荧光偏振技术同步检测肺炎支原体肺炎衣原体方法的研究

肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae，MP）、肺炎衣原体（Chlamydophila pneumoniae，CP）是呼吸道感染的常见病因，及早准确地检测，对预防控制相关疾病非常重要。本研究采用荧光偏振检测与模板指导的末端延伸反应检测技术相结合（TDI-FP）的方法，建立了在同一反应体系中同步检测肺炎支原体、肺炎衣原体感染的方法。     

跨世纪消化病学医师的继续教育

近年来，随着医疗保健，医学新技术和人们思想行为的不断变化，对临床医师也提出了更高的要求。今天的消化病医师面对的挑战有来自科学飞速发展带来的新技术的应用，如计算机，网络通讯，分子生物学诊疗技术，管理需要的领导能力。也有早已存在却有了新的特点的问题，如医患之间的交流，医疗保健的经济效益，考试形式的更新等。     

Sinerem标记大鼠骨髓基质细胞及移植后活体示踪研究

目的初步探索利用欣诺（Sinerem）和转染试剂体外磁性标记大鼠骨髓基质细胞这一方法的可行性,为将来临床上应用MRI追踪标记细胞奠定基础。方法无菌条件下行股骨取骨髓,梯度密度离心法分离获取大鼠骨髓基质细胞,使用Sinerem-多聚赖氨酸复合物（SE—PLL）标记骨髓基质细胞,采用普鲁士兰染色、电镜和台盼蓝排除实验等方法鉴定SE—PLL标记大鼠骨髓基质细胞的效率和细胞的活力,并对SE—PLL标记骨髓基质细胞的增殖和分化能力进行评估。将SE—PLL标记和未标记后的骨髓基质细胞分别移植入大鼠左右侧尾壳核脑内,细胞移植后1、4、7w应用MRI对脑内移植的细胞进行活体示踪,最后利用组织切片进行普鲁士兰染色。结果Sinerem可以高效率地标记骨髓基质细胞,标记效率在99％左右。普鲁士蓝染色显示SE—PLL标记骨髓基质细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒。电镜结果显示sE—PLL标记的骨髓基质细胞胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡。与正常未标记的细胞相比较,SE—PLL标记对骨髓基质细胞的活力、增殖和分化等能力没有明显的影响。MRI检查发现脑内移植的标记细胞在磁共振上呈明显的低信号改变,未标记细胞侧脑组织无明显的低信号改变,与组织学切片结果基本一致。结论以上结果提示Sinerem可以用来体外标记骨髓基质细胞,利用MRI技术可以对脑内移植后的标记细胞进行初步的活体追踪。     

菲立磁标记兔骨髓基质细胞生物学特性的实验研究

目的初步探索利用菲立磁（FE）和转染试剂多聚赖氨酸（PLL）体外磁性标记兔骨髓基质细胞（BMSC）这一方法的可行性．并确定其标记BMSC的最佳浓度。方法无菌条件下行股骨取髓，采用梯度密度离心法分离获取兔BMSC，体外培养、诱导分化为神经干细胞（NSC），使用不同浓度（5、12．5、25、37．5μg／m1）的FE-PLL标记BMSC。采用普鲁士蓝染色、CCK-8法、流式细胞仪、透射电镜、免疫细胞染色等方法，检测FE—PLL标记兔BMSC的效率及其对细胞生长、分化、凋亡的影响。结果FE可以高效率标记BMSC，被标记的细胞在显微镜下呈淡黄或深黄，颜色深浅与所加FE的剂量呈正相关。流式细胞仪结果显示：5、12．5、25μg／ml各组FE对细胞无不良影响，而37．5μg／ml组凋亡细胞明显增加。CCK一8测定的生长曲线表明：除37．5μg／ml组外，其他各组细胞之间差异无统计学意义。普鲁士蓝染色显示：各组FE-PLL标记BMSC胞质内均可见到细小的蓝色铁颗粒。电镜结果显示：各组FE-PLL标记的BMSC胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡，其含铁囊泡的数量依FE浓度增加而增加。结论FE可以用来体外标记兔BMSC;其标记效率随FE浓度增加而增高，最佳浓度为25μg／ml。     

线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的改进

目的 研究一种稳定、简便的大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型制作方法。方法 采用健康SD雄性大鼠，线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型．结扎颈总动脉（CCA）及颈外动脉（ECA），不结扎翼腭动脉，用5．0头皮针于CCA结扎的远端刺一小口插入栓塞线造成缺血，拔出线栓形成再灌注。通过神经功能缺损评分、红四氮唑（TTC）染色和病理学检查等方法评价该模型的可靠性。结果动物麻醉后一般只需15min左右即可完成手术，术后大鼠神经功能缺损明显，TTC染色示脑梗塞区苍白，病理学检查显示典型病理表现。结论该方法缺血效果明确可靠，术式简便，手术时间短，不需具备显微手术操作技巧，是一种理想的制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型的方法。     

宫颈癌与HLA等位基因DQB1*03、DR15的相关性研究

目的: 探讨我国陕西地区宫颈癌的发生与人类白细胞抗原(HLA)-DQB1*03、DR15等位基因的相关性.方法: 采用序列特异性引物的聚合酶链式反应(PCR-SSP)方法,扩增HLA等位基因DQB1*03、DR15的目的DNA片段(分别为79、197 bp),分析两对等位基因在陕西地区宫颈癌患者和正常人中分布频率的差异.结果: 45名宫颈癌患者组中DQB1*03等位基因频率显著高于50名健康对照组,DR15等位基因频率在两组中的分布无显著差异.结论: HLA等位基因DQB1*03可能与宫颈癌的发生具有相关性,DR15可能与宫颈癌的发生不存在关联.     

干细胞移植治疗脑胶质瘤的研究进展

尽管脑胶质瘤的治疗取得不断的进步，但其致残率和死亡率仍很高，其难以根除的主要原因是肿瘤细胞对脑组织的高度浸润性。传统的外科手术辅助放疗、化疗方法对正常神经组织的破坏及副作用很大，如放射性坏死、认知障碍和脑白质病等。近几年随着干细胞技术的兴起，利用干细胞作为载体的脑胶质瘤基因治疗受到广泛关注，该治疗方法的优势在于既能除去肿瘤细胞又有组织修复功能。本就干细胞治疗神经胶质瘤的细胞来源、肿瘤趋向性、治疗机理及体内监测等方面的现状及进展进行简要回顾和展望。[第一段]     

高危人乳头瘤病毒基因变异与宫颈癌的关系

近年来，高危人乳头瘤病毒(HPV)基因变异和宫颈癌进展的关系日益受到重视。已经发现了一些可能对诊断和治疗有参考意义的基因变异。本文对高危HPV的重要变异与表达调控、细胞转化及永生化、免疫反应等改变在宫颈癌进展中的研究进行了综述。     

复发尖锐湿疣患者感染人乳头瘤病毒基因型的荧光偏振检测

目的　检测复发尖锐湿疣患者的人乳头瘤病毒 (HPV)基因型 ,以探讨尖锐湿疣复发的机理 ,并指导治疗。方法　以蛋白酶K消化法提取 81例复发尖锐湿疣组织临床样本DNA ,以各型HPVDNA通用引物行PCR扩增 ,将荧光偏振检测技术与模板指导的末端延伸反应 (TDI FP)结合 ,应用HPV 6B ,11,16 ,18各型特异探针杂交延伸反应对扩增产物进行HPV分型 ,并分别以含HPV 6B ,11,16 ,18L1质粒的阳性及不含待测靶基因的同源质粒的阴性标准品为参照。结果　 81例尖锐湿疣组织块中HPV检出率 10 0 % ,其中两型混合感染 2 9例 ,占 36 .6 % ,三型混合感染 7例 ,占 8.6 %。结论　本组 81例复发尖锐湿疣患者的HPV的多重感染率高达 4 5 % ,可能与该病的反复复发有一定相关性。     

超小超顺磁性氧化铁微粒对神经干细胞生物学活性的影响

目的应用超小超顺磁性氧化铁微粒Sinerem标记大鼠骨髓源性神经干细胞（NSCs），探讨Sinerem的安全性及合适的标记浓度。方法分离、培养大鼠骨髓源性NSCs。制备Sinerem多聚赖氨酸复合物，以不同浓度Sinerem对细胞进行标记。普鲁士蓝染色和电镜观察细胞内铁，CCK-8法检测细胞生长增殖情况，AnnexinV—PI法检测细胞凋亡及死亡情况。结果普鲁士蓝染色显示细胞质内大量铁颗粒存在，标记率在99％以上。电镜观察见Sinerem标记干细胞内含纳米铁颗粒。CCK-8法检测结果表明，25～1500μg/ml不同浓度范围的Sinerem对细胞增殖的影响差异无统计学意义。AnnexinV—PI检测结果显示，Sinerem在25～200μg/ml范围内的不同浓度对细胞凋亡和死亡的影响差异无统计学意义。结论超小超顺磁性氧化铁微粒Sinerem可以有效标记大鼠骨髓源性NSCs，可以应用25～200μg／ml浓度范围的Sinerem标记细胞。