应重视幽门螺杆菌的分离培养

目的通过比较3种不同幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)感染诊断方法之间的差异,使临床重视Hp的分离培养工作.方法对2000年我院胃镜检查者312例同时作Hp分离培养、病理切片和快速脲酶试验,比较其检出率.结果近期未用抗菌药物治疗的十二指肠溃疡患者活检材料中Hp分离培养检出率达93.75%,把其他2种方法与分离培养相比,则快速脲酶试验存在20.72%的假阳性和3.98%的假阴性结果,病理切片存在8.11%的假阳性和32.84%的假阴性结果;快速脲酶试验和病理切片组合后与分离培养相比,则存在2.99%的假阴性和23.42%的假阳性.结论分离培养是Hp感染诊断的金标准,临床上应积极推广应用.     

不同毒力钩端螺旋体引起的细胞因子表达的差异

目的 通过比较不同毒力钩端螺旋体引起豚鼠细胞因子表达的差异,探讨钩端螺旋体病的炎症反应及其发病机制.方法 豚鼠腹腔内分别注射致病性钩端螺旋体赖型有毒株Lai株,赖型无毒株IPAV株,以及非致病性钩端螺旋体Patoc型Patoc 1株,观察豚鼠各脏器的病理改变;EnVision二步法检测钩端螺旋体在各脏器中的分布;应用Real-time RT-PCR法检测豚鼠血液中细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12、MCP-1 mRNA的表达.结果 钩端螺旋体IPAV株和Patoc 1株不能引起豚鼠组织病变,但是在感染早期引起细胞因子的高表达;而Lai株可以引起典型的钩端螺旋体病病变,但是在感染早期引起细胞因子较低表达.结论 致病性钩端螺旋体赖型毒力株Lai株引起的细胞因子的表达明显低于非致病钩端螺旋体Patoc型Patoc 1株和赖型无毒株IPAV株,可能与钩端螺旋体病炎症反应轻微有关,有利于钩端螺旋体逃避宿主的免疫反应,在体内繁殖扩散.     

双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定

目的研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性。方法对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b( ),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功能鉴定。同时,以RT-PCR检测LEBIa2503的转录情况。另外,也对双曲钩体菌体本身有无溶血活性进行检测。结果双曲钩体LEBIa2503基因与问号钩体tlyA溶血素基因在蛋白水平上有相同的结构域,属于直系同源基因(orthologues gene)。原核表达的重组融合蛋白在羊血平板上出现β-溶血环。以RT-PCR的方法能检测到在双曲钩体中有LEBIa2503基因的转录,但双曲钩体菌体本身则检测不到溶血活性。结论未发现双曲钩体有溶血活性,但其含有溶血素基因tlyA,并且在普通培养环境下能被转录,这对进一步研究其内在机制奠定了基础,并对探索致病性问号钩体致病机制提供了一定线索。     

LA0301为一新的定位于钩端螺旋体外膜的蛋白

目的 研究LA0301在钩端螺旋体中的膜定位.方法 运用Triton X-114抽提分离钩端螺旋体膜蛋白,以LA0301抗体为一抗进行Western blot.结果 Western blot表明,LA0301位于有机相.结论 LA0301为定位钩端螺旋体外膜的蛋白,这为开发研究LA0301为钩端螺旋体疫苗候选基因打下了基础.     

LA0202为钩端螺旋体中一孔形成溶血素蛋白

目的 研究LA0202为孔形成溶血素。方法体外克隆表达LA0202蛋白。纯化的LA0202蛋白作用绵羊血细胞观察LA0202的溶血活性并用渗透压保护剂PEG6000添加到作用体系研究渗透压保护剂对LA0202溶血活性的影响。透射电镜及扫描电镜观察LA0202作用于体外培养的肝细胞后对细胞的毒性。结果渗透压保护剂PEG6000能够抑制LA0202的溶血活性。LA0202作用于肝细胞后引起肝细胞的毒性损伤。结论LA0202为一孔形成溶血素。     

纤维支气管镜下植入125I粒子治疗中央型肺癌

目的评估植入125I粒子治疗中央型肺癌的临床价值。方法56例确诊的晚期中央型肺癌患者，经纤维支气管镜引导植入125I粒子，定期复查，观察疗效及不良反应。结果56例中央型肺癌患者经治疗总有效率达76．78％，肺不张复张有效率为90．90％。结论125I粒子经纤维支气管镜植入治疗晚期中央型肺癌有效，且安全可行。     

固有免疫在钩端螺旋体感染中作用的研究进展

钩端螺旋体病是一种在世界范围内传播的重要的人兽共患病。钩端螺旋体（钩体）感染机体后,固有免疫在早期控制感染扩散中的作用及意义逐渐受到重视。巨噬细胞对钩体具有吞噬和杀伤作用,同时,致病性钩体可逃避巨噬细胞杀伤。中性粒细胞、补体系统和细胞因子在抵御钩体感染方面也具有一定的作用。     

医学功能学网络虚拟实验室构建与使用探索

为克服传统功能学实验教学中存在的实验室资源、课时限制等不足．尝试构建与初步应用医学功能学网络虚拟实验室教学平台。相应虚拟教学软件采用c#语言、PhotoShop,3DSMAX、Flash等编写制作,并通过TCP／IP建立的Web服务器实现网络教学平台功能。网络实验室平台架构中,包含学生实验操作前台系统和实验教学管理后台系统。通过3届医学生的使用表明,网络虚拟实验室教学平台已初步实现其教学功能,其应用有利于提升学生自主学习能力和创新能力,解决了课时缩减和资源短缺等实验教学发展的瓶颈问题。     

水杨酸及其相关化合物对分枝杆菌耐药性影响的研究进展

水杨酸(salicylate)存在于自然界的柳树皮、白珠树叶及甜桦叶中。具有水杨酸盐成分的植物在医药领域的应用,可以追溯到古代。公元前400年,希波克拉底记述过柳叶有奇效,煎煮柳叶,所得的汤剂可用于缓解分娩疼痛和治疗耳痛。1829年Brugnateli和Fontana分别发现了柳树皮的有效成分是水杨酸苷。1838年,Piria等由水杨酸苷制得水杨酸。随后水杨酸应用于缓解急性痛风和类风湿性关节炎,取得了一定的疗效。1877年还记载了水杨酸钠在排泄方面的应用。Maclagan比较了水杨酸苷和水杨酸作为解热药的效果和对急性风湿病的效果,发现水杨酸苷的效果归功于其在体内转化为水杨酸。但由于水杨酸对肠胃     

致病性钩端螺旋体对豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制作用

目的通过比较不同毒力钩端螺旋体对豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨固有免疫在钩端螺旋体病发病机制中的作用。方法用三种不同毒力的钩体（致病性问号钩端螺旋体赖型有毒株Lai株、赖型无毒株IPAV株以及非致病性双曲钩端螺旋体Patoc型Patoc Ⅰ株）分别感染体外培养的豚鼠腹腔巨噬细胞,并分别于感染后0.5、1．5、3和6h加入热灭活表皮葡萄球菌孵育30min,通过计算巨噬细胞对灭活表皮葡萄球菌的吞噬率和吞噬指数,检测钩体对巨噬细胞吞噬功能的影响;感染后3h透射电镜观察巨噬细胞对钧体的吞噬、降解和细胞超微结构的变化;