曲美他嗪对2型糖尿病患者血乳酸水平的影响

糖尿病合并高脂血症、血管病变时,由于存在缺氧,会出现血乳酸水平升高。曲美他嗪是否可改善2型糖尿病血乳酸水平升高目前还不清楚。本研究对2型糖尿病患者使用曲美他嗪前后血乳酸水平进行观察,旨在了解曲美他嗪对2型糖尿病血乳酸水平的影响。1对象与方法1.1对象糖尿病患者40例,     

压力超负荷大鼠心肌营养素-1表达对贝那普利干预的反应

目的 探讨心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)在腹主动脉缩窄所致大鼠压力超负荷心肌肥大模型表达的变化及其与心肌肥大的关系,以及贝那普利(benazepril,Ben)对CT-1表达及心肌肥大的影响.方法 用腹主动脉缩窄术建立大鼠压力超负荷性心肌肥厚模型,术后随机分为左室肥厚组(n=7)和贝那普利干预组(n=7,贝那普利1 mg·kg-1·d～,灌胃3周),另设一假手术组(n=7)为对照.干预3周后测定血流动力学指标、左心室质量指数,应用放射免疫分析法测定心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌中CT-1 mRNA表达.结果 与假手术组比较,左室肥厚组动物的血压与左心室质量指数显著升高(P＜0.05);心肌组织AngⅡ含量和CT-1 mRNA表达水平明显增加(P＜0.01).贝那普利干预可显著降低血压和左心室质量指数(P＜0.05),同时降低肥厚心肌组织AngⅡ浓度与CT-1 mRNA表达水平(P＜0.01).结论 CT-1的过度表达参与了压力超负荷性大鼠心肌肥大的发病过程;贝那普利对CT-1的表达及心肌肥大有抑制作用.     

重组人生长激素在成人生长激素缺乏症的应用

近20年来,重组生长激素已可以无限量的制备。近年来的研究已阐明成人生长激素缺乏的影响及生长激素替代治疗的益处。成人生长激素缺乏症对人影响最大的是生活质量、骨骼健康及包括血清脂质谱、身体构成变化的心血管危险因子的改变,而这也正是生长激素替代治疗获益最显著之处。大量的证据显示了重组人生长激素治疗的疗效,尤其在改善骨代谢和改善心血管危险因素等多方面发挥作用,并且是安全的。     

2型糖尿病微量蛋白尿和血清急性期蛋白浓度关系探讨

目的 探讨糖尿病和早期糖尿病肾病血清急性期蛋白浓度的变化及其意义。方法 纳入本研究2型糖尿病组68例,正常对照组33例,根据尿清蛋白排泄率（UAER）将糖尿病患者分为正常蛋白尿组（32例）、微量清蛋白尿组（36例）。测定血清C反应蛋白（CRP）、α1-酸性糖蛋白（α1-AAG）、纤维蛋白原（Fib）浓度。结果 （1）2型糖尿病患者正常蛋白尿组血清急性期蛋白（CRP、α1-AAG、Fib）浓度较对照组明显升高,差异有统计学意义（P＜0．01）;微量清蛋白尿组DM患者血清急性期蛋白较其他2组显著升高,差异有统计学意义（P＜0．01）;DM患者MA组与NA组比较CRP、α1-AAG、Fib显著升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）急性期蛋白浓度随UAER的增加而增加。（3）多元逐步回归分析表明UAER与3种急性期蛋白CRP、α1-AAG、Fib差异均有统计学意义（P＜0．01）。结论 2型糖尿病患者中存在急性期反应,而且急性期反应的强度与糖尿病肾病的程度存在一致性。     

葡萄糖激酶基因真核表达载体构建及在COS-7细胞中的表达

目的构建葡萄糖激酶（GK）基因真核表达载体并于COS-7细胞内表达，为体外构建具有葡萄糖刺激性胰岛素分泌能力的基因工程细胞奠定基础。方法质粒pCMV4-GKZ1以EcoRI、BamHI双酶切，获得GK cDNA，与同样酶切的pcDNA3．1载体连接，建成重组载体pcDNA3．1-GKZ1，经酶切与测序鉴定。Lipofectamine2000介导pcDNA3．1-GKZ1转COS-7细胞。分别以RT—PCR及Western-blot对COS-7／GKZ1细胞中GKZ1基因的转录及表达进行检测。结果构建的pcDNA3．1-GKZ1重组载体经酶切有1450bp的GKZ1 cDNA，序列经测序证实。COS-7／GKZ1细胞RT—PCR扩增出498bp的目的片段，Western—blot可见54kDa的特异性条带，而COS-7／pcDNA3．1细胞上述各项检测结果均为阴性。结论成功构建GK基因真核表达载体pcDNA3．1-GKZ1，并于COS-7细胞中成功转录与表达。     

Bmi-1调节干性相关分子转录的初步分析

目的 探讨Bmi-1对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子转录表达的影响.方法 分别构建鼠源和人源Bmi-1过表达载体pCI-GFP-mbmi1和pCI-GFP-hbmi1;瞬时转染鼠ES细胞CCE和人神经胶质瘤细胞U87;半定量RT-PCR检测胚胎干细胞中Oct-4、Nanog、c-Myc、Klf4和Sox2及肿瘤细胞中CD133、Nestin等干性分子的表达;克隆形成实验检测CCE细胞自我更新克隆形成能力.结果 瞬时转染Bmi-1过表达载体后,CCE细胞中Nanog的表达上调,Oct-4、Sox2和Klf4的表达无明显变化;U87细胞中Nestin和Oct-4表达上调,CD133、Nanog变化不明显;两者c-Myc的转录表达均显著降低;过表达Bmi-1促进CCE细胞自我更新克隆形成.结论 Bmi-1参与了对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子的转录调节.     

内源性胰岛素替代疗法中葡萄糖激酶基因逆转录病毒表达载体的构建

背景由于胰岛细胞分离技术难度较大,目前糖尿病细胞移植治疗尚缺乏理想的细胞来源。目的构建葡萄糖激酶(Glucokinase,GK)基因逆转录病毒表达载体及稳定的产毒细胞系,为构建具有葡萄糖反应性胰岛素分泌能力的胰岛代理细胞打下基础,可望为糖尿病提供一种更符合生理要求的内源性胰岛素替代疗法。设计非随机非对照的实验研究。地点、材料和干预本研究在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行。将GK质粒(pCMV4-GKZ1)经EcoR1/BamH1双酶切后亚克隆至逆转录病毒载体PLXSN,构建逆转录病毒表达载体PLX-GK,用酶切法和测序法对重组体进行鉴定。然后脂质体介导逆转录病毒表达载体PLX-GK转入包装细胞PA317,筛选病毒滴度较高的稳定产毒细胞系,PCR鉴定。主要观察指标①重组逆转录病毒载体构建与鉴定结果。②病毒滴度鉴定及PCR结果。结果成功构建GK基因逆转录病毒表达载体,经酶切及测序证明目的基因插入位点和读码框架正确、无突变;产毒细胞系的平均病毒滴度为6.8×108CFU/L,筛选出一株病毒滴度为1.8×109CFU/L稳定产毒细胞系PA317/GK,PCR证实GK基因整合入细胞基因组。结论成功构建了携GK基因的逆转录病毒表达载体及高滴度的产毒细胞系。     

人脂联素基因重组腺病毒对内皮细胞丙二醛和超氧化物歧化酶水平的影响

目的 检测人脂联素基因重组腺病毒(Ad-apM1)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)丙二醛和超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响,探讨Ad-apM1的抗氧化效应.方法 将Ad-apM1转染HUVEC,观察对HUVEC增殖的影响.双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)检测细胞培养液中人脂联素蛋白水平,硫代巴比妥酸法检测丙二醛水平,黄嘌呤氧化酶法测定SOD水平.结果 Ad-apM1对HUVEC增殖无明显影响,用感染复数(MOI)为50的Ad-apM1转染HUVEC 24、48、72 h后培养液中脂联素浓度显著升高.转染AdapM1的HUVEC细胞SOD显著升高,而丙二醛显著降低(均P<0.05).100μmol/L H2O2处理HUVEC 6、12和24 h后丙二醛水平显著升高,SOD水平显著降低(均P<0.05),而转染Ad-apM1可逆转其作用(P<0.05).结论 本研究制备的Ad-apM1能有效转染HUVEC并分泌人脂联素,具有抗氧化、减轻过氧化氢对内皮细胞的氧化损伤作用.     

重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗糖尿病足:随机对照疗效观察

目的:探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子对糖尿病足的治疗效果。方法:研究在第三军医大学附属新桥医院内分泌科进行。选取1999/2003在本科住院治疗的糖尿病足患者32例,根据治疗方法不同随机分为重组牛碱性成纤维细胞生长因子组(降血糖+抗感染+重组牛碱性成纤维细胞生长因子局部换药)16例,对照组(降血糖+抗感染)16例。对比两组患者治愈率、创面愈合时间及过敏、不良反应发生情况。结果:重组牛碱性成纤维细胞生长因子组治愈率(94%)明显高于对照组(62%)(χ2=4.96,P<0.05);重组牛碱性成纤维细胞生长因子组创面愈合时间犤(29.34±1.46)d犦明显比对照组犤(38.23±2.87)d犦缩短(t=11.06,P<0.05)。两组均无过敏及其他不良反应发生。结论:在糖尿病足的治疗中应用成纤维细胞生长因子,可以缩短创面愈合时间,提高治愈率。