁不同年龄组儿童发铅、血铅含量,对儿童铅暴露情况进行分析。结果 605例儿童头发中,20.7%超出发铅标准值10.73μg/g,370例儿童血铅中,92.4%超出血铅值0.10μg/ml,57.3%超出血铅值0.70μg/ml,13.0%超出血铅值3.0μg/ml,属于重度超标。结论 深圳城市环境对儿童的铅污染程度不可忽视。  相似文献   
4.
目的 通过观察外源性sHLA-G体外干预对滋养细胞侵袭功能的变化,确定sHLA-G治疗特发性复发性流产患者的有效性及可行性进行研究.方法 取早孕人工流产绒毛滋养细胞进行体外培养,sHLA-G进行干预,分别以生理盐水及5%丙种球蛋白干预为对照,流式细胞仪检测CD146黏附分子浓度,观察sHLA-G对体外培养滋养细胞亲润功能的变化.结果 分别以0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL不同浓度干预绒毛外滋养细胞EVCT,CD146阳性率分别为18.6%、27.1%、62.3%;绒毛滋养细胞VCT检测CD146阳性率分别为6.1%、7.6%、39.1%.生理盐水干预的EVCT检测CD146阳性率为9.3%;VCT检测CD146阳性率为13.0%.5%丙种球蛋白分别以3 mg/mL、6 mg/mL不同浓度干预EVCT,检测CD146阳性率分别为56.9%、61.7%; VCT检测CD146阳性率分别为15.8%、30.9%.结论 外源性sHLA-G主动免疫治疗特发性复发性流产患者胎盘绒毛滋养细胞具有效性和优越性,可作为丈夫淋巴细胞细胞主动免疫治疗无效及丙种球蛋白特异性抗体效价不高治疗无效时的2线治疗措施.  相似文献   
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