2 527株临床分离病原菌的耐药性分析

目的 分析粤北人民医院临床分离病原菌对常用抗菌药的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法 采用K-B法或MIC法对2013年2 527株临床分离株进行药敏试验。以CLSI 2012为判断标准,应用WHONET5.4和SPSS19.0软件进行数据分析,综合分析医院的耐药情况。结果 金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林菌株占30.9%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率为76.2%,未检出万古霉素、利奈唑胺耐药菌株。屎肠球菌对所测抗菌药物的耐药性显著高于粪肠球菌,屎肠球菌中未检出糖肽类和利奈唑胺耐药菌株,但是粪肠球菌中检出1株利奈唑胺耐药菌株,检出2株替考拉宁耐药菌株。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中产ESBLs株分别为43.9%和37.5%,检出5株对多黏菌素B耐药的铜绿假单胞菌,多重耐药鲍曼不动杆菌占了63.7%。结论 临床病原菌耐药性较严重,应加强监测,临床应依据药敏结果合理的应用抗生素。     

梅毒螺旋体Tp0751重组蛋白的表达及鉴定

目的表达梅毒螺旋体粘附蛋白Tp 0751,纯化表达产物并对其抗原性进行鉴定。方法通过生物信息学分析,去除Tp 0751信号肽序列,构建原核表达体并在大肠埃希菌（E.coli）R2566中进行诱导表达;Ni-NTA法纯化重组蛋白;蛋白质印迹法（WB）鉴定重组蛋白。结果成功构建了PET-28a（＋）/Tp 0751原核表达载体;经表达、纯化后获得了相对分子量约为26 kD的融合蛋白;经WB分析能与梅毒患者阳性血清发生特异性反应。结论重组表达的Tp 0751重组蛋白具有良好的抗原性,为进一步研究Tp 0751重组蛋白在梅毒致病过程中的作用奠定了基础。     

梅毒螺旋体Tp0319重组蛋白的表达、纯化及其在临床诊断中的初步应用

目的克隆、表达及纯化梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白Tp 0319,并建立间接ELISA方法,探讨其在梅毒血清学诊断中的价值。方法构建重组质粒PQE32/Tp 0319,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和western blot鉴定表达结果;Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,间接ELISA检测梅毒患者血清中特异性IgG抗体。结果成功构建了PQE32/Tp 0319重组质粒;经SDS-PAGE检测,诱导产物显示有一条相对分子质量约为30 000的特异蛋白质条带,western blot分析证明其只与人抗Tp IgG发生特异性反应;将Tp 0139用于间接ELISA检测抗Tp抗体阴、阳性参比血清,特异性和敏感性均为100%;检测梅毒患者和健康献血者血清各150份,结果与TPPA法符合率为95.3%。结论制备的Tp 0319重组蛋白有较好的免疫反应性,可望用于临床梅毒血清学诊断。