中药标准品对人肺癌耐药细胞A549/DDP的逆转效果研究

目的：研究中药标准品对人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP的逆转效果。方法：通过细胞增殖实验研究耐药细胞株（A549/DDP）的耐药倍数和对所选中药标准品的耐受情况。回归分析计算中药标准品对A549/DDP的IC5作为其逆转耐药的工作浓度。研究中药标准品在工作浓度下对A549/DDP耐顺铂的逆转效果。结果：A549/DDP的耐药指数为31.79。A549/DDP对川芎嗪、苦参碱耐受良好。盐酸小檗碱、北豆根碱（蝙蝠葛碱）和冬凌草甲素对A549/DDP细胞增殖均有一定的抑制作用,且存在明显的量效关系,工作浓度时,均能逆转A549/DDP对顺铂的耐受性（P<0.01）。结论：所选的中药标准品能有效逆转A549/DDP对顺铂的耐药性。     

降压通络方对高血压肾损害大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ及肾功能的影响

目的观察降压通络方对自发性高血压肾损害大鼠肾脏血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)及肾功能的影响,探讨该方对高血压肾损害大鼠肾脏的保护机制。方法采用16周龄自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertension Rat,SHR)为研究对象,将其随机分为模型组、缬沙坦组、降压通络方高、中、低剂量组、并设正常血压大鼠(Wistar Kyoto,WKY)为空白对照,分别灌胃给药。于给药后4周和8周分别测定大鼠尾动脉压力、血肌酐、尿素氮及肾脏Ang II蛋白含量,并进行大鼠肾脏病理组织学检查。结果给药4、8周后,与模型组比较,各治疗组大鼠血压、肾脏Ang II含量明显降低(P0.01,P0.05),但给药4周各组之间比较无统计学意义,给药8周缬沙坦及降压通络方高、中剂量组均明显低于低剂量组(P0.05);缬沙坦及降压通络方能显著降低模型组大鼠血肌酐、尿素氮(P0.01,P0.05),改善肾小动脉及肾小球硬化,促进肾组织结构的恢复。结论降压通络方能降低高血压肾损伤大鼠肾脏Ang II含量,从而有效降低大鼠血压,改善肾脏病理损害,保护肾功能。     

盐酸川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌细胞黏附能力的影响

摘 要：［目的］ 探讨盐酸川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭黏附能力的影响及其作用机制。［方法］ 小鼠Lewis肺癌细胞体外培养,细胞黏附侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变,Western Blot检测各组细胞Twist、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达的变化。［结果］ 经DDP与TMP干预36h后,与对照组相比,用药组细胞的侵袭能力呈剂量依赖性下降,且DDP联合TMP组与单独使用DDP组相比,抑制细胞侵袭的能力更为显著（P＜0.05,P＜0.01）。细胞黏附实验显示,与对照组（23.76±1.64）相比,单独应用顺铂（47.40±0.85）可显著性增高细胞黏附抑制率（P＜0.01）,而单独应用TMP需药物浓度达到2000μg/ml时才可显著性增高黏附抑制率（P＜0.01）,两药联合组黏附抑制率均高于单独使用DDP组,尤以高剂量组抑制率最为显著（P＜0.01）。与单独用药相比,DDP+TMP可降低Twist、N-cadherin蛋白,并上调E-cadherin蛋白的表达（P<0.01）。［结论］ 盐酸川芎嗪联合顺铂能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的侵袭和转移,其机制可能与直接抑制肿瘤细胞侵袭,抑制相关基因蛋白Twist及N-cadherin,促进黏附分子E-cadherin蛋白表达有关。     

川芎对恶性肿瘤侵袭与转移影响研究进展

血瘀证是恶性肿瘤常见证型,而中药川芎具有活血化瘀、消炎镇痛、益气补血等功用,应用川芎抗肿瘤及防治肿瘤转移和复发的研究近年来取得了较大的进展。本文从抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡,抑制癌基因的表达,改善血液高凝状态,抗肿瘤血管生成、改善乏氧微环境,影响肿瘤细胞侵袭、迁移及黏附能力,增强免疫监视和免疫调控、化疗药物增效减毒等方面概述了川芎防治恶性肿瘤转移的作用机制。目前川芎对肿瘤生长及转移的作用及对肿瘤治疗效果及机制的研究仍需更多的临床及实验依据,需进一步认识血瘀证的本质及川芎的作用机理和靶点,同时活血化瘀中药抗肿瘤及转移的研究还存在思路及方法上的问题。今后应进一步拓宽研究范围,提高研究深度,运用更科学的方法和更规范的研究,使活血化瘀中药抗肿瘤机制得到更全面的揭示。     

盐酸川芎嗪联合顺铂对Lewis肺癌细胞侵袭转移能力的影响

目的：探讨盐酸川芎嗪联合顺铂（TMP+DDP）对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭转移的影响及可能的分子机制。方法：小鼠Lewis肺癌细胞体外培养,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,细胞黏附实验、Transwell小室实验检测细胞侵袭、黏附能力的改变,Western Blot检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达变化。结果：与对照组相比,盐酸川芎嗪呈剂量依赖性抑制小鼠Lewis肺癌细胞的增殖;Transwell实验、细胞黏附实验显示,盐酸川芎嗪联合顺铂作用细胞24h后,与对照组相比,细胞的侵袭、黏附能力均有不同程度的下降,其抑制率呈剂量效应（P＜0.01）;Western Blot实验表明,盐酸川芎嗪联合顺铂作用细胞24h后,与对照组相比,LLC-GFP细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显上调（P＜0.01）。结论：盐酸川芎嗪联合顺铂可显著地抑制LLC-GFP细胞的生长、侵袭、黏附能力,其机制可能与其能上调E-cadherin蛋白表达水平相关。     

盐酸川芎嗪对小鼠Lewis肺癌细胞转移及上皮-间质转化的影响

目的:探讨盐酸川芎嗪对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭黏附能力及上皮-间质转化的影响及其作用机制。方法:对绿色荧光蛋白(GFP)标记的小鼠Lewis肺癌细胞株(LLC-GFP)进行体外培养,经盐酸川芎嗪干预24 h后,分别采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,细胞黏附实验、Transwell小室实验检测细胞侵袭、黏附能力的改变,流式细胞技术、Western Blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)与N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达变化。结果:与对照组比较,盐酸川芎嗪呈剂量依赖性抑制LLC-GFP细胞的增殖;Transwell实验显示,与对照组比较,用药组细胞的侵袭能力呈剂量依赖性下降(P0.01);细胞黏附实验显示,与对照组黏附抑制率(14.01±1.36)%比较,应用盐酸川芎嗪需药物浓度达到2,000μg/m L时才可显著增高黏附抑制率(P0.01);流式细胞技术及Western blot实验结果显示,与对照组比较,盐酸川芎嗪可下调N-cadherin蛋白,并上调E-cadherin蛋白的表达(P0.01),且呈剂量依赖性。结论:盐酸川芎嗪可显著地抑制LLC-GFP细胞的生长,抑制侵袭和黏附,其机制可能与直接抑制肿瘤细胞侵袭,抑制相关黏附蛋白N-cadherin,促进黏附分子E-cadherin蛋白表达有关。     

丹参酮ⅡA磺酸钠联合顺铂对小鼠lewis肺癌细胞上皮性钙黏蛋白表达的影响

目的探讨活血化瘀药丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)联合顺铂(DDP)对小鼠lewis肺癌细胞上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。方法运用CCK8法摸索STS不同浓度对肿瘤细胞的抑制率影响;Western-blot检测E-cadherin蛋白的表达水平;Transwell小室侵袭转移实验检测各组细胞转移数量。结果浓度为0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL的STS与空白对照组比较,细胞的抑制率明显升高且呈浓度依赖性(P0.05);STS联合DDP处理后,肺癌细胞侵袭能力和黏附能力明显减弱(P0.05);药物处理后E-cadherin蛋白表达水平明显上升(P0.05)。结论活血化瘀药STS联合DDP能调节小鼠lewis肺癌细胞E-cadherin表达并抑制其侵袭转移,在肺癌转移过程中具有重要作用。     

降压通络方对高血压肾损害大鼠肾上腺髓质素表达的影响

目的观察降压通络方对高血压病肾损害大鼠肾脏肾上腺髓质素(ADM)表达的影响,探讨其对高血压肾损伤大鼠肾脏的保护作用。方法采用16周龄自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,将其随机分为模型组、缬沙坦组、降压通络方组、并设正常血压大鼠(WKY)为空白对照。降压通络方组、缬沙坦组分别给予降压通络方14.2 g/(kg·d)和缬沙坦10 mg/(kg·d)灌胃治疗,模型组及正常对照组给予等量的生理盐水。观察各组大鼠在给药前、给药2周、4周、8周后血压的变化,测定大鼠24 h尿蛋白定量,同时观察肾功能及肾脏病理组织学改变,检测大鼠肾脏中ADM的蛋白含量,并与大鼠的血压进行相关性分析。结果模型组及各治疗组大鼠血压、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)较正常对照组明显升高,降压通络方组、缬沙坦组均明显低于模型组(P0.01),但2个治疗组之间比较无显著性差异;模型及各治疗组大鼠肾脏ADM蛋白含量较正常对照组明显降低(P0.01),与模型组比较,降压通络方及缬沙坦组大鼠肾脏ADM蛋白含量明显升高(P0.01),并与大鼠的血压呈明显负相关(γ=-0.740,P0.001),但2个治疗组之间比较无明显差异。HE染色显示降压通络方能显著改善肾小动脉及肾小球硬化,促进肾组织结构的恢复。结论降压通络方通过上调高血压肾损害大鼠肾脏ADM的表达,扩张肾脏局部小血管,改善肾脏缺血,在保护肾脏功能方面起到重要作用。     

通脉益肾方拮抗肾间质纤维化的作用机制

目的观察通脉益肾方对肾间质纤维化模型大鼠肾脏肾上腺髓质素及肾小管上皮细胞表型转化的影响,探讨其拮抗肾间质纤维化的作用机理。方法采用单侧输尿管结扎的方法复制大鼠肾间质纤维化模型,将其随机分为假手术组、模型组、通脉益肾方组和缬沙坦组。通脉益肾方组、缬沙坦组分别给予通脉益肾方1.5 g/(kg.g)和缬沙坦10 mg/(kg.d)灌胃治疗,假手术组及模型组给予等量的生理盐水。观察梗阻侧肾脏肾上腺髓质素(ADM)、肾小管上皮细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达,做相关性分析;采用HE及天狼星红染色观察各组大鼠肾脏的病理改变。结果模型组及各治疗组大鼠肾脏中ADM蛋白表达较假手术组明显降低(P<0.05),通脉益肾方组、缬沙坦组的ADM的蛋白含量及表达均高于模型组(P<0.05),但两治疗组之间无显著性差异。模型及各治疗组α-SMA的蛋白表达较假手术组明显升高(P<0.05),通脉益肾方组、缬沙坦组的表达均低于模型组(P<0.05),但两治疗组之间无显著性差异。ADM与α-SMA的表达呈明显负相关。结论通脉益肾方可能通过上调间质纤维化大鼠肾脏ADM的表达、抑制肾小管上皮细胞的表型转化起到拮抗肾间质纤维化的作用。     

肌成纤维细胞转化在恶性肿瘤转移过程中的作用

肿瘤转移过程是一个多因素调控、多步骤协同的交互过程。肿瘤微环境中肌成纤维细胞转化是促进肿瘤及转移发生的重要病理过程,这一过程可以通过以下作用实现:(1)构成适合肿瘤细胞生长的代谢体系;(2)提供立体生长形态支架;(3)促进肿瘤细胞上皮间质转化;(4)分泌血管内皮生长因子,促进微循环形成;(5)形成鞘状结构保护肿瘤细胞免受药物及免疫细胞伤害;(6)分泌生长因子和细胞炎性因子,促使纤维细胞和成纤维细胞发生肌成纤维细胞转化。而以上作用很可能是化痰类和活血化瘀类中药抗癌、抗转移的核心作用机制。