金莲花提取物代谢产物研究

目的:研究金莲花化学成分的体内代谢产物及代谢规律。方法:静脉注射方式给予大鼠金莲花提取物并在各时间段采血,利用高效液相色谱-电喷雾电离-串联质谱技术(LC-ESI-MS)对血清中的代谢产物进行研究。结果:根据LC-ESI-MS结果发现了23种原型成分及45种代谢产物。原型成分中有3种酚酸类物质、19种黄酮类物质、1种生物碱类物质。通过准分子离子峰及二级碎片得到了代谢产物可能的化学结构,分析了这些代谢产物的裂解途径,推测19种来源于酚酸类物质、20种来源于黄酮类物质、6种来源于生物碱类物质。结论:本研究探讨了金莲花提取物中化学成分的代谢规律,为其血液移行成分及药理作用的进一步研究奠定基础。     

市售青风藤饮片的显微鉴别研究

目的对市售青风藤饮片进行显微鉴别。方法通过徒手切片,采用显微鉴别法对购自全国各地的91份青风藤饮片进行了鉴别。结果上述样品中有87份为正品,4份为混伪品,正品率为95.6%,说明青风藤的整体市场状况良好。4份混伪品的性状及显微特征与药典描述的青风藤不符,均被鉴定为萝藦科植物黑龙骨Periploca forrestii Schltr.的干燥藤茎。结论结果可为青风藤的临床用药和产品开发提供依据。     

壁虎鲜品和炮制品抗肿瘤活性比较研究

目的：比较中药壁虎鲜品与炮制品对小鼠H22肝癌细胞体内外生长抑制作用的强弱。方法：体外试验采用MTT法,检测壁虎提取液冻干粉对H22细胞的增殖抑制情况;体内试验采用小鼠肝癌H22移植瘤法,比较对实体肿瘤的抑制作用,并检测药物对小鼠胸腺指数及脾指数的影响。结果：在体外试验中,壁虎鲜品和炮制品对H22细胞的半数抑制率IC50分别为8.53、6.42 mg/ml;体内试验,鲜品和炮制品最大抑瘤率分别为53.0%和47.4%。炮制品各组的胸腺指数和脾指数均高于环磷酰胺（CTX）阳性对照组,鲜壁虎的中、高剂量组胸腺指数和低剂量组脾指数较阳性对照组高。结论：鲜品与炮制品均有抗肿瘤作用,但二者活性差异不显著;炮制品对胸腺和脾脏有生长刺激作用。     

小鼠体外T淋巴细胞模型的优化及在中药筛选中的应用

目的 :优化MTT法测定小鼠体外T淋巴细胞的实验条件 ,并对 6种种子类中药的活性进行筛选。方法 :无菌分离小鼠脾脏 ,制备脾淋巴细胞 ,与待测药物预孵 1h后 ,加入刀豆蛋白A刺激剂继续培养 ,总计培养 72h后收获细胞 ,进行MTT染色 ,以酶标仪进行测定。结果 :应用MTT法 ,在 (2～ 3 0 )× 10 9/L范围内细胞密度与A值呈线性正相关 ,优化后的测定条件为细胞悬液中加入 10 μl的ConA ,孵育 72h后再加入 2 0 μl的MTT ,继续孵育 4h ,测定波长为 5 12nm。结果表明 ,这 6种种子类中药对小鼠T淋巴细胞均有一定的抑制作用。结论 :用于进行中药的抑制T淋巴细胞活性的体外筛选。     

金莲花中四种主要成分的抗炎活性研究

目的对金莲花中的四种主要成分牡荆素、荭草素、藜芦酸和金莲花苷进行体内抗炎活性研究。方法采用巴豆油致小鼠耳肿胀模型,皮下注射方式给药,观察四种成分对小鼠耳肿胀的抑制效果。结果四种成分在50 mg.kg-1剂量时对小鼠耳肿胀具有一定的抑制作用,而在20 mg.kg-1剂量时无抑制作用。结论四种成分具有一定的抗炎作用,其抗炎活性强弱顺序为:牡荆素>金莲花苷>藜芦酸>荭草素。     

基于分子对接技术探讨金莲花汤抗新型冠状病毒(2019-nCoV)的潜力

目的:对金莲花汤主要成分的抗新型冠状病毒(2019-nCoV或SARS-CoV-2)活性进行虚拟筛选,评价金莲花汤抗2019-nCoV的潜力。方法:采用Autodock软件将金莲花汤中的27种主要成分与2019-nCoV 3CL水解酶(Mpro)进行分子对接。结果:26种化合物可与Mpro蛋白活性中心结合,主要结合成分为黄酮类;主要结合方式为与Mpro蛋白的活性区域形成氢键。结论:金莲花汤表现出Mpro蛋白结合活性,具有抗2019-nCoV的潜力。     

减味银翘散复方挥发油的抗菌性研究

[目的]采用"试管比浊法"研究减味银翘散复方挥发油β-环糊精包合前后对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌性。[方法]固定大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的浓度,分别加入不同浓度的复方挥发油溶液,测定挥发油不同浓度下的抑菌率,得到复方挥发油的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。[结果]该复方挥发油乙醇溶液4℃避光在20 h内最大吸收波长257 nm处吸光度与初始吸光度无统计学差异(P0.05),表明挥发油在20 h内比较稳定。采用β-环糊精包合来增强复方挥发油的稳定性。包合前复方挥发油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抗菌能力,对大肠杆菌的MIC为1.25、5μL/m L,对金黄色葡萄球菌的MIC为0.63、10μL/m L。β-环糊精复方挥发油包合物在液体培养基中37℃溶出后,对大肠杆菌和金葡萄球菌抑菌率分别为39.1%和23.4%。[结论]减味银翘散复方挥发油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有较好的体外抑菌作用,利用β-环糊精包合能增强复方挥发油的稳定性,包合后挥发油对上述两种革兰氏菌仍有较强的抗菌性,为银翘散复方挥发油的进一步开发和利用提供参考。     

云南琵琶甲提取物体内外抗肿瘤活性的实验研究

目的:研究云南琵琶甲粗提物对体外培养肿瘤细胞的增殖抑制作用及对荷H22实体型移植瘤小鼠的体内抑制作用。方法:用水提反复冻融法及不同浓度乙醇提取得到云南琵琶甲粗提物,采用MTT法检测、倒置显微镜观察琵琶甲粗提物对体外培养肿瘤细胞的抑制作用。采用ICR小鼠H22移植瘤模型观察琵琶甲粗提物高、中、低剂量的体内抑瘤活性及荷瘤小鼠胸腺、脾脏和肝脏系数变化。结果:琵琶甲粗提物对体外培养肿瘤细胞有增殖抑制作用,体内实验无抑制肿瘤活性,且有一定的毒性反应。结论:琵琶甲粗提物体外实验显示具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。在本实验条件下,体内无抗肿瘤活性。     

不同部位鹿茸水提液对NRK-49F 细胞促增殖作用的研究

目的：研究鹿茸不同部位水提液体外对细胞促增殖作用的差异。方法：以大鼠肾成纤维细胞NRK-49F 作为模型,以MTT 法检测鲜鹿茸上、中、下三部分水提液的促细胞增殖率,以BCA 法检测样品蛋白浓度,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法分析样品蛋白组成的差异。结果：上、中、下部鹿茸样 品可溶性蛋白含量分别为17.89、16.04 和6.89 mg?mL-1,从顶端到基部,鹿茸可溶性蛋白的含量依次降低。加样24 h 时,鹿茸上部和中部样品分别在蛋白浓度800μg?mL-1 和600μ g?mL-1 时达到最大促增殖率,分别为66.76%和64.36%,下部样品在1 000μg?mL-1 时达到最大促增殖率,为58.87%。作用48 h 后,鹿茸上部和中部样品均在蛋白浓度800μg?mL-1 时达到最大促增殖率,分别为219.56%和215.86%,下部样品在蛋白浓度1 000μg?mL-1 时达到最大促增殖率,为169.20%。鹿茸样品对细胞的增殖促进作用远大于 10%胎牛血清。3 个部位样品蛋白组成的SDS-PAGE 图谱差异不大。结论：所有样品对细胞增殖均有促进作用,且呈现浓度依赖效应。不同部位样品主要蛋白组成差异不大。     

云南琵琶甲提取物抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的:研究云南琵琶甲粗提物对人子宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用,并进一步探讨其提取物抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法:用水提反复冻融法得到云南琵琶甲提取物,倒置显微镜观察、MTT法检测琵琶甲提取物对HeLa细胞的抑制作用,荧光染色观察、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳法检测药物诱导细胞凋亡的作用。结果:云南琵琶甲粗提物对HeLa细胞有明显的增殖抑制作用,IC50为413μg/mL,荧光染色可见细胞皱缩,染色质凝集并边缘化,琼脂糖凝胶电泳可以看到梯状条带,流式细胞术发现S期细胞增多。结论:确定云南琵琶甲提取物可抑制HeLa细胞增殖,并初步推测云南琵琶甲粗提物能够诱导HeLa细胞凋亡。