异位中肾管囊肿合并异位睾丸恶变1例报告并文献复习

目的:报告1例罕见异位中肾管囊肿合并异位睾丸恶变病例,提高对本病的诊治水平。方法:回顾分析异位中肾管囊肿合并异位睾丸恶变的病例的临床资料,结合国内外相关文献,探讨异位中肾管囊肿合并异位睾丸恶变的发病机制、诊断及治疗。结果:经腹切除巨大囊肿及右侧异位恶变睾丸,左侧隐睾行下降固定,病理示"右异位中肾管囊肿,右侧异位睾丸精原细胞瘤",随访1年无转移。结论:异位中肾管囊肿合并异位睾丸恶变极为罕见,影像学检查可协助诊断,但最终需病理确诊,应早期行手术切除。后续治疗取决于隐睾恶变的病理类型及分期。     

抗人肾癌G250单克隆抗体的制备及其功能鉴定

目的 大量制备、纯化抗人G250单克隆抗体(G250-MeAb),并鉴定其与G250合成多肽及细胞天然抗原的结合特异性.方法 将抗人G250杂交瘤细胞接种BALB/C小鼠腹腔,大量制备G250-McAb.采用正辛酸-硫酸铵沉淀法获得粗制抗体,然后经蛋白A亲和层析柱纯化抗体.采用荧光激活细胞分类术及免疫组织化学法鉴定G250-McAb与抗原结合特异性.结果 成功制备抗人G250-MeAb,腹水经纯化后,获得了高纯度抗人G250单克隆抗体,蛋白浓度达4.78 g/L.荧光激活细胞分类术及免疫组织化学结果 显示G250-McAb与G250表达阳性的Ketr-3细胞特异性结合,而不与G250表达阴性的ACHN细胞结合.结论 成功制备并纯化G250-McAb,为进一步开展G250-McAb介导的肾癌诊断、治疗奠定了基础.     

左肾癌术后淋巴转移侵犯降结肠一例报告

患者,女,59岁.因血便2个月于2007年4月入院.患者近2个月发现大便带血并有黏液,大便不成形、变细,便秘,排便困难,有低位不全肠梗阻表现.CT检查示"降结肠占位".既往8年因肾癌行左肾根治性切除术,体检:贫血貌,浅表淋巴结未触及肿大,左腰部可见手术切口瘢痕,腹稍胀.软,左中下腹压痛,肠鸣音稍亢进.     

表达白细胞介素18的条件增殖腺病毒在肾癌Ketr-3细胞中的生物活性及抗肿瘤作用

目的 观察表达白细胞介素18(IL-18)基因的条件增殖腺病毒在肾癌Ketr-3细胞中的生物活性及其对Ketr-3细胞的杀伤作用.方法 通过荧光显微镜观察表达绿色荧光蛋白的条件增殖腺病毒(ZD55-EGFP)在肾癌Ketr-3细胞中的感染和增殖情况.分别将表达IL-18的条件增殖腺病毒(ZD55-IL-18)及表达IL-18的普通腺病毒(Ad-IL-18)感染人肾癌Ketr-3细胞系,通过Western blot法检测病毒E1A和IL-18蛋白的表达;免疫细胞化学染色检测IL-18抗原表达;TUNEL法检测Ketr-3细胞的凋亡情况;噻唑蓝(MTT)比色法检测Ketr-3细胞存活情况.结果 ZD55-EGFP能有效感染肾癌Ketr-3细胞并在其中大量增殖.Westem blot检测结果 发现ZD55-IL-18能在肿瘤细胞内表达E1 A并有效介导IL-18表达,在病毒感染Ketr-3细胞48 h后,ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组的IL-18蛋白表达量分别为255.6±3.1、118.7±2.90免疫组织化学检测显示ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组的IL-18抗原阳性率分别为(82.4±3.2)%和(23.4±1.9)%.TNUEL检测结果 显示ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组的细胞凋亡率分别为(52.2±3.5)%和(25.5±1.9)%.病毒感染4 d后,MTT检测结果 显示ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组细胞存活率分别为(32.6±2.3)%和(73.3±2.5)%,表明ZD55-IL-18对Ketr-3细胞有显著的杀伤作用.结论 ZD55-IL-18能在Kerr-3细胞中高效特异性表达IL-18基因并显示出良好的抗肿瘤作用.     

3种建立人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型方法比较

目的建立3种人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型,优选建模方法。方法采用Bal/c裸鼠,分别通过直接注射细胞悬液(方法一)、肿块包埋(方法二)和经过引瘤后原代细胞培养注射细胞悬液(方法三)3种方法建立人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型,并取瘤组织进行病理检查。结果方法一成瘤率为53.3%,成瘤时间平均为(14.5±1.64)天,2周时肿瘤平均大小为(147.2±8.7)mm3;方法二成瘤率为93.3%,成瘤时间平均为(10.5±0.87)天,2周时肿瘤平均大小为(198.3±17.2)mm3;方法三成瘤率为76.7%,成瘤时间平均为(11.2±0.87)天,2周时肿瘤平均大小为(182.4±5.6)mm3,3组的瘤组织病理检查无明显差别。结论经过引瘤后原位细胞培养,然后注射细胞悬液,是建立肾癌模型和进行生物治疗研究的合理方案。     

人端粒酶逆转录酶基因RNAi表达载体的构建、鉴定

目的 构建端粒酶逆转录酶（hTERT）基因的RNA干扰（RNAi）表达载体。方法 化学合成能编码针对hTERT基因的短发夹RNA（shRNA）序列的寡核苷酸，退火处理后克隆到pSilencer1．0-U6 shRNA表达载体的U6RNA聚合酶Ⅲ（Pol Ⅲ）启动子的下游，构建重组RNAi质粒pSliencer-hTERT。结果 经酶切电泳及测序分析证实，目的序列成功插入到预计位点。结论 已成功构建pSliencer-hTERT载体，为进一步研究其对端粒酶活性的抑制作用打下基础。     

改良Sigma直肠膀胱术（附6例报告）

目的观察改良Sigma直肠膀胱术可控性尿流改道的临床疗效。方法对6例膀胱癌患者行改良Sigma直肠膀胱术。折叠乙状结肠约25cm后全层切开,缝合成低压袋,顶端固定在骶岬处,两输尿管并腔后从低压袋上方引入,作外翻乳头插入式吻合。结果术后患者尿控率100％,无吻合口狭窄及尿失禁,无上尿路积水,未发生明显酸碱平衡紊乱。结论改良Sigma手术时间短、操作简便、并发症低、术后尿控满意,是一种生理干扰小安全并简单易行的尿流改道方法,可明显提高患者生活质量。     

经腹腔镜探查术在急腹症诊疗中的应用

目的:探讨经腹腔镜探查术在急腹症中的临床应用价值.方法:回顾性分析83例急腹症患者行腹腔镜诊治的临床资料.结果:全部病例明确诊断.14例(16.87%)避免了不必要的剖腹探查术,61例(73.49%)经腹腔镜下完成治疗,6例(7.23%)中转开腹.结论:急诊腹腔镜探查术适用于一般辅助检查不能明确诊断而临床又有可疑证据的急腹症,不仅可以明确诊断而且可同时进行治疗.     

表达白细胞介素18的条件增殖腺病毒的构建

目的 构建表达白细胞介素(IL)-18的条件增殖腺病毒.方法 以质粒pJW-IL18为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增获得全长IL-18基因并改变其包含的酶切位点Bgl Ⅱ.将IL-18克隆至pCA13质粒,构建重组质粒pCA13-IL18.用Bgl Ⅱ从pCA13-IL18酶切出包含CMV启动子的IL-18表达框,并克隆进条件增殖腺病毒质粒pZD55,构建重组质粒pZD55-IL18.将pZD55-IL18与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染293细胞,9～12 d后出现病毒空斑.提取重组腺病毒的DNA,PCR鉴定正确者即为条件增殖腺病毒ZD55-IL18.大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度.结果 成功构建了表达IL-18的条件增殖腺病毒.结论 成功构建的ZD55-IL18为肿瘤靶向治疗奠定基础.     

Ki67基因RNA干扰腺病毒表达载体的构建及其抗结肠肿瘤作用研究

目的:构建针对肿瘤增殖基因Ki67的小干扰RNA(Ki67-siRNA)腺病毒表达载体,体外研究其对人结肠癌细胞株SW620细胞生长影响,为结肠癌的基因治疗提供参考。方法:设计可形成小发夹结构的Ki67-siRNA对应模板DNA序列,克隆至缺陷型腺病毒质粒pCA13,构建Ki67-siRNA表达质粒pCA13-Ki67。鉴定正确后,将pCA13-Ki67与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染至293细胞,包装成复制缺陷型腺病毒Ad-Ki67。大量扩增Ad-Ki67,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。Ad-Ki67感染人结肠癌细胞,结晶紫染色法检测细胞病理作用,MTT法检测细胞存活,Western印迹法检测Ki67表达。结果:酶切分析、测序鉴定表明pCA13-Ki67构建成功,PCR分析表明Ad-Ki67含有Ki67-siRNA序列。Ad-Ki67可显著抑制Ki67蛋白表达及结肠癌细胞生长。结论:含有Ki67-siRNA的重组腺病毒构建成功,其能抑制人结肠癌细胞Ki67基因表达和生长。