脓毒症患者血清血小板活化因子水平及其临床意义

目的 通过检测脓毒症患者血清血小板活化因子(PAF)水平,探讨其水平变化与脓毒症患者预后的关系.方法 选择脓毒症患者60例(脓毒症组)和健康体检者60例(对照组),分别检测其血清PAF水平;脓毒症患者入院24h内进行急性生理学和慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分,根据其分值分为三组,APACHEⅡ评分＜15分为低分组,15～ 20分为中分组,＞20分为高分组;根据预后分为生存组和死亡组.比较各组血清PAF水平变化.结果 脓毒症组血清PAF水平[(25.32±4.95) ng/L]显著高于对照组[(7.75±1.66) ng/L],差异有统计学意义(P＜0.05).低分组、中分组、高分组血清PAF水平逐渐升高,分别为(15.02±2.91)、(23.32±4.85)、(34.02±6.42)ng/L,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).生存组和死亡组血清PAF水平分别为(20.02±3.71)、(35.43±5.74) ng/L,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PAF可能参与了脓毒症的发生、发展过程,通过检测血清PAF水平可初步评估病情的严重程度.     

人脐血单个核细胞静脉移植联合复方丹参滴丸对急性心肌梗死局灶炎症反应的影响

目的观察复方丹参滴丸（CompoundDanshenDrippingPill,CDDP）对急性心肌梗死（acutemyocardialinfarction,AMI）心肌组织炎症反应的影响,观察人脐血单个核细胞（humanumbilicalcordbloodmononuclearcells,HUCBMCs）静脉移植联合CDDP对家兔AMI心肌组织炎症反应、炎性因子肿瘤坏死因子．仅（TNF．仪）表达及心功能的影响,并探讨其联合治疗对AMl可能的保护机制。方法对40只健康家兔结扎冠状动脉左前降支,制备AMI模型。40只建模成功家兔随机分为4组,即对照组、CDDP组、单纯移植组及联合治疗组,每组10只。对照组：术后24h生理盐水0．5mL耳缘静脉注射,生理盐水5mL,天灌胃;CDDP组：术后24h经耳缘静脉注入生理盐水0．5mL,CDDP270mg／d溶入生理盐水5mL灌胃;单纯移植组：术后24h经耳缘静脉注入含3X10’个绿色荧光蛋白（greenfluorescentpro—tein．GFP）标记HUCBMCs生理盐水0．5mL,生理盐水5mL／天灌胃;联合治疗组：术后24h经耳缘静脉注入含3X10’个GFP标记HUCBMCs的生理盐水0．5mL,C．DDP270mg／d溶入生理盐水5mL灌胃。每组随机选取5只家兔分别于移植术后1、4周超声心动图检测家兔心功能指标,包括左室射血分数（Ieftventricularejectionfraction,LVEF）及左室短轴缩短率（1eftventricularfractionalShorting,LVFS）;HE染色光镜下观察心肌病理变化和白细胞计数;免疫组化检测心肌组织TNF．Ot蛋白表达量;荧光显微镜观测GFP阳性细胞。结果（1）与对照组比较,CDDP组、单纯移植组、联合治疗组术后1、4周心功能指标LVFS及LVEF改善（P〈0．05）,其中联合治疗组心功能指标改善优于单纯移植组、CDDP组（P〈0．05）,而后两组组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）;（2）与对照组比较,CDDP组、单纯移植组、联合治疗组术后1、4周心肌组织白细胞计数及TNF-α蛋白表达均显著减低（P〈0．05）,且联合治疗组心肌组织白细胞计数及TNF—α．蛋白表达均显著低于单纯移植组、CDDP组（P〈0．05）,而后两组组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）;（3）联合治疗组、单纯移植组术后1、4周均可见GFP阳性细胞散在分布于梗死周边区域,且联合治疗组细胞计数多于单纯移植组（P〈0．05）。结论本研究提示HUCBMCs静脉移植联合CDDP治疗AMI,可提高移植细胞在心肌组织内的存活率,并进一步改善心功能。其机制可能与联合治疗减轻心肌局部炎症反应及抑制促炎因子TNF-α蛋白的表达作用增强有关。     

人脐血单个核细胞静脉移植联合复方丹参滴丸对急性心肌梗死心肌组织内环境及心肌细胞凋亡的影响

目的: 观察复方丹参滴丸(compound Danshen dripping pills,CDDP)和人脐血单个核细胞(human umbilicalcord blood mononuclear cells,HUCBMCs)静脉移植联合复方丹参滴丸对家兔急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的心肌组织炎症反应、心肌细胞凋亡、氧化应激指标及心功能的影响,并探讨其联合治疗对急性心肌梗死可能的保护机制。方法: 对健康家兔结扎冠状动脉左前降支,制备AMI模型。建模成功者40只随机分为4组,每组10只。对照组:术后24h生理盐水0.5mL耳缘静脉注射,生理盐水5mL/d灌胃;CDDP组:术后24h经耳缘静脉注入生理盐水0.5mL,CDDP270mg/d溶入生理盐水5mL灌胃;单纯移植组:术后24h经耳缘静脉注入含3×10⁷绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记人脐血单个核细胞生理盐水0.5mL,生理盐水5mL/d灌胃;联合治疗组:术后24h经耳缘静脉注入含3×10⁷GFP标记人脐血单个核细胞的生理盐水0.5mL,CDDP 270mg/d溶入生理盐水5mL灌胃。每组随机5只家兔分别于移植术后1周、4周超声心动图检测家兔心功能指标左室射血分数(left ventricularejection fraction,LVEF)及左室短轴缩短率(left ventricular fractional shorting,LVFS);苏木精-伊红(HE)染色光镜观察心肌病理变化并在光镜下进行白细胞计数。氮蓝四唑(nitrotetrazolium blue chloride,NBT)法测定心肌组织浆液超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;硫代巴比妥酸比色法测心肌组织浆液丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。根据荧光显微镜检测到的GFP阳性细胞进行移植细胞计数。结果: 1)与对照组比较,CDDP组、单纯移植组、联合治疗组术后1周、4周心功能指标LVFS及LVEF改善(均P<0.05),其中联合治疗组心功能改善优于单纯移植组、CDDP组(均P<0.05),而后两组组间比较差异无统计学意义;2)与对照组比较,CDDP组、单纯移植组、联合治疗组术后1周、4周心肌组织白细胞计数及心肌细胞凋亡指数均显著减低(均P<0.05),且联合治疗组均显著低于单纯移植组、CDDP组(均P<0.05),而后两组比较差异无统计学意义;3)与对照组比较,CDDP组、单纯移植组、联合治疗组术后4周心肌组织MDA水平均显著降低(均P<0.05),SOD活性显著增高(均P<0.05),且联合治疗组均优于单纯移植组、CDDP组(均P<0.05),而后两组比较差异无统计学意义;4)联合治疗组、单纯移植组术后4周均可见GFP阳性细胞散在分布于梗死周边区域,且联合治疗组细胞计数多于单纯移植组(P<0.05)。结论: HUCBMCs静脉移植联合CDDP治疗AMI,可提高移植细胞在心肌组织内存活率,拮抗心肌细胞凋亡,并进一步改善心功能。其机制可能与联合治疗减低心肌组织局部炎症反应及拮抗氧化应激作用增强有关。     

人脐血单个核细胞静脉移植联合培哚普利对急性心肌梗死炎症反应的影响

背景：近期报道骨髓间充质干细胞心肌内直接移植联合培哚普利治疗急性心肌梗死大鼠,可改善心肌组织内环境,并增强急性心肌梗死疗效。 目的：观察人脐血单个核细胞静脉移植联合血管紧张素转化酶抑制剂培哚普利对家兔急性心肌梗死心肌组织炎症反应与促炎因子白细胞介素6表达及心功能影响,并探讨联合治疗对急性心肌梗死可能的保护机制。 方法：人脐血单个核细胞取自健康足月分娩产妇脐血。60只健康家兔制备急性心肌梗死模型,建模成功后随机数字表法均分对照组、培哚普利组、单纯移植组和联合治疗组。每组随机选5只家兔分别于移植后1,2,4周超声心动图检测家兔心功能指标左室射血分数及左室短轴缩短率;苏木精-伊红染色光镜观察心肌病理变化和白细胞计数;免疫组化检测心肌组织白细胞介素6蛋白表达量;荧光显微镜观测绿色荧光蛋白阳性细胞。 结果与结论：①与对照组比较,培哚普利组、单纯移植组、联合治疗组治疗后1,2,4周心功能指标左室短轴缩短率及左室射血分数改善(P < 0.05),单纯移植组高于培哚普利组(P < 0.05),联合治疗组改善最显著(P < 0.05)。②与对照组比较,培哚普利组、单纯移植组、联合治疗组治疗后1,2,4周心肌组织白细胞计数及白细胞介素6的表达均显著减低(P < 0.05),且单纯移植组低于培哚普利组(P < 0.05),联合治疗组最低(P < 0.05)。③联合治疗组、单纯移植组治疗后1,2,4周均可见绿色荧光蛋白阳性细胞散在分布于梗死周边区域,且联合治疗组细胞计数多于单纯移植组(P < 0.05)。说明培哚普利联合人脐血单个核细胞静脉移植治疗急性心肌梗死实验动物,能提高移植细胞在心肌组织内存活率,并进一步改善心功能。其机制可能与联合治疗抑制心肌局部炎症反应及促炎因子白细胞介素6水平表达作用增强有关。     

人脐血单个核细胞静脉移植联合培哚普利对急性心肌梗死炎症反应的影响

背景：近期报道骨髓间充质干细胞心肌内直接移植联合培哚普利治疗急性心肌梗死大鼠,可改善心肌组织内环境,并增强急性心肌梗死疗效.目的：观察人脐血单个核细胞静脉移植联合血管紧张素转化酶抑制剂培哚普利对家兔急性心肌梗死心肌组织炎症反应与促炎因子白细胞介素6表达及心功能影响,并探讨联合治疗对急性心肌梗死可能的保护机制.方法：人脐血单个核细胞取自健康足月分娩产妇脐血.60只健康家兔制备急性心肌梗死模型,建模成功后随机数字表法均分对照组、培哚普利组、单纯移植组和联合治疗组.每组随机选5只家兔分别于移植后1,2,4周超声心动图检测家兔心功能指标左室射血分数及左室短轴缩短率;苏木精-伊红染色光镜观察心肌病理变化和白细胞计数;免疫组化检测心肌组织白细胞介素6蛋白表达量;荧光显微镜观测绿色荧光蛋白阳性细胞.结果与结论：①与对照组比较,培哚普利组、单纯移植组、联合治疗组治疗后1,2,4周心功能指标左室短轴缩短率及左室射血分数改善（P〈0.05）,单纯移植组高于培哚普利组（P〈0.05）,联合治疗组改善最显著（P〈0.05）.②与对照组比较,培哚普利组、单纯移植组、联合治疗组治疗后1,2,4周心肌组织白细胞计数及白细胞介素6的表达均显著减低（P〈0.05）,且单纯移植组低于培哚普利组（P〈0.05）,联合治疗组最低（P〈0.05）.③联合治疗组、单纯移植组治疗后1,2,4周均可见绿色荧光蛋白阳性细胞散在分布于梗死周边区域,且联合治疗组细胞计数多于单纯移植组（P〈0.05）.说明培哚普利联合人脐血单个核细胞静脉移植治疗急性心肌梗死实验动物,能提高移植细胞在心肌组织内存活率,并进一步改善心功能.其机制可能与联合治疗抑制心肌局部炎症反应及促炎因子白细胞介素6水平表达作用增强有关.     

高磷、高钙诱导人血管平滑肌细胞钙化的研究

目的：探讨高磷及高钙诱导血管平滑肌细胞发生钙化的分子机制。方法：以人血管平滑肌细胞（ VSMCs）为模型,采用不同钙磷浓度的培养基与细胞共培养12 d,将细胞分为正常钙、磷组（对照组）、高磷组、高钙组和高磷﹢高钙组,分别采用免疫印迹（ western-blot）技术、逆转录-聚合酶链反应（ RT-PCR）技术检测人血管平滑肌细胞核心结合因子α1（Cbfα1）、骨钙素、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白质和mRNA的表达;高磷﹢高钙条件孵育下的细胞加入ZVAD-FMK干预后,再次采用western-blot技术检测Cbfα1、骨钙素蛋白质表达的情况。结果：试验组Cbfα1、骨钙素表达增强（ P=0.013;P=0.007）,而肌成纤维细胞的特异性标志物α-SMA表达下降（P=0.009）,对照组上述3个指标无明显变化（P=0.055、P=0.074、P=0.63）;加入ZVAD-FMK与高磷﹢高钙组细胞共培养后,Cbfα1、骨钙素蛋白质的表达受到明显抑制。结论：高磷或（和）高钙通过使血管平滑肌细胞转化为成骨样细胞而导致钙化的发生;ZVAD-FMK可以在一定程度上抑制这一病理生理进程,提示凋亡和成骨分化均参与了钙化过程。