Polo样激酶3在前列腺癌中的表达及临床意义

目的探讨Polo样激酶3(Polo-like kinase 3,Plk3)在前列腺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组化技术检测68例前列腺癌组织及10例正常前列腺组织中Plk3的表达情况,分析Plk3表达与临床病理特征之间的关系,并通过对TCGA数据库中498例前列腺癌患者的Plk3表达值进行GSEA分析。结果 Plk3在前列腺癌组织中比癌旁组织中表达阳性率高,且差异有统计学意义(P=0.034);Plk3表达与前列腺癌的病理分级、临床分期、T分期、淋巴结转移和远处转移有关(P0.05),与年龄和Gleason score无关(P0.05);GSEA分析结果显示Plk3与前列腺癌的增殖和转移相关(FDR q0.05)。结论 Plk3在前列腺癌中表达增高,并促进前列腺癌的进展,其可能通过促进增殖和转移发挥作用。     

Sharpin蛋白在前列腺癌中的表达及其与Gleason评分、t—PSA关系的研究

目的探讨Sharpin蛋白在人不同前列腺癌细胞株中与前列腺癌组织中的表达及其与Gleason评分、血清PSA的关系。方法采用实时荧光定量PCR法,检测Sharpin在DUl45、PC-3和LNCaP3种常见的前列腺癌细胞株和RWPE．1正常前列腺上皮细胞株中的表达。同时采用免疫组织化学方法检测Sharpin在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达,并探讨与临床病理特征的关系。结果Sharpin在3种前列腺癌细胞株中的mRNA水平（1．62±0．31,1．36±0．23,2．1±0．1）要明显高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1（0．6±0．11）。免疫组织化学结果示Sharpin在前列腺癌组织中高表达,前列腺癌中的阳性表达率远远高于前列腺增生组织,平均染色得分也要远远高于前列腺增生组织。另外,Sharpin在前列腺癌组织中的表达与患者的Gleason评分和术前血清的t-PSA密切相关,均呈正相关（P〈0．05）。结论Sharpin可能是前列腺癌的肿瘤相关抗原,sharpin的表达可能具有评估前列腺癌患者病情、指导临床治疗方案的指导及判断预后及复发的作用。     

新形势下县级公立医院改革的实践与探索

改革是推动医疗卫生事业发展的动力源泉。广东省增城市人民医院整体移交中山大学孙逸仙纪念医院短短5年,积极抓住发展契机,紧紧依托中山大学及孙逸仙纪念医院先进的管理模式与领先的医疗技术,成功实现升级转型,推动了区域医疗卫生事业的跨越式发展。     

经尿道电切治疗小体积前列腺增生并膀胱颈挛缩疗效观察

目的探讨经尿道电切治疗小体积前列腺增生并膀胱颈挛缩的疗效和安全性。方法对86例下尿路梗阻临床症状明确的小体积前列腺增生患者及膀胱颈挛缩的患者进行经尿道前列腺切除术（TURP）及经尿道前列腺＋膀胱颈电切术（TURBN）,术后随访对比其手术前后国际前列腺症状评分（IPSS）、残余尿量（RU）、最大尿流率（Qmax）等指标,评价TuRP和TURBN在治疗小体积前列腺增生和膀胱颈挛缩中的作用。结果手术时间20—55min,平均（35±9．5）min。切除腺体重4—30g,平均（12．5±7．2）g。出血30—150ml,平均（60±21．2）ml。随访6～62个月,平均33个月后,IPSS评分由术前（27．5±3．0）分降至术后（8．9±2．9）分（P〈0．05）,残余尿量由（280±30）ml降至（28±10）ml（P〈0．05）,最大尿流率由术前的（9．0±3．5）ml／s升至术后（21．2±3．7）mL／s（P〈0．05）,术后2例患者出现尿道狭窄,2例出现瘢痕狭窄,需要再次手术治疗。结论TuRP＋TURBN治疗小体积前列腺增生及膀胱颈挛缩所致膀胱出口梗阻,疗效较满意,是较理想的治疗方法。     

腹腔镜下精索静脉高位结扎术的临床疗效分析

目的：探讨腹腔镜下精索静脉高位结扎术的临床疗效。方法：2008年7月～2010年10月,本院选择132例Ⅱ度以上原发性精索静脉曲张患者,进行了腔镜下精索静脉高位结扎手术治疗,年龄（31±4.5）岁,双侧21例,左侧111例;Ⅲ度26例,Ⅱ度106例。其中98例患者婚后不育,病程1～9年,女方经检查未发现异常。52例患者有阴囊坠痛感。实验室检查101例精液异常。均行腹腔镜下精索静脉高位结扎术。结果：132例手术顺利成功,手术时间为（40±18.7）min,出血量为（8±2.3）ml,术中无周围脏器损伤,术后无切口感染,无肠梗阻等并发症,术后平均住院2.6（2～3）d,术后随访24个月,有7例复发,2例并发鞘膜积液,1例发生睾丸萎缩（体积〈3 cm3为萎缩）。术后3个月复查97例患者,精液质量有不同程度改善提高（a＋b精子百分比〉6%为质量提高）。结论：腹腔镜下精索静脉高位结扎手术安全可靠、效果满意,创伤轻微,腹部切口细小美观,恢复快、住院时间短。     

两厂头孢米诺钠治疗泌尿系感染成本-效果分析

目的:分析不同厂生产的头孢米诺钠治疗泌尿系感染的疗效和用药费用,从而指导临床更合理选择和应用药物。方法:将64例随机分为A组和B组各32例,分别给予静脉滴注进口的头孢米诺钠1g和国产的头孢米诺钠1g,bid,连续用药7d。结果:A组临床有效率为93.8%,B组为90.6%,两组安全性较好;A组药费为1 820.0元,B组药费为1 030.4元,B组要比A组节省789.6元。结论:在两组治疗效果无显著性差异情况下,B组治疗泌尿系感染是一种经济有效的治疗方案。     

骨髓间充质干细胞在膀胱脱细胞基质上的生长及分化***★

背景：传统方法多采用平滑肌细胞和移行上皮细胞构建组织工程膀胱，并进行支架材料的双面种植，但由于平滑肌细胞取材培养困难，且体外传代有限，双面种植较为困难。 目的：实验拟验证以骨髓间充质干细胞及膀胱脱细胞基质构建组织工程膀胱的可行性。 设计：基础实验研究。 单位：中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心。 材料：实验于2006-03/2007-05在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心完成。实验室级别为卫生部部属医院开放实验室。1月龄SD大鼠，雌雄不限，体质量80~ 100g，由中山大学实验动物中心提供。新鲜猪膀胱取自南方医科大学动物实验中心。 方法：采用全骨髓培养连续贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞，并应用流式细胞仪检测其表面抗原。采用去污剂洗涤法制备猪膀胱脱细胞基质，并测定其纯度及特性。将第3代骨髓间充质干细胞接种到膀胱脱细胞基质上，以添加25 ng/L血管内皮生长因子（VEGF165）的培养液进行体外、体内复合培养，检测其相容性。体内实验以细胞单独培养为对照，体外实验以未植入细胞的材料为对照，并模拟合适的微环境诱导骨髓间充质干细胞生长分化，分别在4，8周后取出动物体内的复合材料行组织切片检查，并进行免疫组织化学角蛋白染色，检测上皮细胞再生情况。 主要观察指标：骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质的生物相容性。 结果：①采用全骨髓法成功培养出骨髓间充质干细胞，行流式细胞仪检测细胞表面抗原显示，传代第3代细胞CD29阳性细胞为99.43%。②制备的膀胱脱细胞基质具有良好的生物特性，镜下见均质状态的基质和细丝状的胶原纤维。体内外相容性实验表明骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的相容性，细胞生长状态良好。③4周后组织切片检查可见组织中较多炎症细胞浸润，胶原及弹性纤维排列紧密，免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、不连续的单层上皮生长，8周后可见组织中已无明显炎症细胞浸润反应，胶原及弹性纤维排列紧密，免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、连续的多层上皮生长。 结论：骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的生物相容性，并且在体内与周围组织有良好的生物相容性，可以作为构建组织工程膀胱的材料。     

靶向于前列腺癌特异性膜抗原shRNA的筛选与鉴定

目的 获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中前列腺癌特异性膜抗原(PSMA)表达的shRNA序列.方法 根据PSMA基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对PSMA基因cds区的siRNA序列及无意义的对照序列,组建与之对应的4对互补的单链DNA序列,包括siRNA的正义链和反义链;正义链序列按5'向3'顺序依次为:酶切位点(BamH Ⅰ)、干扰序列(19 bp)、loop环(TrCAAGAGA)、干扰序列的反向互补序列(19 bp)、中止信号(TTTTT)、酶切位点(EcoR Ⅰ).将合成的序列插入空载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector中,转染前列腺癌细胞后,通过real-time PCR检测不同序列片段对PSMA的mRNA抑制效果并通过Western blot检测对目的 蛋白PSMA的抑制效果.结果 设计的3条针对PSMA的序列中第2条的抑制效果最好,目的 序列位于PSMA(NM_004476)的1207到1226,茎环序列为5'-GATCC GTCTCAAAGTGCCCTACAATrcAAGAGA TTGTAGGGCACTTTGAGAC TTTTT G-3'.其对前列腺癌细胞株中PSMA的mRNA的抑制率为60.0%,对其蛋白表达的抑制率为86%.转染细胞后,细胞可以稳定低表达PSMA.结论 成功获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中PSMA表达的shRNA序列.     

高效抑制核因子κ—B的茎环RNA基因序列的获得

目的获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中核因子kappa—B表达的shRNA序列。方法根据核因子kappa—B基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对核因子kappa-B基因cds区的siRNA序列及无意义的对照序列,组建与之对应的4对互补的单链DNA序列,包括siRNA的正义链和反义链：正义链序列按5’向3’顺序依次为：酶切位点（BamH Ⅰ）、干扰序列（19bp）、loop环（TFCAAGAGA）、干扰序列的反向互补序列（19bp）、中止信号（TTTTT）、酶切位点（EcoR Ⅰ）。将合成的序列插入空载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector中,转染前列腺癌细胞后,通过real—timePCR检测不同序列片断对核因子kappa—B的mRNA抑制效果。结果设计的3条针对核因子kappa—B的序列中第3条的抑制效果最好,目的序列位于核因子KAPPA—B（NM_021975）的1096到1113,茎环序列为5＇-GATCC GCCCTATCCCTITACGTCA TTCAAGAGA TGACGTAAAGGGATAGGGC TTITT G-3’。其对前列腺癌细胞株中核因子kappa—B的mRNA的干扰效率为59％,对其蛋白表达的抑制率为81％。转染细胞后,细胞可以稳定低表达核因子kappa—B。结论成功获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中核因子kappa—B表达的shRNA序列,为后期研究核因子kappa-B在前列腺癌发病中的作用机理等研究提供了基础。     

保留前列腺包膜的膀胱全切除-原位回肠新膀胱术

目的 探讨保留前列腺包膜的膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术的手术方法及疗效.方法 2002年5月至2008年9月,对35例浸润性膀胱癌患者施行了保留前列腺包膜的膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术,其中开放手术22例,腹腔镜手术13例.术中保留患者的前列腺包膜、精囊、输精管、神经血管束.术后对患者进行定期随访,了解患者的生活质量、排尿情况,并检测患者的残余尿量、新膀胱压力及性功能情况等.结果 全部患者均顺利完成保留前列腺包膜和勃起神经的膀胱根治性切除一原位回肠新膀胱术.其中开放手术时间为210～330 min,平均271 min;术中出血200～800 ml,平均460 ml.腹腔镜手术时间为210～420 min,平均343 min;术中出血80～800 ml,平均377 ml.术后3个月IVU及代膀胱造影检查,显示双肾显影良好,无输尿管返流及梗阻,代膀胱充盈良好,容量约250～350 ml.术后6个月随访,所有患者均能自行排尿,2例患者有夜间尿失禁.术后71.4%(20/28)的患者保留了阴茎勃起功能.无患者出现尿道残端或前列腺包膜肿瘤复发,有2例发生盆腔淋巴结转移,1例骨转移.结论 保留前列腺包膜的膀胱根治性切除术与标准的膀胱前列腺根治性切除术相比,具有操作简单、控尿效果好、可保留勃起神经等特点,适用于对性功能要求较强、肿瘤未累及膀胱颈及前列腺的较年轻的患者.然而,其肿瘤控制效果还有待于进一步观察.