胃癌病因:人N-亚硝酰胺暴露研究

胃癌是严重危害人类健康的常见病,其发生与膳食因素密切相关。N-亚硝酰胺(NAD)是诸多胃癌高危因素中病因学证据最多的可疑病因,但是长期缺乏流行病学相关性证据和NAD详细化学结构资料,胃癌NAD病因的理论难以确立。20世纪80年代末,北京市肿瘤防治研究所在痕量NAD检测方法上取得了突破,作者依托该技术,充分利用我国胃癌高低发现场人群资源,在北京市科技新星     

变性高效液相色谱法检测CpG岛胞嘧啶甲基化

目的 建立一种新型的ＣpＧ岛胞嘧啶甲基化快速检测方法。方法 用亚硫酸氢钠处理ＤＮＡ,丙用链特异性聚合酶链反应（ＰＣＲ）对错配修复基因hＭＬＨ１启动子含ＣpＧ位点的靶序列进行扩增;利用变性高效液相色谱法（ＤＨＰＬＣ）在部分变性温度下测定靶序列的保留时间,并与亚硫酸氢钠－酶切法测定结果进行比较。结果 用ＤＨＰＬＣ对结肠癌细胞株ＲＫＯ和胃癌细胞株ＰＡＣＭ８２的hＭＬＨ１启动子进行测定,发现ＲＫＯ细胞ＰＣＲ产物的保留时间显长于ＰＡＣＭ８２细胞ＰＣＲ产物的保留时间（６．７min比６．２min）。ＲＫＯ细胞ＰＣＲ产物保留时间的延长是亚硫酸氢钠处理后的模板中胞嘧啶和鸟嘌呤含量较ＰＡＣＭ８２高所致。从此结果分析,可以判断出ＲＫＯ的hＭＬＨ１启动子已甲基化,而ＰＡＣＭ８２细胞未甲基化。此结果与酶切法结果完全一致。结论 新方法可以快速检测ＣpＧ岛胞嘧啶甲基化。     

胃癌高发区食品中N-甲基亚硝基脲的分离鉴定

目的：从亚硝化食品中分离鉴定Ｎ亚硝酰胺。方法：用高效液相色谱（ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）光水解热裂解热能分析仪联机技术，从胃癌高发区食品鱼露亚硝化产物中直接分离、测定和制备热不稳定性Ｎ亚硝酰胺色谱组份；利用ＨＰＬＣ电喷雾离子化质谱计和ＨＰＬＣ紫外光谱仪联机技术，对该色谱峰的制备组份进行结构确证。结果：从亚硝化鱼露中直接分离到一种热不稳定性Ｎ亚硝基化合物，其色谱保留时间与Ｎ甲基亚硝基脲（Ｎｎｉｔｒｏｓｏｍｅｔｈｙｌｕｒｅａ，ＮＭＵ）相同；进行结构确证研究发现，该色谱峰的质谱特征峰（ｍ／ｚ６４、１０２、１４５）及紫外吸收光谱（λｍａｘ＝２３０ｎｍ）与ＮＭＵ标准品相同。结论：实验结果充分说明该色谱峰含ＮＭＵ，首次直接证明了亚硝化食品中存在ＮＭＵ。