检测烟曲霉菌GM抗原生物素-亲和素-夹心酶联免疫吸附试验法的建立

本研究用重组烟曲霉半乳糖甘露聚糖 (ＡＦＭＰ1) ,制备免疫血清 ,建立一种以生物素 亲和素 (ＢＡ)系统为基础的夹心酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)法 ,快速检测烟曲霉ＧＭ抗原[1] 。一、材料与方法1.动物和菌株来源 :家兔和豚鼠购自第一军医大学动物所 ,表达ＧＳＴ ＡＦＭＰ1融合蛋白ＢＬ2 1菌种及全部真菌标准株均由香港大学微生物系提供。2 .主要试剂 :ＧＳＴ融合蛋白纯化试剂盒、ＰｒｏｔｅｉｎＧＳｅｐｈａｒｏｓｅ 4Ｂ和ＥＣＬ底物显色剂 (ＡｍｅｒｓｈａｍＰｈａｒｍａｃｉａ公司 ) ,弗氏佐剂 (Ｓｉｇｍａ产品 ) ,活化Ｓｕｌｆｏ ＮＨ…     

流式细胞术鉴定特异性识别曲霉孢子单克隆抗体

目的筛选可以与悬浮状态下曲霉孢子结合的特异性单克隆抗体。方法采用流式细胞术检测与曲霉活孢子结合的单抗。结果 2株单抗MA3和Con2可特异性结合悬浮状态下的烟曲霉孢子,其中单抗MA3可结合烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉等常见致病曲霉孢子。结论成功筛选到2株特异性结合曲霉孢子的单抗。     

224例新生儿轮状病毒感染临床流行病学研究

目的 了解广州地区住院新生儿轮状病毒感染情况。方法 收集广州地区２２４例住院新生儿粪便６４５份，用核酸电泳（ＰＡＧＥ）技术检测轮状病毒（ＨＲＶ）ＲＮＡ。结果 新生儿ＨＲＶ感染显著很普遍，感染率高达６５．１６％，临床表现为轻型腹泻或无症状。流行季节与非流行季节的感染率分别为７７．３１％和５３．６３％，二者感染后发师和无症状的比例亦不相同，流行季节发病率明显高于非流行季节。结论 新生儿ＨＲＶ传染源主要     

支原体肺炎合并张力性气胸一例

支原体肺炎合并张力性气胸一例邹商群郝卫患儿男，２岁８个月。因发热、咳嗽７天，伴呼吸困难２小时入院，７天来患儿体温持续在３９０℃以上，伴有咳嗽，在外院诊断为支气管肺炎，经头孢呋辛、头孢他啶等治疗７天病情加重，２小时前突起呼吸困难、发绀、烦躁不安而急诊...     

聚合酶链反应标记轮状病毒地高辛素探针的初步应用

目的为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术标记的地高辛素（ＤＩＧ）探针的特异性和敏感性。方法用聚合酶链反应技术制备地高辛素标记的人类轮状病毒（ＨＲＶ）ｃＤＮＡ探针，经ｃＤＮＡ－ＲＮＡ斑点杂交。结果该探针具ＨＲＶ特异性，可检出１０ｐｇ的ＲＮＡ。应用该项技术检测了１２０份婴幼儿腹泻粪样标本，其阳性率为６５％，明显高于ＰＡＧＥ方法（４９．１％）的阳性率。结论ＰＣＲ方法直接制备地高辛素标记的ｃＤＮＡ探针方便、快速、特异性好、标记率高。     

几种检测新生儿粪便轮状病毒方法的比较

几种检测新生儿粪便轮状病毒方法的比较吴建春，郝卫，彭宜君，姚英民，付万海采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）、反向间接血凝抑制试验（ＲＰＨＩ）技术检测了１５０例新生儿粪便轮状病毒（ＨＲＶ）。ＥＬＩＳＡ试剂盒购自兰州生物制...     

Ⅰ型登革病毒NS1抗原捕获ELISA的建立和初步临床诊断应用

目的以登革病毒特异性非结构蛋白1（NS1）单克隆抗体为基础建立Ⅰ型登革病毒（DEN1）抗原检测的酶联免疫吸附（ELISA）法，并探索从病人早期血清样品中检测DEN1-NS1的可行性。方法利用已制备的抗DEN1-NS1单克隆抗体（单抗），进行多种抗体组合配对优化模式的分析，建立双抗体夹心抗原捕获ELISA，以469份健康人血清样品确定cut off值，检测DEN1感染患者急性期血清样品。结果对多种抗体组合反复筛选，最终确立了最佳的包被单抗和酶标测定单抗，建立了抗体夹心捕获DEN1-NS1抗原的酶联免疫测定方法，能特异检测DEN1，与其他血清型登革病毒不发生交叉反应。检测16例临床确诊DEN1感染病人急性期血清样品，15例呈特异的抗原反应阳性。结论成功建立了DEN1-NS1抗原捕获ELISA并应用于临床血清样品的检测，为登革热的早期实验室诊断提供技术方法。     

聚合酶链反应检测新生儿尿巨细胞病毒DNA

采用聚合酶链反应技术（PCR），对45例疑为巨细胞病毒（HCMV）感染的新生儿，测定其尿中的HCMV－DNA，同时与尿培养法进行比较．结果前者阳性为44．44％，后者为17．78％（P＜0．01）。从而证实PCR法具敏感、特异、简便、可靠等优点，达到对HCMV感染的早期诊断和及早干预的目的。     

猪肺表面活性物质对整肺灌洗兔呼吸窘迫模型的疗效

用自猪肺提取的肺表面活性物质（ＰＳ）经气管滴入治疗整肺灌洗型成年兔呼吸窘迫模型，观察了血气、动态肺顺应性、生命体征、ｘ线胸片、病理变化等指标。结果表明猪ＰＳ对实验性ＰＳ缺乏和肺损伤造成的呼吸窘迫有显著治疗作用。     

曲霉抗原双抗体夹心ELISA法特异性检测

目的 用2组曲霉单克隆抗体(mAbs)建立特异性识别不同种类曲霉抗原的检测方法.方法 采用天然烟曲霉抗原免疫,获得广谱针对曲霉抗原的单克隆抗体;采用重组烟曲霉抗原获得特异性针对烟曲霉抗原的单克隆抗体,用间接免疫荧光鉴定,并分别建立2种双抗体夹心ELISA法,对19种常见的环境和临床分离曲霉株、马尔尼菲氏青霉菌及念珠菌培养液进行检测.结果 间接免疫荧光显示,用天然烟曲霉抗原免疫获得的单克隆抗体(mAbs-1)可广谱识别多种曲霉分离株,而重组烟曲霉抗原获得的单克降抗体(mAbS-2)仅能特异性结合临床和环境分离的烟曲霉抗原.用mAbs-1建立的双抗体夹心ELISA法可检测19种常见曲霉株培养液;用特异性针对烟曲霉抗原单克降抗体(mAbs-2)建立的双抗体夹心ELISA法可特异性检测临床和环境分离株烟曲霉培养液;与其他曲霉株无交叉反应;2种双抗体夹心ELISA法与马尔尼菲氏青霉菌及念珠菌培养液均无交叉反应.结论 2种曲霉单克降抗体双抗体夹心ELISA法,除可广谱检测环境和临床分离曲霉株,还可以区分烟曲霉与其他曲霉,可作为监测环境、农产品、食品中的曲霉污染和早期诊断曲霉病的新技术手段.