雷公藤内酯醇的细胞内定位研究?

目的：检测雷公藤内酯醇的细胞内定位,探讨其在细胞内的作用位点。方法采用4-溴甲基-7-甲氧基香豆素标记雷公藤内酯醇,与人肝癌细胞孵育;并与细胞核染料 PI 或细胞质膜染料 DiI 行双色荧光染色,用荧光显微镜观察。结果与对照相比,香豆素标记在紫外激发下呈特异性的淡蓝色荧光;与 DiI 共定位显示,香豆素标记在细胞质(膜)存在;与 PI 共定位显示,香豆素标记在细胞核存在,且荧光强于细胞质(膜)。结论雷公藤内酯醇在细胞内主要位于细胞核,其次是细胞质(膜),提示雷公藤内酯醇可能主要在细胞核内起作用,其次是在细胞质(膜)上起作用。     

雷公藤内酯醇通过p38MAPK信号通路诱导Hut102细胞凋亡

目的 探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TP)诱导皮肤T细胞淋巴瘤蕈样肉芽肿细胞株Hut102的凋亡及其机制.方法 体外培养的Hut102细胞与12.5、25、50、100 nmol/L雷公藤内酯醇共同孵育,分别在24、48、72 h用MTT法检测Hut102细胞的增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术分析细胞凋亡,Western blot检测Hut102细胞中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)、caspase-3蛋白的表达水平.结果 不同浓度雷公藤内酯醇(12.5、25、50、100 nmol/L)作用Hut102细胞24 h后的增殖抑制率分别为8.67%、30.02%、52.54%、59.62%.Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测经25、50、100 nmol/L雷公藤内酯醇处理24 h后Hut102细胞凋亡率分别为9.19%、21.49%、26.34%,当50 nmol/L雷公藤内酯醇组预先用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后,Hut102细胞凋亡率下降为14.35%.不同浓度雷公藤内酯醇(50、100 nmol/L)处理Hut102细胞后p38、caspase-3蛋白的表达被激活,同样50 nmol/L雷公藤内酯醇组也预先用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预,结果p-p38的表达降低,caspase-3激活被抑制.结论 雷公藤内酯醇可以抑制Hut102细胞的增殖,其作用机制可能是通过激活p38MAPK信号通路使部分Hut102细胞产生凋亡.     

雷公藤内酯醇协同地塞米松诱导蕈样肉芽肿hut-102细胞凋亡及其机制

目的:探讨雷公藤内酯醇(Triptolide,TP)与地塞米松联合对蕈样肉芽肿(Mycosis fungoides,MF)hut-102细胞体外增殖、凋亡是否具有协同作用及其机制.方法:MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白印迹法检测糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor,GR)和凋亡相关蛋白Caspase-3表达.结果:①不同浓度TP(6.25、12.5、25 nmol/L)和地塞米松(10-7、10-6、10-5mol/L)对hut-102细胞均有增殖抑制作用,与时间、浓度相关;12.5 nmol/L TP与不同浓度地塞米松联合,细胞抑制率随地塞米松浓度升高呈现协同作用.②TP和地塞米松均能诱导hut-102细胞凋亡,联合用药凋亡率明显高于单药,具有交互效应.③10-5mol/L地塞米松作用hut-102细胞后,GR表达降低(P<0.05),联合用药(12.5 nmol/L TP+10-53mol/L地塞米松)GR表达上调、Caspase-3激活增强(P<0.05).结论:TP联合地塞米松可明显抑制hut-102细胞增殖,增强诱导凋亡,具有协同效应,其作用机制可能与GR表达上调、Caspase-3激活增强有关.     

依匹斯汀等抗组胺药物抗炎作用的研究

目的　观察依匹斯汀等几种临床常用抗组胺药物对卵蛋白致敏小鼠脾淋巴细胞表达炎症因子的影响。方法　小鼠腹腔注射卵蛋白构建致敏动物模型，分离小鼠脾淋巴细胞，以依匹斯汀等几种抗组胺药物进行阻断处理。用酶联免疫吸附法（ELISA）检测培养细胞上清液中白三烯B4（LTB4）、白介素4（IL-4）、白介素5（IL-5）的水平。结果　依匹斯汀具有明显的抑制致敏淋巴细胞释放LTB4、IL-4、IL-5的作用，且具有剂量依赖性。在相同作用浓度下，依匹斯汀组致敏淋巴细胞释放的LTB4浓度显著低于依巴斯汀组和西替利嗪组；IL-4浓度显著低于西替利嗪组，与依巴斯汀组相当；IL-5的浓度显著低于西替利嗪、依巴斯汀组。结论　依匹斯汀具有较强的抗炎症作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞核小体释放水平及其临床意义

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)释放核小体的水平变化及其与自身抗体、病情活动度的关系。方法应用ELISA方法检测SLE患者PBMC裂解上清液核小体及其血清自身抗体水平,用SLEDAI积分法评估SLE活动度。结果活动期SLE患者PBMC释放核小体的平均水平为(39.39±25.70)IU/mL,明显高于正常人对照组(11.73±7.87)IU/mL和静止期SLE患者(13.44±8.82)IU/mL,并且与其凋亡率呈显著正相关(r=0.83,P<0.001);SLE患者PBMC的核小体释放水平与SLEDAI积分数、ds鄄DNA抗体水平和补体C3降低水平均呈显著正相关(P值分别<0.01、0.01和0.05)。结论SLE患者PBMC凋亡产生的核小体水平变化与SLE临床病情活动程度密切相关,提示核小体可能是诱导SLE发病的重要抗原之一。     

光动力疗法在感染性皮肤病中的应用

光动力疗法是通过局部或系统给予光敏剂后以特定波长光照射从而对靶组织产生选择性杀伤作用.20世纪90年代以前光动力疗法的研究主要集巾于肿瘤的诊断和治疗,随着新光敏剂的出现和应用,光动力疗法更加广泛地应用在各种疾病的治疗中,尤其是在一些局部感染性皮肤病方面表现出较好的临床疗效,局部微生物感染的光动力治疗成为新的研究热点.     

HPV16 E7抗原的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞表位的筛选与鉴定

目的筛选和鉴定人工合成的人乳头瘤病毒16型E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞预测表位。方法对预测的E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位运用标准Fmoc方案进行合成与纯化，采用标准^51Cr释放试验检测特异性CTL诱导活性。结果筛选并鉴定出E718-19(YMLDLQPET)和E749-57(RAHYNIVTF)2条人乳头瘤病毒16型E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性CTL表位。结论E711-19(YMLDLQPET)和E749-57(RAHYNIVTF)抗原性较强，有可能作为HPV感染治疗用肽疫苗的候选表位。     

喙状凸脐孢致角膜溃疡

目的：分离和鉴定1株引起角膜溃疡的罕见病原菌。方法：取角膜溃疡患者眼坏死组织涂片及培养进行鉴定。结果：根据直接镜检和培养的菌落形态及镜下见孔处产孢，分生孢子梗呈膝状弯曲，可见离壁分隔，两端细胞色暗，基部可见脐状突起，经鉴定为喙状凸脐孢。结论：该例为国内罕见的由喙状凸脐孢引起的角膜溃疡，经及时治疗预后较好。     

气管切开病人病衣的制作

医务人员在护理气管切开病人时常遇到一些不便之处 ,如病员在床上翻身活动常使被盖遮住或堵塌气管切开处 ,以导致呼吸不畅 ;病人因气管切开致被子不便盖住肩部 ,易受凉 ,特别是在寒冷季节 ;对于痰较多的病人容易弄脏床单元等。为解决以上问题 ,我科于 2 0 0 3年 12月制作了罩衣式病员服 ,经临床实践符合要求 ,减少了病员术后诸多不便 ,现介绍如下。1　制作方法　　选用纯棉白底子 ,黑条子的布料 ,质地稍厚。纯棉布料易贴身吸汗 ,对皮肤无刺激 ,感觉舒适。样式大体为手术衣样式 ,遮住病人的膝部或以下 ,袖子为长袖。制作要点 :主要在领部进行…     

角膜异物分区分级和记录方法

目的探讨角膜异物分区、分级及记录方法。方法对５６０例角膜异物分区、分级研究,在此基础上提出一种较为适用的记录方法,并用此指导临床实践。结果角膜异物有其分布特点,区、级不同,治疗及愈后不同。用此记录方法指导临床实践准确方便,不会出现误治漏治。结论角膜异物分区、分级及记录方法在临床上科学实用,在法医学上亦有使用价值