荧光定量PCR法在重组逆转录病毒pLXSN-BDNF滴度测定中的应用

目的制备含大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）基因的逆转录病毒，建立荧光定量PCR测定滴度的方法。方法扩增BDNF基因，构建重组质粒pLXSN-BDNF，将其转染包装细胞，经G418筛选、病毒浓缩后用荧光定量PCR法和克隆形成法测定滴度。结果经PCR、酶切和测序鉴定，BDNF基因成功插入逆转录病毒载体中，筛选得到稳定的分泌重组病毒细胞系。重组病毒100倍浓缩后经荧光定量PCR法和克隆形成法测定的滴度分别为6．92×10^6拷贝/ml和3．2×10^5CFU/ml，两种方法测得的结果差异有统计学意义（P〈0．05）。结论成功扩增BDNF基因，制备了重组病毒pLX—SN-BDNF，建立了荧光定量PCR检测滴度的方法，为基因治疗青光眼性视神经损伤的实验研究提供重要参考指标。     

泪点栓子对干眼病患者泪膜功能的影响

目的 评价一种新型泪点栓子对干眼病患者泪膜功能的影响.方法 采用美国产新型泪点栓子治疗62例(123只眼)确诊为干眼病的患者,询问治疗前后患者的主观症状、检查治疗前后的泪膜破裂时间、荧光素染色情况和泪液分泌量的变化.结果 泪点栓子治疗后干眼病患者主观症状明显减轻;治疗后泪膜破裂时间延长,与治疗前比较差异具有显著意义;治疗前和治疗后角膜上皮点状荧光素染色差异具有显著意义(P<0.05);泪液分泌量有所增加.结论 该新型泪点栓子用于治疗干眼病能限制泪液流出,重建泪液平衡,改善泪膜的稳定性,是一种有效的、可逆的治疗干眼病的方法.     

视网膜损伤：外泌体转录组学的研究进展

衰老、缺氧、高糖刺激等多种因素导致的视网膜损伤过程中,外泌体发挥着重要作用。外泌体是一种纳米级的细胞外囊泡,包含微小RNA、环状RNA等多种转录产物,广泛参与视网膜色素上皮细胞损伤、新生血管形成、视网膜神经节细胞和光感受器细胞凋亡等过程。通过转录组学分析外泌体对视网膜损伤及修复的调控机制,识别糖尿病视网膜病变、青光眼等眼科疾病相关分子生物标志物,寻找新的治疗靶点,已成为视网膜研究的热点。因此,本文对外泌体转录组学在视网膜损伤中的研究进展进行综述。     

两种方法纯化胎鼠脑室管膜下区神经干细胞的结果比较

目的 利用有限稀释法和连续传代法纯化体外培养的神经干细胞(neural stemcells,NSCs),并对2种方法纯化后的细胞纯度及增生能力进行比较.方法 机械分离孕龄14.5 d的胎鼠脑室管膜下区细胞,利用有限稀释法和连续传代法纯化NSCs,通过免疫细胞化学法鉴定纯度(Nestin阳性卒)及分化细胞的类型.将2种方法纯化后的第3代NSCs以相同的密度接种后连续培养6周,每周进行细胞计数,绘制生长曲线.结果 有限稀释法和连续传代法纯化NSCs的Nestin阳性率均高于原代NSCs(31.00%±0.02%),有限稀释法的Nestin阳性率(91.00%±0.03%)高于连续传代法(58.80%±0.02%,P<0.05).有限稀释法纯化NSCs的生长曲线一直处于增生趋势,而连续传代法的细胞前3周是上升趋势,以后趋于平缓(P<0.05).结论 有限稀释法能有效纯化体外培养的NSCs,并保持细胞良好增生能力及多向分化潜能,为基因治疗视神经损伤疾病提供大量种子细胞.     

威海市法定传染病网络直报分析与质量评价

目的：为更好地做好威海市法定传染病疫情网络直报工作,不断完善法定传染病疫情网络直报管理体系,评价法定传染病疫情网络直报工作质量。方法：通过对威海市2008年法定传染病网络直报和各级医疗机构法定传染病报告抽样调查进行报告质量分析和评价。结果：所有用户共报告法定传染病报告卡18275张,剔除重卡1144张,截止12月31日24时报告有效卡片17131张,无重复卡片。其中及时报告卡片17122张,及时报告率为99．95％,填写准确卡片17118张,准确率99．92％,及时通过审核卡片17131张,及时审核率100％。综合评价指数为0．01%。调查了网络直报单位27处,共查出法定传染病772例,报告752例,报告率为98．06％;抽查传染病报告卡9829张,及时报告卡片8927张,及时报告率99．98％,抽查卡片及时审核率100％。结论：说明威海市法定传染病疫情网络直报信息准确、及时、规范。但是部队医院传染病报告率相对较低（91．53％）,主要原因：部队医院人员流动性大,临时观念强,对法定传染病报告认识相对不足。     

威海市碘缺乏病防治现状调查

威海市是我国沿海开放城市之一 ,属丘陵地带 ,总人口 2 4 7万 ,1995年被确定为碘缺乏病病区 ,1996年始实施了以全民食用碘盐为主的综合性干预措施。为全面了解和掌握威海市碘缺乏病防治现状 ,更好地指导防治工作 ,为建立长期有效可持续运行的消除碘缺乏病工作机制提供依据 ,2 0 0 1年对全市进行了调查。1　材料与方法1 1　材料　 2 0 0 1年参照卫生部《实现消除碘缺乏病阶段目标评估方案》 ,以威海市地理位置重心点划分 5个区域 ,每个区域随机选取 2个镇 ,每个镇随机抽取 1所小学、5个村。每所小学抽取 8～ 10岁学生 80名、5年级学生 30名 ,…     

威海市碘缺乏病防治现状与对策

威海市是我国沿海开放城市之一,地处山东半岛东部,北、东、南三面濒临黄海,西与烟台市接壤,属丘陵地带,辖荣成、文登、乳山三市和环翠区,有68个镇9个街道办事处,总人口247万。1995年经碘缺乏病本底调查被确定为碘缺乏病区,1996年实施了以全民食盐加碘为主的综合性防治措施,2001年对我市碘缺乏病防治效果及对策进行了评估研究。 一、我市碘缺乏病防治现状 1.五年来碘缺乏病防治效果 评估结果表明:     

威海市碘缺乏病防治效果评估

威海市辖三市一区,总人口247万。1995年对全市进行了碘缺乏病本底调查,结果显示8～10岁儿童甲状腺肿大率为9.42％,尿碘中位数为61.9μg/L,水碘均数为4.93μg/L。根据GB16005—1995《碘缺乏病病区划分标准》被确定为碘缺乏病区。1996年起实施了以食盐加碘为主的综合防治措施。为了进一步总结经验,查找问题,建立长期有效可持续运行的消除碘缺乏危害工作机制,我们于2001年对五年来措施落实情况及防治效果进行了评估。     

神经干细胞移植和基因转染对视网膜神经细胞作用的研究现状

视神经在缺血、创伤、高眼压、炎症等各种损伤因子的作用下通常产生不可逆的损害，难以恢复。以往人们认为中枢神经系统损伤后，损伤的神经元逐渐由胶质细胞所代替，造成组织功能的永久缺失。其不能再生的原因除了中枢神经系统本身的性质外，更重要的是中枢神经系统损伤后其外部的微环境影响神经细胞再生。视神经作为中枢神经系统的一部分，损伤后也难以避免同样的命运。     

重组逆转录病毒pLXSN-脑源性神经营养因子在小鼠胚胎细胞中的表达

神经干细胞移植是近年来治疗视神经损伤疾病新的研究方向之一,然而如何能够让干细胞在眼内移植后定向分化为视网膜神经节细胞,一直是个难题.