虚拟仿真一流课程建设的探索与实践

通过对虚拟仿真一流课程建设要素的剖析和解读,结合国家级虚拟仿真一流课程建设的探索和实践,阐述了虚拟仿真一流课程建设的主要内容、要点和建设成就,为虚拟仿真一流课程的建设提供可借鉴的经验,并对虚拟仿真课程建设的发展方向提出了自己的见解。     

100名健康人群CYP2C19基因型检测

CYP2C19又称为S—美芬妥英羟化酶,1993年Wrishton等从人类肝脏分离出来的一种酶,被发现参与十几种药物的代谢。美芬妥英羟化代谢在人群中有遗传的多态性,羟化速度快者为快代谢者(extensive metabolism EM),羟化速度慢者为慢代谢者(poor metabolism PM)。1994年de Morais等先后发现了CYP2Cl9的两个等位基因:CYP2C19ml     

ELISA方法研究多糖与人干扰素-γ相互作用

目的:建立一种体外研究多糖与干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)相互作用的ELISA方法.方法:在硼氰氢化钠作用下合成肝素-牛血清白蛋白复合物(Heparin-BSA Complex,HBC),Sepharose 4B凝胶过滤系统分离纯化HBC,并用SDS-PAGE鉴定.将HBC(相当于0.5 μg蛋白含量)包被在酶标板上,ELISA方法检测HBC与IFN-γ的相互作用,并探讨游离肝素、低分子量肝素、硫酸软骨素A、硫酸软骨素C和透明质酸,以及卡拉胶等多糖对这种结合的影响.结果:IFN-γ与HBC的结合呈IFN-γ剂量依赖性,2 ng左右达到饱和.游离肝素和低分子量肝素以及其他多糖均不同程度地抑制了IFN-γ与HBC的结合,肝素和低分子肝素的IC50分别为2.4 μg/ml和18.6 μg/ml.结论:IFN-γ与肝素、卡拉胶高亲和力结合,而与硫酸软骨素A、硫酸软骨素C、透明质酸结合力极弱.ELISA是一个简单、灵敏的研究细胞因子与多糖相互作用的方法.     

多糖对免疫细胞调节作用的新视角 ——对树突状细胞的影响

多糖作为一种免疫调节和促进剂对巨噬细胞、T/B淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)的功能都有调节作用,树突状细胞(DC)是功能最强大的抗原提呈细胞,多糖对树突状细胞功能的影响近年来也有所报道,主要包括多糖对树突状细胞表面分子的表达、细胞因子分泌、吞噬功能、多糖受体及信号转导途径等方面的调节作用。     

巨噬细胞表面的主要模式识别受体研究进展

巨噬细胞表面表达一系列受体分子,这些受体分子基本上都属于模式识别受体。它们能够与相应的病原体相关分子模式结合,介导巨噬细胞识别各种内源和外源抗原分子,是巨噬细胞发挥黏附,吞噬,调理,清除,杀伤和递呈功能,参与机先天性和获得性免疫应答的关键性环节。     

基于声表面波器件的仿生嗅觉受体传感器的研究

嗅觉受体可以与气味分子发生特异性的相互作用,这一机理不仅在生物嗅觉系统分辨和识别气味的过程中发挥着重要作用,而且也为解决传统嗅觉传感器特异性低的问题提供新的途径。从仿生设计角度,利用嗅觉受体对其配体特异性识别的机理,提高嗅觉传感器的特异性。以嗅觉受体作为敏感元件,声表面波器件作为二级传感器,构建一种可用于特异性气味检测的新型嗅觉受体传感器。选择秀丽线虫嗅觉受体ODR-10作为生物识别元件,通过基因工程的方法,将其表达在人乳腺癌细胞MCF-7细胞质膜上,提取含有ODR-10的细胞质膜组分,将其涂覆在声表面波器件的敏感区域。结果表明,ODR-10可以有效地表达于MCF-7的细胞质膜上,用这种异源表达的ODR-10构建的仿生嗅觉传感器对ODR-10的配体丁二酮具有很高的灵敏度,并具有很好的特异性。实验结果证实,这种基于嗅觉受体的仿生嗅觉传感器不仅适用于特异性气味检测,也适用于筛选特异性的嗅觉受体-配体对,将进一步推动嗅觉传导机理研究的进展。     

ASA法和PCR-RFLP法对CYP2C19ml和CYP2C19m2等位基因分析的比较

[目的]建立等位基因特异性扩增法(ASA)检测CYP2C19ml和CYP2C19m2等位基因。[方法]用ASA法和聚合酶链反应与限制性片段长度多态性结合使用的方法(PCR-RFLP)同时检测100例随机健康受试者血样CYV2C19ml和CYV2C19m2等位基因。[结果]对100例随机健康受试者血样(CYP2C19ml和m2的检测，结果是wt／wt 45例、wt／ml 30例、wt／m2 11例、ml／m2 7例、ml／m2 7例、m2／m2 0例。[结论]ASA法简单、快速、复重性好，适用于一般实验室检查及大规模的人群调查。     

细胞色素P450 2C19单碱基突变位点CYP2C19m1的分析

目的:CYP2C19ml是引起CYP2C19酶活性缺陷的主要等位基因,有83%左右的慢代谢者含有CYP2C19ml等位基因,本文试图建立一步PCR测定CYP2C19ml等位基因的方法。方法:根据等位基因特异扩增(ASA)原理设计两对分别特异扩增野生型等位基因和突变型等位基因的引物,建立了一步PCR测定CYP2C19ml等位基因的方法。结果:对39位随机受试者进行了基因分型研究,发现3位CYP2C19ml纯合子、18位CYP2C19ml杂合子,其余18位为野生型纯合子。结论:说明效法能够用于测定CYP2C19ml等住基因,并且证明该法具有简便、快速和污染少的优点。     

壳寡糖结合并激活巨噬细胞机制的研究

目的：研究壳寡糖结合并激活巨噬细胞的机制。方法：RT-PCR和ELISA检测壳寡糖对巨噬细胞及经γ干扰素（IFN-γ）预刺激巨噬细胞的白介素1β（IL-1β）基图表达水平的影响；钙离子脂化探针Fluo-3／AM检测壳寡糖对巨噬细胞胞浆游离Ca^＋浓度的影响；用四甲基异硫氰酸罗丹明标记甘露聚糖，激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察标记糖结合及进入巨噬细胞的情况；通过竞争性抑制实验探讨巨噬细胞摄取壳寡糖的可能途径。结果：壳寡糖对巨噬细胞IL-1β基因表达的影响呈浓度与时间依赖性，IFN-γ预刺激巨噬细胞有增强作用；高浓度壳寡糖引起巨噬细胞胞浆游离Ca2^＋浓度升高；壳寡糖竞争性抑制巨噬细胞内吞甘露聚糖，抑制强度达44％。结论：壳寡糖可能是经由巨噬细胞表面的甘露糖受体介导结舍并激活巨噬细胞，钙离子相关的信号转导途径可能参与这一过程。