骨桥蛋白与血管再狭窄

骨桥蛋白（OPN）是细胞外基质中一种重要的功能性蛋白，研究表明OPN在血管损伤后新生内膜中的表达明显上调，而且它能促进血管平滑肌细胞、外膜细胞的迁移，被认为是血管损伤修复过程中重要的始动因素，参与血管再狭窄形成，在动脉粥样硬化、血管再狭窄及动脉钙化发生过程中起着重要作用，应用骨桥蛋白及其抑制剂可能有助于血管再狭窄的防治。     

老年人同期施行心脏瓣膜置换术和冠状动脉旁路移植术围手术期处理

心脏瓣膜病变合并冠状动脉(冠脉)病变的患者,在术前诊断、手术处理及监护治疗等方面有别于单纯瓣膜病或单纯冠心病。自1998年1月至2002年7月我们为29例老年患者同期施行冠状动脉旁路移植术(CABG)和心脏瓣膜置换术,效果满意。现报道如下。 一、资料和方法 1.临床资料:29例中男18例,女11例;年龄61～75岁,平均(66.7±5.4)岁;病程7～24年,平均(15.3±6.5)年;按NYHA心功能分级:Ⅱ级10例,Ⅲ级13例、Ⅳ级6     

构建表达IL-10的重组乳酸杆菌

 目的 构建表达IL-10的重组乳酸杆菌。方法 人工合成信号肽系列后与IL-10基因连接后克隆到干酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei,L. casei）整合型表达载体pIlac的lac启动子下游,得到重组质粒pIlac-sp-IL10,电穿孔转化L. casei CECT 5276。挑选转化后的耐药菌落在含红霉素的培养基中培养,抽提染色体DNA,PCR及测序鉴定证实IL-10基因是否整合到L. casei的基因组中,Western blot检测重组蛋白表达。结果 IL-10基因整合到干酪乳酸杆菌的基因组中;重组L. casei产生的目的蛋白部分分泌进入培养上清。结论 IL-10在L. casei CECT 5276中得到了分泌表达。     

靶向STAT3的慢病毒表达载体的构建及其对血管平滑肌细胞增殖凋亡的影响

目的 构建大鼠STAT3基因的shRNA慢病毒表达载体,并观察其对大鼠血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响.方法 针对STAT3基因的不同部位设计4对shRNA的寡核苷酸片段,克隆到慢病毒载体PLKO.1中,构建靶向STAT3基因的慢病毒载体PLK0.1-STAT3-shRNA,检测并筛选最佳抑制效率的shRNA干扰载体.并将其转染大鼠血管平滑肌细胞,用噻唑蓝法和流式细胞仪检测沉默STAT3基因后对血管平滑肌细胞增殖和凋亡能力的影响.结果　靶向STAT3慢病毒表达载体构建成功.转染PLKO.1-STAT3-shRNA后,STAT3蛋白表达明显下降,其中以PLKO.1-STAT3-S1最为明显,达到90%以上;转染PLKO.1-STAT3-S1的细胞增殖能力(A值=0.25±0.05)明显低于未转染组(A值=0.62±0.12)和阴性对照组细胞(A值=0.59±0.11)(P＜0.05);而早期细胞凋亡率(26.9±2.8)%和晚期细胞凋亡率(9.5±1.6)%均明显高于未转染组和阴性对照组(P＜0.01).结论　成功构建并筛选最佳抑制效率的靶向STAT3慢病毒表达载体PLKO.1-STAT3-S1,该载体能有效抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖,并促进细胞凋亡.

Abstract：

Objective To construct a recombinant short hairpin RNA (shRNA) lentiviral vector carrying STAT3 gene in rats, and to investigate its effects on proliferation and apoptosis of vascular smooth muscle cells by silencing STAT3. Methods Four oligonucleotides targeting STAT3 gene were synthesized and cloned into lentivirus vector PLKO. 1. The shRNA lentiviral vector with best transfection efficiency was detected and identified, which was transfected into vascular smooth muscle cells in rats, and its effects on proliferation and apoptosis of vascular smooth muscle cells were measured by MTT and flow cytometry after silencing STAT3. Results The recombinant lentivirus vector PLKO. 1-STAT3-shRNA was constructed successfully. PLKO. 1-STAT3-shRNA knocked down the expression of STAT3 protein dramatically, especially PLKO. 1-STAT3-S1, whose transfection efficiency was more than 90%. The proliferation capacity of vascular smooth muscle cells transfected with PLKO. 1-STAT3-S1 (A value =0. 25 ±0. 05 ) was significantly lower than no-transfected group (A value =0. 62 ±0. 12) and negative control group (A value =0. 59 ±0. 11 )(P ＜ 0. 05). Meantime the early apoptosis rate (26. 9 ± 2. 8 ) % and late apoptosis rate (9. 5 ± 1.6 ) % in PLKO. 1-STAT3-shRNA-transfected group were significantly higher than in no-transfected group and negative control group (P ＜ 0. 01 ). Conclusion The recombinant lentivirus shRNA vector targeting STAT3,PLKO. 1-STAT3-S1, with best transfection efficiency, is constructed successfully. PLKO. 1-STAT3-S1 can inhibit the proliferation of vascular smooth muscle cells, and promote the cell apoptosis. This study lays the foundation for further studying on targeting treatment of vascular restenosis.     

血管外膜和胶原分布对内膜增生及血管重塑的影响

目的 动态观察移植静脉再狭窄动物模型中血管外膜和胶原的变化,以评价血管外膜和胶原对内膜增生和血管重塑的影响. 方法 长白猪18只,建立猪移植静脉再狭窄模型,术后随机分为3组,术后7d组,术后30d组和术后45d组,每组6只;未移植前的大隐静脉作为对照组.采用HE和Masson染色,观察各组血管成分结构、外膜细胞密度、增生指数和胶原的动态变化. 结果 术后7d组新生内膜形成并增厚,外膜厚度和细胞密度增大,外膜和新生内膜中胶原增多,血管腔面积减少,但与对照组比较差异无统计学意义(F=2.03,P=0.091),而剩余狭窄率逐渐增大(F=5.16,P=0.033),重塑指数和外弹力板围绕面积(EELA)稍有增大.术后30d组新生内膜明显增厚,外膜厚度和细胞密度达最大,新生内膜中含大量胶原,呈进行性增多趋势,外膜中胶原含量达最大,管腔面积和内膜弹力板围绕面积(IELA)明显减小,剩余狭窄率较对照组明显增大(F=6.63,P=0.018),重塑指数和EELA较术后7d组明显减小.术后45d组新生内膜增厚达最大,外膜细胞密度较术后30d组减小(F=6.91,P=0.015),新生内膜中胶原含量达最大,外膜中胶原含量较术后30d组减少,并见局部纤维化;管腔面积、重塑指数、IELA和EELA达最小,剩余狭窄率达最大. 结论 移植血管再狭窄是内膜增生和血管重塑共同作用的结果 .血管外膜的增厚、纤维化及胶原的重排对内膜增生和血管重塑起着重要作用,参与并促进了移植血管再狭窄的发生过程.     

心脏恶液质瓣膜病患者围手术期的营养支持

心脏恶液质综合征 ( syndrome ofcardial cachexia,SOCC)是瓣膜病患者发展到严重程度的全身表现 ,以心功能不全为特征 ,同时伴内分泌、代谢、营养、凝血机制等系列障碍。风湿性心脏病 (风心病 )出现 SOCC后 ,1年和 5年的病死率高达 3 0 %和 80 % 〔1〕;因此 ,必须重视SOCC患者在支持心功能的基础上加强手术前后的营养 ,纠正低蛋白血症和贫血 ,改善全身状况。 1 997年 2月— 2 0 0 0年 8月我们对 2 2例心脏恶液质瓣膜病患者围手术期 ,在其它生命支持治疗的同时施行阶段性营养支持治疗 ,取得良好效果 ,报告如下。1　病例与方法1 .1　病例…     

常规与微创电视窥镜下大隐静脉制备的对比研究

目的　对比研究常规与内窥镜辅助下大隐静脉制备 ,探讨内窥镜辅助下大隐静脉制备在冠状动脉旁路移植术中的应用价值。方法　选取单纯冠状动脉旁路移植术患者 36例 ,采用微创内窥镜辅助下进行静脉制备 (微创组 ) ,并与同期采用传统方法行大隐静脉制备的 5 0例 (传统组 )进行对照研究。结果　传统组切口感染、切口裂开和切口渗出的发生率 (2 8% )明显高于微创组 (2 .8% ) (P <0 .0 0 1) ,传统组慢性下肢浮肿和腿部感觉异常的发生率 (2 6 % ,38% )均明显高于微创组 (5 .7% ,16 .7% )(P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 1) ,微创组住院时间也明显短于传统组 (P <0 .0 0 1)。结论　内窥镜辅助下大隐静脉制备 ,能明显减少手术后下肢切口并发症     

联合冠状动脉搭桥及其相关心脏手术134例分析

目的:回顾分析联合冠状动脉搭桥及其相关心脏手术的临床效果。方法:134例患者中,75.4％有Ⅲ-Ⅳ级心绞痛(CCSS),冠状动脉造影示梗阻性病变在左主干(LM)34例次、左前降支(LAD)130例次、对角支91例次、回旋支84例次、右冠状动脉80例次。伴有冠状动脉弥漫性病变41例。左室射血分数(LVEF)18%-69%,其中45％-30％ 50例,<30％ 13例,伴左心室壁瘤56例,同时伴瓣膜功能不全42例。全部患者均在体外循环下行冠状动脉搭桥手术,对36例伴有冠状动脉弥漫性病变者同期激光心肌打孔(TMR),同期左心室壁瘤切除三明治式缝合11例,巨大室壁瘤心内补片左室成形45例;同期心脏瓣膜手术42例。结果:人均旁路2.46支,6例患者需主动脉内球囊反搏(IABP)辅助11-54 h;二次开胸止血6例;室上速/房颤28例,室性心律失常10例,2例电转复,余均药物控制;全组手术死亡3例,死亡原因分别为严重低心排综合征(2例)和多脏器功能衰竭。其余病人手术后心绞痛等症状均缓解,心脏功能明显改善。随访4-60个月(平均12.7月),随访率89％,65例已恢复全日制工作。结论:与单纯冠状动脉搭桥相比,联合冠状动脉搭桥及其相关心脏手术时间长,操作复杂,但只要设计良好的手术方案,仍能取得满意的效果。     

胸主动脉瘤的外科治疗--附27例分析

目的:回顾分析胸主动脉瘤的手术治疗经验和效果。方法:27例患者中,男22例,女5例,平均年龄51.6岁。马凡氏综合征行Bentall术18例;严重主动脉瓣关闭不全伴升主动脉明显扩张3例中2例行主动脉瓣和升主动脉置换,1例行主动脉瓣置换和升主动脉成型;急性主动脉夹层手术治疗6例,在深低温停循环下手术4例,2例仅行升主动脉置换,另2例分别行半弓和全弓置换。结果:全组27例患者均顺利度过手术。体外循环时间平均(94.8±27.1)min,6例主动脉夹层瘤手术患者中4例停循环时间平均(28.0±8.5)min。围手术期内,1例Bentall手术后因出血2次开胸止血;术后需血管活性药物支持7例;术后3例患者因低氧血症呼吸机辅助3￣7天后,顺利脱机;手术后发生心房纤颤2例;1例深低温停循环手术后72h清醒;胸部切口感染1例,围手术期死亡1例(手术后1周死于心律失常),余均康复出院。1例Bentall手术后3个月猝死;1例Bentall手术后2个月脑梗死,住院治疗1个月后康复出院,1例主动脉瓣 升主动脉置换术后16个月心内膜炎伴脑出血死亡;其余患者良好存活,生活质量同正常同龄人。结论:尽管主动脉疾病的手术治疗技术要求较高,只要方法得当,仍能取得满意的近、中效果。     

同种原位心脏移植的免疫抑制治疗与监测

我院于2001年8月～2003年6月在体外循环下进行了6例同种异体原位心脏移植术,采用环孢素A(CsA),骁悉(MMF)及皮质类固醇(Pred)新三联疗法进行免疫抑制治疗,效果满意.现报道如下.