钩吻素子对小鼠抗应激作用的实验研究

【目的】观察钩吻素子(Kou)对小鼠的抗应激作用。【方法】昆明种小鼠随机分为模型对照组,Kou低、中、高剂量组(剂量分别为1.2、2.4、4.8 mg.kg-1.d-1),各组按设计剂量灌胃给药,连续7 d;末次给药1 h后进行负重游泳、耐缺氧、耐高温及耐低温的应激实验,并检测小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量的变化。【结果】给予Kou处理后,在不同的抗应激实验中用药小鼠的生存时间均比模型对照组延长(P<0.05或P<0.01),在负重游泳实验中用药小鼠血清SOD活力上升、MDA含量下降(均P<0.01);但在小鼠耐高温实验中,Kou给药组和模型对照组的生存时间差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】Kou能提高小鼠负重游泳、耐寒及耐缺氧能力,其抗应激作用可能与抗脂质过氧化有关。     

钩吻研究进展

钩吻为马钱科 (Ｌｏｇａｎｉａｃｅａｓｅ)植物胡蔓藤 (Ｇｅｌｓｅｍｉｕｍｅｌｅ ｇａｎｓＢｅｎｔｈ ,ＧＥＢ)的全草 ,是世界著名的剧毒植物。钩吻在国内外的应用已十分广泛。在国外 ,1887年ＨＧｅｒｒａｄ等将其制成格林制剂 ,并已成为法定制剂 ,为一些国家的副药典所收载 ;美国药物索引及日本《世界的民间药》中均有钩吻的记载。我国对钩吻的研究历史更为悠久 ,《神农本草》中将其列为下品 ,谓其“破积 ,脚膝痹痛 ,四肢拘挛、恶疮疥虫 ,鸟兽” ;“本草纲目”记载钩吻“主金疮、乳痈、中恶风、咳逆上气 ,鬼痊蛊毒”。我国民间以其毒性大 …     

开口箭皂苷对人神经胶质瘤细胞作用及相关机制研究

目的探讨开口箭皂苷体外对人神经胶质瘤U251细胞的作用和其相关机制。方法开口箭皂苷作用于U251细胞后检测其IC50值。溶血实验观察开口箭皂苷对细胞膜的影响。提取U251细胞的DNA分析条带。RT—PCR技术检测开口箭皂苷对U251细胞的bax和bcl-2基因表达的影响。利用激光共聚焦显微技术研究开口箭皂苷对U251细胞内游离钙浓度和pH值的影响。结果开口箭皂苷对U251细胞的IC50值为8．5μg／ml。不能引起肉眼可见的溶血现象。开口箭皂苷诱发了肿瘤细胞的凋亡，并引起了bax基因表达量的升高和bcl-2基因表达量的下降，并可引起U251细胞内游离钙浓度和pH值的降低。结论开口箭皂苷体外可以诱导U251细胞凋亡，其机制可能与上述实验结果有关。     

钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的实验研究

目的探讨钩吻素子(Kou)体外能否诱导LoVo细胞凋亡。方法以Kou(50 μmol/L)作用于LoVo细胞,经光镜、电镜和荧光显微镜观察细胞凋亡情况,并用流式细胞仪检测细胞增殖周期状态。结果通过光镜、电镜和荧光显微镜观察均证实Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且凋亡百分率随Kou作用时间的延长而升高。经Kou作用后的肿瘤细胞,细胞周期状态发生明显变化,G0/G1期细胞从31.3%上升到42.3%,S期细胞从62.0%下降到38.7%。结论Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且存在时间依赖关系,Kou可抑制细胞DNA的合成,阻止细胞由G1期向S期转化。     

钩吻素子对神经胶质瘤细胞U251生长抑制及诱导凋亡作用

目的：探讨钩吻素子体外对神经胶质瘤细胞U251的生长抑制作用及诱导凋亡的作用.方法：利用MTT法和台盼蓝拒染法观察钩吻素子对神经胶质瘤细胞U251生长抑制作用.应用激光共聚焦、流式细胞仪、电子显微镜检测钩吻素子诱导U251细胞的凋亡作用.结果：MTT结果显示钩吻素子在（5-50mg/L）的浓度范围内对人神经胶质瘤U251细胞具有显著的抑制作用.生长曲线结果显示药物的各个浓度对U251的抑制作用呈时间依赖性.流式细胞仪可以观察到明显的＂亚G1期＂峰（凋亡峰）,且凋亡率达到22.4%.激光共聚焦显微镜可以观察到典型的凋亡核形,如核固缩和核碎裂等.透射电子显微镜下见到典型的早期凋亡形态学表现.结论：在一定的浓度范围内,钩吻素子可以抑制U251细胞的生长,并呈剂量和时间依赖效应.其抗肿瘤的特性与引起肿瘤细胞的凋亡有关.     

钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的实验研究

目的 探讨钩吻素子(Kou)体外能否诱导LoVo细胞凋亡。方法 以Kou(50μmol／L)作用于LoVo细胞，经光镜、电镜和荧光显微镜观察细胞凋亡情况，并用流式细胞仪检测细胞增殖周期状态。结果 通过光镜、电镜和荧光显微镜观察均证实Kou可诱导LoVo细胞凋亡，且凋亡百分率随Kou作用时间的延长而升高。经Kou作用后的肿瘤细胞，细胞周期状态发生明显变化，G0／G1期细胞从31．3％上升到42.3％，S期细胞从62．0％下降到38．7％。结论 Kou可诱导LoVo细胞凋亡，且存在时间依赖关系，Kou可抑制细胞DNA的合成，阻止细胞由G1期向S期转化。     

坐骨神经再生过程中施万细胞自噬的形态学观察

目的：探讨大鼠坐骨神经再生过程中的细胞自噬作用。方法：横切大鼠坐骨神经制作神经损伤再生模型，分别于造模后0、0．5、1．0、1．5、2．0、3．0、4、5、7、10、15d取近断端组织行电镜结构观察。结果：轴突在第1天时从髓鞘脱离，溃变呈空泡状。第2天开始髓鞘皱褶、绞窄并脱落形成碎片，施万细胞内可见大小形状各异的髓鞘碎片，并与大量溶酶体融合形成自噬泡，呈酸性磷酸酶（AcPase）阳性。第7d时幼稚细胞出现于新生毛细血管周围，大量幼稚细胞随后出现。结论：施万细胞自噬对坐骨神经再生时溃变髓鞘的清除起主要作用，溶酶体显著地参与了该过程，施万细胞脱分化为幼稚的祖细胞后大量增殖分化参与神经再生过程。     

钩吻素子体外抑制人结肠腺癌细胞生长并诱导其凋亡的实验研究

目的：运用细胞生物学方法探讨钩吻素子(Koumine，Kou)对人结肠腺癌细胞生长的作用，并从细胞凋亡的角度研究钩吻素子抗肿瘤机制。方法：将Kou以不同剂量和作用时间处理体外培养的人结肠腺癌Lovo细胞，用MTT法检测各孔的OD值，以此计算Kou对肿瘤细胞的抑制率及IC50，并绘制其量效及时效曲线；     

钩吻素子注射液的一般药理学研究

目的 观察钩吻素子注射液对实验动物精神神经、呼吸及心血管系统的影响。方法 用光电计数仪测定钩吻素子注射液对小鼠自发活动的影响，用CYS-0．5型压力换能器测定犬股动脉血压。用TB-611型张力换能器记录犬呼吸曲线，针型电极刺入四肢皮下测二导联心电图。上述指标通过MPA2000多功能信号处理器输入到计算机，由计算机自动采样并处理。实验共观察了小鼠一般行为、15min内自发活动次数，犬的心率、心电电压最大值、最小值及平均值，犬的平均动脉压、呼吸频率及呼吸深度等9项指标，其中后7项指标观察了给药前及给药后10、20、30、60、90及120min共6个时间点的变化。结果 钩吻素子注射液中、高剂量可显著减少实验小鼠的自发活动次数；对实验犬的呼吸系统及平均动脉压、心电电压最大值、最小值及平均值均无影响。钩吻素子注射液低剂量对犬的心率无影响，但中、高剂量给药前后犬的心率有显著性差异。结论 钩吻素子注射液对实验小鼠有一定的镇静作用；而除了对实验动物心率有一定影响外，对呼吸及心血管系统无影响。