兔肝癌裸鼠移植模型的建立

目的 建立兔肝癌裸鼠模型，为兔肝癌可移植模型的建立奠定基础。方法 利用二乙基亚硝胺诱发日本大耳白兔肝癌，将获得的肝细胞癌接种于裸鼠皮下，并反复传代，将传代瘤块经体外培养后回植于裸鼠皮下，并继续在裸鼠体内传代。结果 肝细胞癌组织前5代对裸鼠致瘤率约40％；经体外传代后移植瘤成活率100％，潜伏期7～10d，无自然消退，无转移。病理检查证实该移植瘤保持着兔肝细胞癌特征，肝细胞抗原阳性，甲胎蛋白阳性。结论兔肝部细胞经传代和体外培养可增加移植成功率，并可缩短时间。     

兔荧光扩增片段长度多态性分析体系的建立

目的:建立兔荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)分析方法并对其在实验动物科学中应用进行探讨。方法:本实验以5个品种(系)兔为实验材料,对DNA提取、预扩增和选择性扩增等步骤进行优化并对结果进行检测。结果:5个品种(系)兔的扩增片段数均在120条以上,各品种(系)特异性条带均能找出,5个品种(系)兔能据此进行区分。结论:fAFLP是一种以PCR为基础的DNA指纹技术,为兔的指纹分析提供了一种快速高效的方法,可用于兔的遗传质量检测。     

不同等级环境对大、小鼠及其应用的影响

目的了解不同等级环境（屏障环境和普通环境）对实验大小鼠的一般生理表现和抗应激能力以及对药物反应的影响，初步判定严格的微生物控制是否影响实验动物的人类模型作用。方法将40只SPF级Wistar大鼠和200只SPF级BALB／c小鼠分别饲养于屏障环境和普通环境内，通过以下实验对比观察不同等级环境对实验大、小鼠及其应用的影响：每周测量动物的体重增长情况；饲养35d后，测定大鼠15项血液学指标、14项血液生化指标和9个脏器的相对重量；以抗缺氧实验和游泳实验判断对小鼠体质和抗应激能力的影响；以5．氟尿嘧啶急性毒性实验和戊巴比妥钠麻醉实验测试其对药物作用的异同。结果在5周观察期内，屏障环境饲养小鼠和大鼠的体重增长均明显快于普通环境的对照动物（P〈0．05）；普通环境饲养大鼠的血液RBC、WBC、PCT、PLT、GOT、GGT、GPT、CK、TB值高于屏障环境大鼠（P〈0．05），而CHO、LDL-C和HDL-C值低于屏障环境大鼠（P〈0．05）；不同微生物环境条件饲养小鼠的游泳耐力和抗缺氧实验结果接近，但是屏障环境组动物所获数据的变异较小；不同等级环境条件饲养小鼠的戊巴比妥钠麻醉反应和5-氟尿嘧啶中毒反应相似，而屏障环境组动物的麻醉维持时间较短，LD50较低，95％可信限狭窄。结论饲养于屏障环境和普通环境的实验大、小鼠在一般生理表现上出现部分差异，动物的抗应激能力和对药物的反应未发生显著变化；在屏障环境条件中，动物的药物反应更敏感、所获数据更稳定，因此，初步认为严格微生物控制条件下的SPF级动物可以作为生活在自然环境中的人类的模型动物。     

不同微生物等级控制Wistar大鼠部分生物学特性比较

目的:了解不同微生物控制程度(屏障环境和普通环境)对Wistar大鼠的部分生物学特性的影响。方法:40只SPF级Wistar大鼠分别饲养于屏障环境和普通环境内,每周测量体重,35 d后,测定15项血液学指标、14项血液生化指标和9个脏器的相对重量。结果:屏障环境内的Wistar大鼠体重增长明显快于饲养于普通环境的大鼠,普通环境饲养大鼠的血液RBC、WBC、PCT、PLT、GOT、GGT、GPT、CK、TB值高于屏障环境大鼠(P(0.05),而CHO、LDL-C和HDL-C值低于屏障环境大鼠(P(0.05),各脏器相对重量除肾外未见明显差异;结论:饲养于屏障环境和普通环境的Wistar大鼠在体重增长、血液学和血清生化指标等生物学特性存在显著差异。     

两个品系普通级和SPF级小型猪部分血液学指标的比较

目的 了解不同微生物控制程度(屏障环境和普通环境)对小型猪部分血液学和生化指标的影响. 方法分别对10只SPF(无特定病原体)级五指山小型猪、10只普通级五指山小型猪和10只SPF级广西巴马小型猪、10只普通级广西巴马小型猪测定13项血液学指标和21项血清生化指标.结果 普通级小型猪红细胞数(RBC)、血球比积(HCT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、高密度脂蛋白(H DL-C)低于SPF级小型猪,白细胞数(WBC)、天门冬氨酸转移酶(AST)高于SPF级小型猪 (P<0.05);且部分指标在不同品种间有差别.结论 普通级小型猪和SPF级小型猪部分血液学和血清生化指标等生物学特性存在显著差异.     

五指山小型猪高脂血症模型的建立

目的本研究通过给与五指山小型猪高脂饲料，旨在诱发小型猪的高脂血症。方法将30头小型猪随机分成3组：①对照组（n=6），喂正常猪饲料；②1．5％胆固醇组（n=12），饲喂含1．5％胆固醇、10．0％的牛油、6．0％花生油和0．5％胆盐的饲料；③3％胆固醇组（n=12），饲喂含3．0％胆固醇、10．0％的牛油、6．0％花生油和0．5％胆盐饲料。高脂饮食6个月。每月测定体重和血脂（TG、TC、HDL-C、LDL-C）。结果和结论五指山小型猪对高脂饮食反应敏感，高脂饮食一个月内，高脂饮食组TC、HDL-C和LDL-C从极低水平迅速升高，随后逐月缓慢升高。至高脂饮食4个月时，TC达到15．5～17．7mmol／L，LDL-C达到12～13mmol／L，HDL-C达到4．45～5．76mmol／L，与基线相比，TC升高约10倍，LDL-C升高约15倍，HDL-C升高约7倍，4个月后变化趋于稳定，而对照组没有变化，TG没有明显变化趋势，形成了典型的高胆固醇血症。1．5％胆固醇组和3％胆固醇组血脂指标差异不明显（P〉0．05），提示1．5％的胆固醇含量就足以获得高脂血症模型。     

阿司匹林对小型猪动脉粥样硬化的影响

目的探讨阿司匹林对早期动脉粥样硬化的干预作用。方法健康小型猪22头,随机分为对照组(n=6):给予正常猪饲料;高脂组(n=8):给予3%胆固醇高脂饮食;阿司匹林组(n=8):给予3%胆固醇高脂饮食 阿司匹林150 mg/d。高脂饮食4个月和6个月时,每组随机处死一半,定量测量动脉粥样硬化斑块厚度和斑块面积。结果3.0%胆固醇高脂饮食4个月就可以引起小型猪明显的动脉粥样硬化。高脂饮食4个月时,高脂组冠状动脉斑块厚度和截面积分别为107.2±45.7μm和0.113±0.05 mm2;阿司匹林组主动脉粥样硬化面积无明显减少,冠状动脉斑块厚度和截面积分别为74.2±24.7μm和0.093±0.05 mm2,与高脂组相比无统计学差异。高脂饮食6个月时,高脂组冠状动脉动脉粥样硬化斑块厚度为152.9±86.1μm、斑块/中膜厚度比0.85±0.49、斑块截面积为0.188±0.207 mm2、内膜/中膜面积比0.235±0.249;阿司匹林组主动脉粥样硬化面积明显减少,冠状动脉粥样硬化斑块厚度(47.8±19.8μm)、斑块/中膜厚度比(0.33±0.09)、斑块截面积(0.017±0.012 mm2)、内膜/中膜面积比(0.030±0.019),均明显低于高脂组(P<0.05或P<0.01)。结论阿司匹林对早期动脉粥样硬化有抑制作用。     

SPF级与普通级小型猪主要脏器形态与脏器系数比较

目的 比较两种不同微生物学控制等级的五指山小型猪主要脏器重量和相对重量差异.方法 选取4月龄近交培育的五指山猪20头,其中普通级和SPF级各10头,雌雄各半,分别测定体重和7种主要脏器重量,分析两种不同微生物控制程度的小型猪主要脏器形态及脏器相对重量.结果 SPF级小型猪体重显著低于普通级对照(P＜0.01),前者肺和脾的形态发生改变,肝、心、脑和肾上腺的相对重量显著高于普通级对照( P＜0.01),而SPF级的脾和肺的相对重量显著低于普通级对照(P＜0.01).结论 小型猪在不同微生物控制程度下体重和脏器系数存在显著差异,主要脏器形态与脏器系数差异可作为实验动物质量鉴定的参考依据.     

黄病毒属病毒感染性克隆的构建及应用

黄病毒属病毒感染性克隆的构建为探讨黄病毒致病机制和研究基因结构功能,新型疫苗制备,表达载体构建,假病毒包装等提供了新的技术平台。笔者对黄病毒属病毒感染性克隆的构建策略、方法及应用综述如下。