miR-377-5p 通过下调HIF-1α 及其相关VEGF 信号通路抑制肝细胞癌HepG2 细胞的增殖和侵袭

目的：探讨miR-377-5p 与缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1，HIF-1α）的靶向关系以及通过控血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）信号通路对肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）细胞增殖、侵袭和EMT的调控作用。方法：qPCR检测35 例人HCC组织及癌旁组织标本中miR-377-5p 的表达水平。将HepG2 细胞分为对照组、mimic NC组、miR-377-5p mimic 组，qPCR 检测转染效率；EdU染色、Transwell 和Western blotting（WB）检测miR-377-5p 过表达对HepG2 细胞增殖、侵袭及其增殖相关蛋白Ki-67、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）及上皮间质转化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）标志蛋白E-cadherin、N-cadherin 表达的影响；qPCR、WB检测miR-377-5p 过表达对HepG2 细胞中，缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）表达的影响。荧光素酶报告基因实验验证miR-377-5p 与HIF-1α 基因的靶向关系。结果：HCC 组织中miR-377-5p 表达水平较癌旁组织降低（P<0.01）。与对照组相比，miR-377-5p mimic 组HepG2细胞中miR-377-5p 水平明显升高，细胞的增殖、侵袭能力降低（均P<0.01），EMT、N-cadherin 表达水平降低（均P<0.01）而E-cadherin 表达水平显著升高（P<0.01）；miR-377-5p mimic 组中HIF-1α mRNA 和蛋白表达水平均降低（P<0.01 或P<0.05）。miR-377-5p 靶向抑制HIF-1α 基因表达，并抑制VEGF通路的激活（均P<0.05）。结论：miR-377-5p 通过靶向抑制HIF-1α 基因表达和下调VEGF信号通路从而抑制HepG2 细胞的增殖、侵袭和EMT。     

益母草中阿魏酸对含益母草中成药质量标准影响的探讨

目的：建立HPLC/TQ-MS测定益母草中阿魏酸含量的方法并测定不同产地益母草中阿魏酸含量，评价益母草中阿魏酸对中成药调经止痛片及新生化颗粒的质量影响，为制定含有益母草并以阿魏酸为定量指标的中成药质量标准提供参考。方法：采用薄层色谱法及UPLC-Q/TOF定性鉴别及分析益母草中阿魏酸，采用HPLC/TQ-MS定量分析10批不同产地益母草中阿魏酸含量。基于定量分析结果及处方用量探讨益母草中阿魏酸含量对其中成药质量标准的影响。结果：薄层鉴别及UPLC-Q/TOF定性分析结果显示，10批不同产地益母草中均含有阿魏酸。HPLC/TQ-MS定量分析结果显示，益母草中阿魏酸含量在0.004 2%~0.006 5%之间。结论：益母草与当归、川芎等含有阿魏酸的药材配伍且其用量较大时，益母草中阿魏酸含量会对其质量评价产生一定的影响。     

前列腺体积与穿刺活检阳性率和前列腺癌恶性程度的相关性

目的:分析我院确诊为前列腺癌患者的病例资料,探讨其中超声引导下经直肠前列腺穿刺活检病例的前列腺体积(PV)与穿刺阳性率和前列腺癌恶性程度的关系.方法:回顾性分析我院1998年至今诊断明确的前列腺癌共计419例,将其中346例行前列腺穿刺活检明确诊断的病例与同期430例行前列腺穿刺活检但未诊断前列腺癌的病例进行回顾性比较分析.结果:癌症组与非癌症组相比,高PSA病例较多(P＜0.05).两组中,前列腺体积大于60ml(16.8％ vs 36.3％)和PV小于40ml(29.5％ vs 15.3％)的病例比较,差异有统计学意义.经直肠指检或经直肠超声检查有阳性发现的病例比差异较明显(65.0％ vs21.4％).两组间PS-AD值的差异有统计学意义:4.830 7 ng/ml2(0.013 5～58.107 8 ng/ml2) vs0.503 5 ng/ml2(0.015 5 ～12.850 1 ng/ml2).癌症病人中PV大于60ml的病例与PV小于等于60ml的病例相比,不同Gleason评分的病例相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:前列腺体积与前列腺穿刺活检的阳性率呈负相关,也与前列腺癌恶性程度呈负相关.6针穿刺活检法存在一定局限性.     

HPLC-ELSD法测定盐酸金刚烷胺颗粒中盐酸金刚烷胺的含量

目的:建立HPLC-ELSD法测定盐酸金刚烷胺颗粒中盐酸金刚烷胺的含量。方法:采用C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.06%三氟乙酸溶液(20︰80),流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,进样量10μL;检测器为ELSD,漂移管温度55℃,雾化气体为空气,载气流速为2.0 L.min-1。结果:盐酸金刚烷胺的线性浓度范围为80.48～281.68μg.mL-1(r=0.9991);平均回收率(n=9)为100.3%(RSD=0.9%)。结论:本方法较标准方法简便、可靠、准确,适合盐酸金刚烷胺颗粒的质量控制。     

腹腔镜胆囊切除术治疗急性胆囊炎211例

目的 探讨腹腔镜胆囊切除术(LC)在急性胆囊炎患者中的治疗价值和手术体会.方法 分析211例急性胆囊炎患者行LC的临床资料,总结手术经验.结果 211例患者中192例顺利完成LC(91%),平均手术时间57 min(30～170 min),术后住院时间3～11 d,平均5 d.均无术后胆漏、肝外胆管损伤、膈下感染等并发...     

BSEP在高脂血症大鼠肝组织中表达的状况

目的:通过建立高脂血症大鼠模型,以胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)为研究对象,探讨BSEP在高脂血症大鼠肝脏中的表达状况,初步思考其与高脂血症形成的相关性,为治疗高脂血症找到新的方向.方法:取♂Wistar大鼠60只,体质量145 g±7.5 g,随机分为2组,每组30只:普通饮食对照组(简称对照组)予以普通饮食、高脂饮食实验组(简称实验组)予以高脂饮食.喂食90 d,建立高脂血症模型,定期取血用自动生化仪检测胆固醇及胆汁酸含量,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction,RTP C R)技术检测两组模型肝脏组织的Bsep基因表达的强度,石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型肝脏组织的BSEP表达的强度.结果:实验组胆固醇及胆汁酸含量明显高于对照组;电泳结果显示:实验中肝脏组织扩增产物都出现了内参β-actin基因的425 bp扩增带和Bsep基因的289 bp扩增带,实验组Bsep基因扩增带亮度强于对照组;免疫组织化学SP法结果显示,实验组Bsep表达阳性率为76.7%,对照组Bsep表达阳性率为12.5%,他们之间的差异有统计学意义(χ2=10.773,P<0.05).结论:实验组大鼠的Bsep基因的表达较对照组明显增加,提示我们可发展作用于Bsep的药物,为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗方法.     

FXR调控下Bsep在高脂血症大鼠胆固醇代谢中的作用机制

目的探讨在法尼基衍生物X受体(FXR)调控下胆盐输出泵(Bsep)在高脂血症大鼠胆汁酸及胆固醇代谢中的作用,为高脂血症的预防和治疗提供新的理论基础和治疗靶点。方法使用Wistar大鼠60只,随机分为2组,每组30只,实验组饲养高脂饮食,对照组饲养普通饮食。喂食3个月,定期测定大鼠体质量情况,并取血用自动生化仪检测与脂类相关生化指标,待成功建立高脂血症大鼠模型后,取实验组和对照组肝脏组织,石蜡包埋切片后用免疫组化SP法检测2组大鼠肝脏组织的FXR及Bsep表达强度。结果实验组大鼠各脂类相关生化指标含量高于对照组(P<0.05);免疫组化SP法结果显示,实验组与对照组FXR表达阳性率、Bsep表达阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论以FXR及Bsep为靶点可为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗依据和方向。     

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C早期诊断梗阻性黄疸患者肾功能损伤的临床研究

目的：探讨检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂（cystatin C,Cys C）对早期诊断梗阻性黄疸患者肾功能损害的意义。方法：测定84例梗阻性黄疸患者的24h肌酐清除率（24h CCr）,血清肌酐（SCr）以及血清Cys C水平,并以CCr〈80mL.min-1.1.73m-2作为肾功能损害诊断标准,采用χ2检验、相关性分析和ROC曲线分析Cys C的诊断价值。结果：84例患者中共31例出现CCr下降,其中Cys C水平有26例上升,而仅有18例SCr出现异常。Cys C对CCr的评估效能优于SCr（P〈0.05）,相关性分析提示在梗阻性黄疸患者中,Cys C与SCr和CCr均有显著负相关性（CysC：r=-0.801,P〈0.001;SCr：r=-0.594,P〈0.001）。ROC曲线分析显示Cys C的曲线下面积（AUC）值明显高于SCr（0.841比0.622）。结论：Cys C较SCr能更为准确和迅速地反映梗阻性黄疸患者的肾功能损害;常规监测该类患者的Cys C水平,对有效防治梗阻性黄疸导致的急性肾功能衰竭具有积极意义。