聚乙二醇化Exendin-4类似物受体亲和力测定方法的建立

基于荧光素酶报告基因法和本实验室前期构建的CHO-GLP-1R-CRE-Luc⁺检测模型细胞株,建立并优化了长效降糖多肽——聚乙二醇化Exendin-4类似物PE与GLP-1受体的亲和力测定方法,并对其进行了方法学验证。结果表明,当药物作用4 h,化学发光底物作用15 min,检测药物在5.7×10^-3~1.5×10³ nmol/L浓度区间内时,该检测方法的专属性和耐用性良好、准确度和精密度较高,符合《生物制品质量控制分析方法验证技术一般原则》的相关要求。本研究为该类GLP-1受体激动剂药物的快速评价与筛选奠定了基础。     

对叠氮-L-苯丙氨酸盐酸盐的合成及其在重组人内皮抑素中的定点引入

以对硝基-L-苯丙氨酸为原料,通过5步反应制备纯度较高的对叠氮-L-苯丙氨酸盐酸盐。利用构建好的重组表达载体和正交氨酰tRNA合成酶/tRNA(MjTyrRS/tRNA)系统将对叠氮-L-苯丙氨酸(pAzPhe)定点(31位)引入到人内皮抑素分子中,表达人内皮抑素中突变体——rhEs31m。对分离纯化所获得的目的产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定,突变体rhEs31m电泳纯度达90%以上,同时可被抗人内皮抑素抗体特异性识别。通过MTT法检测rhEs31m体外抗人脐静脉内皮细胞增殖活性,结果显示:与野生型rhEs相比,rhEs31m保留了大部分生物活性。本实验表明单个pAzPhe的定点引入并未破坏重组人内皮抑素的空间结构和生物活性。     

职业健康监护工作中存在的问题与思考

目的分析职业健康监护工作存在的问题,规范职业健康监护工作,提高职业健康监护质量。方法针对实际工作中存在的问题,提出解决方法与对策。结果职业健康监护工作中存在的问题是多方面的,通过完善改进可提高职业健康监护质量。结论加强部门合作,规范职业健康检查,可做好职业健康监护工作。     

叶酸受体介导靶向药物载体的研究进展

利用叶酸受体在肿瘤细胞(高表达)和正常细胞(低表达)上表达的差异性及叶酸受体与叶酸和叶酸类似物结合的高特异性、高亲和性,可望实现肿瘤的靶向性治疗。而叶酸修饰的药物载体不仅可实现难溶或不稳定药物的体内输送,减少体内酶对药物的降解,提高其生物利用率,同时还可有效地提高药物在肿瘤组织中的浓度,降低对正常组织的毒副作用。本文就近年来叶酸化药物载体的研究进展做一简要综述,旨在为肿瘤的靶向性治疗提供参考。     

新型靶向光敏剂Ⅰ对Hep-2细胞的光动力抑瘤活性

 目的　评价新型靶向性光敏剂Ⅰ（PSⅠ）对喉癌Hep-2细胞的靶向性和光动力活性。方法　采用bleaching实验评价PSⅠ的稳定性; 荧光测定法观察Hep-2细胞对PSⅠ的摄取能力; 四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测PSⅠ浓度、光照剂量及光照时间点对Hep-2细胞存活率的影响。结果　在光照50 min后,PSⅠ的吸光度（A）值仅降低了11 %,表明其稳定性可满足光动力治疗的需要;Hep-2细胞对PSⅠ的摄取随PSⅠ浓度的增加而增加,但过量叶酸的存在可明显抑制Hep-2细胞对PSⅠ的摄取（t值分别为5.96,4.89,均P＜0.01）;MTT实验结果表明Hep-2细胞的存活率与PSⅠ浓度和光照剂量呈负相关（r＝-0.763,P＝0.017; r＝-0.946,P＝0.001）。当PSⅠ浓度为14 μmol／L、光照剂量为18 J／cm2时,Hep-2细胞的存活率仅为34 %,而在无光照时即使光敏剂浓度升至110 μmol／L,Hep-2细胞的存活率仍为100 %;给予PSⅠ 24 h后再进行光动力治疗（PDT）可有效地抑制Hep-2细胞的生长,其存活率只有32 %。结论　PSⅠ拥有满意的光稳定性和低的暗毒性,对Hep-2细胞有很好的靶向性和光动力活性。     

利节通痹酒剂对胶原诱导性关节炎大鼠的影响

目的 考察利节通痹酒剂（Lijie Tongbi liquor,LJTB）对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）模型大鼠的抗炎镇痛作用以及对关节损伤的影响。方法 通过足跖注射牛Ⅱ型胶原建立大鼠CIA模型。40只造模成功的SD大鼠随机分为模型组、雷公藤多苷组（阳性对照组）以及LJTB 15.5,7.75 g·kg^-1组,并设正常对照组。连续灌胃给药4周,定期考察一般行为学、关节炎指数（arthritis index,AI）评分、足肿胀度、痛阈值,同时检测肝功能[谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）]和肾功能[肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）];给药结束后,通过酶联免疫法检测血清C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）及类风湿因子（rheumatoid factor,RF）水平,并观察踝关节病理组织学变化。结果 与模型组比较,连续给药3周,LJTB能显著降低胶原诱导性关节炎大鼠的AI评分（P<0.05或P<0.01）,并改善足肿胀度。连续给药4周,LJTB 15.5 g·kg^-1显著降低大鼠足肿胀度、AI评分、血清CRP及RF含量（P<0.05或P<0.01）,显著升高痛阈值（P<0.05）,减少关节软骨损伤。给药期间,LJTB 15.5,7.75 g·kg^-1对ALT、AST及Cr、BUN均无显著影响。结论 LJTB通过降低CRP水平,调节炎症反应,缓解关节软骨损伤;升高痛阈值,产生镇痛作用,且无肝肾毒性。     

宁洱县6．03地震后学校生活饮用水细菌总数、大肠菌群监测结果分析

目的：了解宁洱县学校生活饮用水水质卫生情况，为震后防病提供决策依据。方法：选择县城高中、初中、小学学校，乡（镇）所有高（初）中、小学学校，村小学校1-3所，重灾区所有学校作为监测点。检验方法按《生活饮用水标准检验法》fGB5750—85）；水质评价标准按“农村实施《生活饮用水卫生标准》准则（1991．7．1）”实行三级分类判定，细菌总数、大肠菌群两项指标均合格为合格饮用水。结果：细菌总数、大肠菌群两项指标（以下简称“两项指标”）均合格13样，合格率38．24％，单项指标细菌总数合格24样，合格率70．59％，大肠菌群合格15样，合格率44．12％，细菌总数与大肠菌群单项指标合格率有显著性差异（X^2=4．87，D〈0．05）；县城、乡（镇）、村三级学校生活饮用水细菌总数、大肠菌群及两项指标检测合格率无显著性差异（p〉0．05）。结论：宁洱县学校生活饮用水微生物指标检测合格率不高（38．24%），饮用水卫生存在安全隐患，应进一步加强消毒指导与管理工作。     

思茅市直属10所学校学生营养状况

营养不良对学生的生长和智力发育有着极大的危害，营养过剩可导致高血压、糖尿病等的发生。了解和掌握学生的营养状况，及时纠正不良饮食习惯。促进学生健康成长，是学校卫生工作的重要内容。为了解学生的营养状况，笔者对2006年思茅市直属10所大中学校学生健康体检资料进行了分析。     

新型光敏剂I对头颈部肿瘤细胞的光动力活性

目的在光敏剂卟吩分子中通过PEG链引入靶向基团-叶酸,构建了一个新型的光敏剂Ⅰ,并评价光敏剂Ⅰ对喉癌Hep-2细胞和鼻咽癌CNE细胞的肿瘤靶向性和光动力活性。方法利用West-ern blot实验检测Hep-2细胞和CNE细胞的叶酸受体表达;采用荧光测定法评价两种细胞在有或无过量叶酸存在时对光敏剂Ⅰ的吞噬作用;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验检测光敏剂Ⅰ在有或无光照条件下对Hep-2细胞和CNE细胞的细胞毒性,以及光敏剂浓度和光照剂量对细胞存活率的影响。结果 West-ern blot实验结果表明Hep-2细胞有较强的叶酸受体表达,而CNE细胞则为叶酸受体低表达。两种细胞对光敏剂I的摄取均随光敏剂浓度的增加而增强,但Hep-2细胞的摄取能力明显强于CNE细胞(P<0.01),且过量自由叶酸的存在可竞争性地抑制Hep-2细胞对光敏剂I的摄取(P<0.01)。MTT实验结果显示在光照时,光敏剂I对Hep-2细胞和CNE细胞均有显著的光毒性,且其光动力活性与光敏剂浓度和光照剂量呈正相关性。结论光敏剂I对叶酸受体阳性表达的喉癌Hep-2细胞有明显的靶向性和光动力活性。     

生活饮用水产生二次污染的原因和措施

<正>城市供水系统的重要职责就是能够提供给用户符合国家《生活饮用水卫生标准》的自来水。在本文中我们对目前城市居民饮用水的质量问题,从微生物和管网两个角度进行分析,对产生的二次污染问题的整治分析过程和结果对城市供水水质的安全保证有着重要意义。水质的安全性就是指居民所应用的水质要满足国家现行的《生活饮用水卫生标准》的限制。水质的安全性需要从以下两个方面进行分析,一