人源多肽抗生素LL-37真核表达载体的构建

目的 构建抗菌肽LL-37的表达载体pPIC9-LL-37,转化毕赤酵母GS115以获得表达LL-37的工程菌.方法 通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽LL-37的基因,定向克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9上,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,PCR鉴定及序列分析后转化毕赤酵母GS115.MM、MD平板筛选His^＋Mut^＋、His^＋Mut^-表型,PCR扩增鉴定基因的插入.结果 PCR鉴定及序列分析表明抗菌肽LL-37基因正确插入载体pPIC9,MM、MD平板筛选及PCR鉴定获得10个His^＋Mut^＋、9个His^＋Mut^-克隆.结论 获得含LL-37基因的工程菌.     

汽油漂浮集菌法在抗酸杆菌检验中的应用

目的 :提高抗酸杆菌痰涂片的检出率,有助于对肺结核早发现、早诊断、早治疗。方法 :对43例肺结核患者的痰液同时采用直接涂片法和汽油漂浮集菌法检测结核分枝杆菌。结果:直接涂片法阳性9例(20.9%),汽油漂浮集菌法检测抗酸杆菌阳性29例(67.4%),两者阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:汽油漂浮集菌法检测抗酸杆菌阳性率大大提高,方便、经济、快捷、敏感性高,值得推广。     

细胞色素P450 2C19基因多态性与原发性肝细胞癌的相关性研究

细胞色素P450（CYP）2C19代谢美芬妥英的酶活性在人群中呈快代谢型和慢代谢型二态分布。突变型等位基因是CYP2C19基因多态性的分子生物学基础。目的：对原发性肝细胞癌（HCC）患者的CYP2C19等位基因进行基因分型．探讨CYP2C19基因多态性与原发性HCC的关系。方法：纳入48例原发性HCC患者和88名健康对照者。设计相应引物，以聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测CYP2C19ml和CYP2C19m2突变型等位基因．对两组基因多态性进行分析比较。结果：HCC组CYP2C19慢代谢型（ml／m1和ml／m2）发生率为25．0％（12例）．与健康对照组的11．4％（10例）相比差异有统计学意义（P〈0．05，OR=3116，95％CI：1140—7113）。结论：CYP2C19慢代谢型与原发性HCC之间存在相关性，可能增加人群对HCC的易感性。     

肝星状细胞SSeCKS的表达及其在肝纤维化中的作用

目的 了解src抑制的蛋白激酶C底物(SSeCKS)在肝星状细胞(HSC)活化中的变化和作用.方法 (1)分离正常大鼠的HSC,以实时定量PCR检测其在体外培养过程中SSeCKS mRNA的表达变化,以蛋白质印迹法和细胞免疫荧光法检测HSC中SSeCKS蛋白的表达变化.(2)制作肝纤维化的大鼠模型,以免疫荧光法检测肝组织内SSeCKS和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化及定位.结果 初分离的HSC表达低水平的SSeCKS mRNA,经培养活化后SSeCKS的表达增强.在纤维化肝组织中,SSeCKS阳性细胞增多,阳性细胞多分布于肝窦周围,与α-SMA阳性细胞的分布一致.结论 在体外活化过程中HSC中SSeCKS表达增强.SSeCKS可能参与HSC在肝脏炎症和纤维化中的作用.     

基于相关双采样技术的CCD信号处理

目的电荷耦合器件（charge coupled device,CCD）的输出信号中含有多种噪声,其中主要是复位噪声,所以在CCD信号采集系统中,一项关键技术就是去除或削弱噪声。方法本文详细介绍了CCD复位噪声的产生机理,设计了基于相关双采样技术（correlated double sampling,CDS）的CCD信号处理电路。结果通过实验验证上述信号处理电路可以有效抑制CCD噪声。结论相关双采样技术在一定程度上抑制了CCD复位噪声,有利于后续CCD信号的采集与传输。     

胸锁乳突肌瓣联合人工生物膜修复腮腺切除术后缺损的临床观察

目的 评价腮腺切除术后应用胸锁乳突肌瓣联合人工生物膜改善面部凹陷畸形、预防味觉出汗综合征的效果. 方法 68例患者随机分为2组,修复组36例,采用胸锁乳突肌瓣联合人工生物膜修复腮腺切除术后创面;对照组32例,术后创面不做修复. 随访6~24 个月,比较2组患者术后面部凹陷畸形及味觉出汗综合征的发生率. 结果 修复组和对照组面部凹陷畸形发生率分别为8. 33%(3/36)和81. 25%(26/32),修复组低于对照组,差异具有统计学意义(χ2 =36. 83,P<0. 05);修复组和对照组味觉出汗综合征的发生率分别为5. 56%(2/36)和62. 50%(20/32),修复组低于对照组,差异有统计学意义(χ2 =25. 10,P<0. 05);2组均无颈部运动障碍发生.结论 胸锁乳突肌瓣联合人工生物膜修复腮腺切除术后缺损对改善术后面部凹陷畸形及预防味觉出汗综合征有显著效果.     

细胞蜡块在恶性浆膜腔积液中的应用

目的:探讨细胞蜡块及免疫组化方法在浆膜腔积液诊断中的作用。方法:收集334例浆膜腔积液标本,制作液基细胞学及细胞蜡块,HE及免疫组化染色。结果:CR,Vim,CK5/6及D2-40在间皮瘤中有重要价值,CK7,CK20,Villin,TTF-1,NapsinA,CDX-2,MUC-2,CA125,ER,PR,GCDFP-15及mammaglobin在判断肿瘤来源有特异性作用。结论:细胞蜡块在恶性浆膜腔积液诊断中有重要价值,值得推广。     

干扰素序贯或联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎疗效的基因诊断指标

我们采用PCR-微流芯片技术检测HBV基因型、HBVYMDD、HBVDNA含量来判断抗病毒的疗效。报道如下。     

心血管造影图像边缘特征的提取

心血管疾病作为老年人的常见病现在比较多见。根据血管造影图像，即时诊断、积极治疗，能预防病情的发展，解除患者的痛苦。对血管图像的边缘特征进行提取是求取血管直径、分析血管特征和构造心血管三维图像的基础。 提取血管造影图像中的纯血管图，提出利用圆模板灰度最小和微分边缘检测的方法。先利用圆模板灰度最小准则求取血管的路径，然后根据路径线的局部斜率确定对边缘进行微分的方向，将血管相邻部分图像灰度进行微分，按微分最大求取边缘点，最后采用B样条函数对边缘点进行平滑，最终得到血管的边缘线。     

中国汉人HLADQAl基因对系统性红斑狼疮的遗传易感性研究

利用ＨＬＡ基因的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ核苷酸分型技术，以等位基因特异性的限制性内切酶（ＡｐａｌⅠ、ＢｓａｊⅠ、ＨｐｈⅠ、ＦｏｋⅠ、ＭｂｏⅡ、ＭｎｌⅡ）消化ＤＱＡｌ座位特异的ＰＣＲ扩增产物，研究了上海及其附近地区中国汉人ＨＬＡ－ＤＱＡｌ基因与系统红斑狼疮的遗传关联。发现系统红斑狼疮ＤＱＡｌ＊０１０２（３６．５％，ＲＲ＝２．２５，Ｐ＜０．０５，ＥＦ＝０．２０）及＊０４０１（１５．４％，ＲＲ＝１２．４２，Ｐ＜０．００５，ＥＦ＝０．１４）显著增加，而ＤＱＡｌ＊０５０１（１１．５％，ＲＲ＝０．２１，Ｐ＜０．００５，ＰＦ＝０．３１）和＊０．０６０１（３．９％，ＲＲ＝０．２７，Ｐ＜０．０５，ＰＦ＝０．０９）显著下降。排除ＤＱＡｌ＊０４０１的影响后，＊０１０２频率的升高表现得更加明显（ＲＲ＝２．８４，Ｐ＜０．０１）。上述发现显示：ＤＱＡｌ＊０１０２及＊０４０１对ＳＬＥ有遗传易感作用，而ＤＱＡｌ＊０５０１和＊０６０１有遗传抵抗作用，并提出了有关可能的单体型。