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目的建立用荧光杂交探针实时聚合酶链式反应(Real-timePCR)检测人甘露聚糖结合凝集素(MBL)启动子区基因变异新型的基因分型法——Tm基因分型法。方法收集30例健康献血员外周抗凝全血,提取基因组DNA。通过LightCycler实时PCR仪描绘扩增的目标DNA片段的熔解曲线,根据熔解温度(Tm)峰值判定待测标本的基因变异类型。最后,用基因测序法检测PCR产物来验证Tm基因分型法的准确性。结果建立了新型的Tm基因分型法,且测定PCR产物的时间仅180min,检测结果与测序法完全吻合。结论Tm基因分型法检测人MBL启动子区基因变异快速、准确,重复性好,具有广泛的临床应用前景。 相似文献
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宫颈脱落细胞HPV-DNA分型检测的临床意义 总被引:1,自引:1,他引:0
目的探讨HPV-DNA分型检测在宫颈癌防治中的意义。方法采用基于PCR的导流杂交技术,对1 197例妇科门诊患者进行宫颈脱落细胞HPV-DNA分型检测,比较不同年龄组HPV-DNA阳性率及不同型别HPV-DNA的分布。结果 HPV-DNA总体阳性率为24.3%,18-25岁年龄组阳性率为45.9%,显著高于其他年龄组,HPV-DNA阳性率随年龄增加有下降的趋势。除35型和43型外,其余19个型别均有检出,其中高危型占83.86%,低危型占16.14%;高危型中前4位为16型(15.08%)、58型(14.02%)、52型(12.70%)、18型(6.61%)。结论 HPV-DNA分型检测能同时检测21个基因型,可用于HPV多重感染的诊断及流行病调查。 相似文献
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507例体检者人群乙型肝炎病毒感染状况调查 总被引:2,自引:0,他引:2
调查本院体检者乙型肝炎病毒(HBV)感染状况.采用微粒子酶联免疫吸附法和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分别测定507例体检者血清中乙肝五项和HBV DNA载量.体检者按30~40岁、41~50岁、51~60岁分成三个年龄组,对结果进行年龄组间比较.507例受检人员的表面抗原(HBsAg)阳性率为17.75%,其中男性为19.84%,女性为 11.63%,男性阳性率显著高于女性(P<0.01).表面抗原的阳性率随年龄的增加而降低,三个年龄段表面抗原的阳性率分别为20.51%、17.43%和16.11%.检测结果表明HBeAg和HBV DNA载量有较好的一致性,HBsAg为阴性的417例中检出HBV DNA载量大于500的1例.本次调查该年龄段人群乙型肝炎病毒感染水平较高,尤其是30多岁的男性更应该增强自我防护意识,定期进行健康检查,以便早发现早治疗. 相似文献
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白细胞介素6基因启动子区两个突变位点多态性检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立一种快速检测IL-6基因启动子区-597G/A、-572G/C多态性的双重实时荧光PCR方法。方法采用1对引物,2对荧光标记探针,结合荧光共振能量转移原理和熔点曲线分析技术,检测IL-6基因启动子区-572G/C,-597G/A2个位点多态性。结果用建立的双重实时荧光PCR方法对123名健康查体者进行检测,发现中国汉族人IL-6基因启动子区-572位点有3种基因型,分别为GG,GC,CC型;-597位点仅发现4名为GA型,其余均为GG型,尚未发现从型。结论双重实时荧光PCR法简便快速,与其他方法比较具有准确、经济的特点,适合临床基因快速分型。 相似文献
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目的:探讨枳葛片对急性酒精(乙醇)中毒后小鼠的神经精神症状、血液中乙醇浓度和各项生物化学参数的影响。方法:实验于2003-06/09在解放军总医院生化科完成。将60只昆明小鼠随机分为6组,禁食12h后分别给蒸馏水6h和24h组对照组)、高剂(量枳葛片(6h组和24h组,1.5g/kg)、低剂量枳葛片(24h组,1g/kg)和海王金樽(24h对照药物,2.5g/kg),30min后全部实验动物按0.018mL/g体质量一次性灌胃给560mL/L乙醇,记录翻正反射消失和恢复时间,实验结束时取血测定血液中乙醇浓度和生化指标的变化。结果:枳葛片可明显延长小鼠翻正反射消失的时间(低剂量组t=-2.648,P<0.05,高剂量组t=-4.215,P<0.01),在24h组间比较结果提示枳葛片可缩短小鼠翻正反射的恢复时间且有量效关系(低剂量组t=2.224,P<0.05;高剂量组t=3.500,P<0.01)。血液检测结果提示枳葛片可逆转小鼠由于急性乙醇中毒所致的谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、胆固醇和三酰甘油升高。与对照组比较,低剂量组中谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、胆固醇含量差异有显著性意义(t=2.159~6.390,P<0.01或0.05),高剂量组中谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、胆固醇、三酰甘油含量差异有显著性意义(t=2.750~5.597,P<0.01或0.05)。高剂量枳葛片可降低血液中的乙醇浓度(t=2.988,P<0.05)。结论:枳葛片具有降低 相似文献
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本研究旨在通过对中国北方地区汉族人IL-6基因启动子区-572G/C,-597G/A多态性与体重指数(BMI)和炎症因子等生化指标的相关性的调查,探索基因多态性与冠心病(CHD)发生发展的关系。采用荧光杂交探针、以荧光共振能量转移原理和熔点曲线分析技术,测定了194例冠心病患者和123例健康对照者的IL-6基因型,同时测定BMI、超敏C反应蛋白(hsCRP)、血脂、载脂蛋白等指标,并通过建立逻辑回归(Logistic regression)模型分析CHD发生的危险因素。结果表明,在所有观察对象中发现中国北方汉族人IL-6基因启动子区-597位点有7例为GA型.其余均为GG型,尚未发现AA型,未发现其多态性与BMI和炎症因子等生化指标的相关性。冠心病(cor—onary heart disease,CHD)组与对照组-572G/C基因型频率和等位基因频率分布差异无统计学意义,但是CHD组和对照组携带G等位基因和非G等位基因频率相比差异有统计学意义(P=0,0425)。正常对照组中携带G等位基因者收缩压中位数水平明显高于非G等位基因者(P=0、02)。在所有研究对象中,与非G等位基因组相比,携带G等位基因组的体重指数、超敏C反应蛋白、收缩压中位数水平显著升高(P值分别为0、026、0.022、0、005)。经Logistic逐步回归分析显示,年龄、血清甘油三脂、性别、高血压、载脂蛋白C2、血清总胆固醇、脂蛋白a是冠心病发生的危险因子,而载脂蛋白A1是保护因子(P〈0.05),未见-572G/C的G等位基因是一独立的危险因素。结论:IL-6基因启动子区-597G/A多态性和CHD的易感性无关,而-572G/C多态性与CHD的易感性有关,其机制可能与-572G/C多态性可导致BMI、hsCRP和血压的变化有关。 相似文献
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限量饮酒及服用解酒液对血液化学成分的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :探讨限量饮酒所致血液化学成分的改变及中草药的防护功效。方法 :选用 14名健康志愿者 ,观察口服 5 6°白酒 (1ml/kg体重 )前后不同时间血液中酒精浓度及TP、Alb、Ua、Glu、CO2 、Urea、Cr、TC、TG、ApoAI、ApoB、Ca和P的变化 ;并与口服中草药解酒液进行预防的自身对照组进行比较。结果 :饮酒前后血清TP、Alb、Ua、Cr、TC、Ca及Mg基本保持恒定 ,P、TG、ApoAI和ApoB均有不同程度的升高 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,而Glu、Urea和CO2 则呈降低趋势 (P <0 0 5或P <0 0 1)。服用中草药解酒液预防后 ,对TP、Alb、ApoB、Ua及Mg基本无影响 ,但可使血清Ca、P、Urea、Cr、TC、TG、ApoAI明显降低 ,同时使Glu和CO2 恢复正常。结论 :即使少量饮酒也会造成部分血液化学成分明显改变 ,解酒液可一定程度抑制酒精代谢、促进排泄并能纠正酒精所致血液化学成分的改变。 相似文献
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甲鱼油中ω-3多不饱和脂肪酸的提取与分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的为从甲鱼脂肪中提取甲鱼油,并分析其浓度及纯度。方法采用超临界CO2萃取技术,利用低温浓缩工艺富集甲鱼油中DHA和EPA。以超临界提取甲鱼脂肪为原料,用低温浓缩法富集DHA和EPA;从甲鱼脂肪中提取甲鱼油,然后用GC法测定DHA和EPA,并对不同温度、溶剂配比参数进行比较。结果利用超临界CO2萃取技术可以从甲鱼脂肪中获得CO2超临界萃取原油(SFE原油),并经正交分析得到最佳的组合为A1B3C3,其最优化工艺条件是:压力20MPa,温度50℃;时间4h,CO2用量为2m·lg^-1,EPA和DHA的最高萃取率为:16.32%,SFE原油∶溶剂为1∶12、冷冻8h的条件下,得到的甲鱼油中EPA+DHA含量为26.39%。结论超临界CO2萃取技术简便易行,还具有安全可靠,无污染等优点。因此该方法为开发和综合利用甲鱼资源开辟了新的应用途径。 相似文献
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中国成人动脉粥样硬化病变中p53抑癌基因的结构突变及与病变程度的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
应用PCR-SSCP方法,系统地研究了中国成人动脉粥样硬化(AS)病变组织中p53抑癌基因结构的突变及与病变程度之间的关系。结果:受检的89例AS组织中的9例发现有PCR-SSCP的异常,其中6例经测序证实p53基因突变的具体内容。在此基础上,应用高特异性的p53蛋白单克隆抗体,证实在有p53基因突变的AS组织中也同时有p53突变蛋白的异常表达;对动脉管腔狭窄面积、斑块的相对厚度及二者与p53基因突变之间关系的弹力纤维特殊染色及计算机定量图像分析结果显示:p53基因突变组的管腔狭窄面积明显严重于无突变组(P<0.025),AS组织的相对厚度也明显大于无突变组(P<0.05~0.01)。结论:在人类的AS病变中存在有p53抑癌基因的突变;该基因的突变与AS病变的严重程度密切相关,并可能是AS形成的一个新的、重要的机制。 相似文献
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苦荞壳提取物对大鼠血脂的调节作用 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:观察苦荞壳提取物对高脂血症大鼠血脂的调节作用,探讨其机制. 方法:将雄性Wistar大鼠50只按体质量随机分为普通饲料组、高脂模型组、苦荞壳提取物高剂量组(0.825 g/kg)、低剂量组(0.165 g/kg)和力平之对照组(0.067 g/kg). 于实验后第12周测定大鼠血清Ch, Tg, HDL-C, LDL-C, MDA含量, SOD, GPX活力和肝指数,并观察大鼠肝组织病理变化. 结果:高脂模型组大鼠血清Ch, Tg, LDL-C, MDA含量和肝指数显著高于普通饲料组(P<0.05); HDL-C, SOD显著低于普通饲料组(P<0.05); GPX低于普通饲料组,体质量高于普通饲料组,但无统计学差异(P>0.05). 力平之组大鼠血清Ch, Tg, LDL-C, MDA含量显著低于高脂模型组(P<0.05);GPX显著高于高脂模型组(P<0.05); HDL-C, SOD, 肝指数和体质量与高脂模型组之间无统计学差异(P>0.05). 苦荞壳提取物各组大鼠血清Ch, Tg, LDL-C, MDA和肝指数显著低于高脂模型组(P<0.05); SOD, GPX显著高于高脂模型组(P<0.05); HDL-C高于高脂模型组,体质量低于高脂模型组,但无统计学差异(P>0.05). 结论:苦荞壳提取物可降低实验性高血脂血症大鼠的血脂和肝指数,提高血液的抗氧化能力,减轻高脂饮食导致的氧化损伤. 相似文献