GPI-PLD 通过下调PI3K-Akt 信号通路活性抑制肝癌细胞的生长

目的：明确糖基化磷脂酰肌醇特异性磷酯酶D (glycosylphosphatidylinositol-specific phospholipase D,GPIPLD) 对肝癌细胞HepG2 的影响以及可能的调控分子机制。方法：通过转染构建高表达GPI-PLD 模型,利用MTT、 荧光染色以及Western 印迹检测高表达GPI-PLD 对肝癌细胞的影响,同时接种于裸鼠模型中,进一步明确GPI-PLD 在体内对肝癌细胞的影响。结果：与空白组和对照组相比,GPI-PLD 组PI3K-Akt 信号通路活性明显受到抑制,肝癌 细胞增殖活性明显受到抑制并呈现典型的凋亡形态。肝癌裸鼠模型结果显示GPI-PLD 组肿瘤的生长速度、肿瘤质量 [(1.87±0.09) g] 小于空白组[(2.20±0.17) g] 和对照组[(2.15±0.09) g],GPI-PLD 组AST,ALT,AFP 血清浓度显著低于空 白组和对照组(P<0.05)。结论：GPI-PLD 可通过下调PI3K-Akt 信号通路活性,抑制肝癌细胞的增殖及体内生长,促 进肝癌细胞的凋亡。     

糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白质与肿瘤

已经发现有50多种GPI锚定蛋白质与肿瘤关系密切。其中，GPI锚定的癌胚抗原、前列腺特异性抗原、胎盘型碱性磷酸酶等已经作为肿瘤标志物；GPI锚定的CD46，CD55和CD59等参与肿瘤免疫逃逸；GPI锚定的基质金属蛋白酶、T-钙黏着蛋白、CD87等参与肿瘤的侵袭和转移；GPI锚定的CD14，CD16，CD24，CD48和GDNFR—α等能以脂筏的形式介导肿瘤细胞的信息传递。一些细胞因子如IL-2，IL-12等被改造成GPI锚定蛋白质，已试用于肿瘤治疗。     

GPI-PLD过表达对肝癌细胞株HepG2生物学特征的影响

目的:研究GPI-PLD基因转染并过度表达对HepG2细胞的影响.方法:用脂质体转染法将本室已经构建的GPI-PLD真核表达载体pcDNA3.1( )/GPI-PLD转入HepG2细胞,以未转染的HepG2细胞及转染空载体pcDNA3.1( )的细胞为对照,G418筛选出阳性细胞克隆.用自制具完整GPI结构的胎盘碱性磷酸酶为底物,定量检测GPI-PLD活性,RT-PCR法确定GPI-PLD mRNA表达水平.细胞计数绘制生长曲线,荧光染色观察HepG2细胞形态学改变,流式细胞术检测凋亡,台盼蓝排斥法观察补体介导的细胞毒(CDC)杀伤率,ELISA检测癌胚抗原(CEA)的表达情况.结果:阳性细胞克隆GPI-PLD酶活性水平比对照组升高约2倍,GPI-PLD mRNA表达水平约增加5倍;GPI-PLD基因过度表达可促进GPI锚定的蛋白质如CEA和PLAP等被大量水解释放入培养基,导致细胞增殖能力减弱,对补体杀伤的敏感性增强,细胞呈现典型的凋亡形态特征,流式细胞术检测到凋亡峰,细胞凋亡率明显增加.结论:成功将GPI-PLD基因转染入HepG2细胞,并在细胞中稳定表达.GPI-PLD过表达能抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞的凋亡,增强肿瘤细胞对补体杀伤的敏感性.     

EB病毒多抗体联合检测在儿童EB病毒感染诊断中的应用研究

目的探索EB病毒(Epstain-Barr Virus,EBV)多抗体联合检测在儿童EBV感染诊断的应用价值。方法采用Liaison化学发光分析仪定量检测2016年8月-2017年2月疑似EBV感染的4251例患儿血清中EBV(VCA-IgM、VCA-IgG、EA-IgG和NA-IgG)抗体,结合临床症状分析患儿EBV感染阶段,用PCR荧光探针法检测EBV-DNA含量。结果患儿EBV阳性1799例,阳性检出率为42.3%,其中抗体VCA-IgG阳性1769例(41.6%)、NA-IgG阳性1719例(40.4%)、VCA-IgM阳性329例(7.7%)及EA-IgG阳性136例(3.2%);四种抗体联合检测结果显示,无感染、既往感染、复发感染和原发感染比例分别为57.6%、30.7%、9.8%和1.9%;80例原发感染患儿的主要疾病为传染性单核细胞增多症(38.8%)、支气管炎及肺炎(27.5%);VCA-IgM抗体检测与EBV-DNA检测阳性率差异无统计学意义。结论通过EA-IgG、VCA-IgG、NA-IgG和VCA-IgM四种抗体联合检测,结合患儿的临床表现,可为感染EB病毒患儿早发现、早诊断、早治疗提供依据,值得推广应用。     

联合监测白细胞与C反应蛋白对急性冠状动脉综合征预后判断的意义

目的探讨联合检测白细胞和C反应蛋白对急性冠状动脉综合征（ACS）预后的判断价值。方法检测并比较152例急性冠状动脉综合征患者（ACS组）与120名健康成人（健康对照组）的白细胞计数、中性粒细胞/淋巴细胞比率和C反应蛋白水平,并随访记录所有急性冠状动脉综合征患者6个月内再次有心脏性猝死、再发性梗死、梗死后或新发生心绞痛等心血管事件发生情况,分别以白细胞计数、中性粒细胞/淋巴细胞比率和C反应蛋白水平分组,比较各组急性冠状动脉患者心血管事件再次发生率的差异。结果 ACS组患者白细胞计数、中性粒细胞/淋巴细胞比率和C反应蛋白水平显著高于健康对照组（P〈0.05）。随访结果表明C反应蛋白、白细胞计数及中性粒细胞/淋巴细胞比率升高组的ACS患者心血管事件再发生率分别为47%、54%和49%,显著高于C反应蛋白、白细胞计数及中性粒细胞/淋巴细胞比率正常的各组ACS患者（16%、8%和15%）（P〈0.05）。C反应蛋白和白细胞计数或与中性粒细胞/淋巴细胞比率两者均升高的ACS患者再次发生心血管事件阳性预测值（69%）或三者均升高的阳性预测值（76%）明显高于各项仅单项升高者（P〈0.01）。结论联合检测白细胞和C反应蛋白有助于ACS患者预后的判断。     

血小板参数对川崎病诊断的临床意义

目的探讨小儿川崎病发病第1周、第2~3周血小板参数的变化和临床意义。方法对78例川崎病患儿(病例组)及78例同期体检健康儿童(对照组)取静脉全血用ADVIA2120全自动血液细胞分析仪测定血小板数(PLT)、血小板压积(PCT)、血小板平均体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)。对疾病组和对照组血小板参数分别进行比较,并对血小板各参数进行相关性分析。结果川崎病患儿发病第1周PLT、PCT明显高于对照组(P0.05),PDW低于对照组(P0.05),MPV与对照组比较差异无统计学意义;川崎病患儿发病第2~3周PLT、PCT明显高于对照组(P0.05),MPV、PDW均低于对照组(P0.05);川崎病发病第2~3周PLT、PCT高于川崎病发病第1周,川崎病发病第2~3周MPV、PDW低于川崎病发病第1周。川崎病患儿PLT与MPV、PDW呈负相关(r=-0.391;r=-0.362);PLT与PCT呈正相关(r=0.969);PCT与PDW呈负相关(r=-0.356);MPV与PCT、PDW无相关性(r=-0.207;r=0.226)。结论血小板参数变化对川崎病诊断有非常重要意义,并可作为判断患儿病情及指导临床治疗用药的指标。     

IgA和IgG型抗中性粒细胞胞质抗体联合检测诊断韦格纳肉芽肿的价值

【目的】探讨IgA和IgG型抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）联合检测在韦格纳肉芽肿（WG）临床诊断中的应用价值。【方法】对28例临床诊断为wG及172例其他自身免疫性疾病患者血清,应用间接免疫荧光法检测ANCAIgA和IgG型抗体。【结果】wG病患者胞质型ANCA（cANCA）IgG型抗体和cANCAIgA型抗体阳性率最高,均显著高于其他自身免疫性疾病,且差异有显著性（P〈0．05）。联合检测ANCAIgG及IgA亚型抗体阳性率为89．3％（25／28）,明显高于单独检测ANCAIgG或IgA亚型阳性率53．6％（15／28）和35．7％（10／28）,且差异有显著性（P〈0．05）。【结论lIgA和IgG型抗中性粒细胞胞浆抗体联合检测有助于wG的早期准确诊断。     

纳米银对多重耐药菌的抑菌效果研究

目的 探讨纳米银对多重耐药菌的抑菌效果。方法 制备金黄色葡萄球菌的标准菌株和耐甲氧西林菌株,大肠埃希菌的标准菌株和产ESBLs菌株悬液并与终浓度80、100、120、140 mg/L四个浓度纳米银溶液混合处理,分别于处理前和处理后10、20、30、40 min取混合菌液培养,计数菌悬液菌落数,分析纳米银不同浓度,不同处理时间对四种菌株的抑菌率。比较纳米银溶液对不同种细菌之间,同种耐药菌株和标准菌株之间的抑菌率差别,分析纳米银的抑菌效果。结果 纳米银溶液浓度120 mg/L时,作用30 min就能完全抑制0.5麦氏浊度的所有大肠埃希菌标准菌株和产ESBLs菌株,而完全抑制0.5麦氏浊度的金黄色葡萄球菌标准菌株和耐甲氧西林菌株需要纳米银溶液浓度120 mg/L作用40 min或140 mg/L作用30 min。120 mg/L浓度纳米银处理20 min对大肠埃希菌标准株的抑菌率为(72.42±5.50)%,高于对金黄色葡萄球菌标准株的抑菌率(55.67±7.62)%,差异有统计学意义(t=5.64, P=0.000)。纳米银对产ESBLs大肠埃希菌菌株的抑菌率为(71.51±5.56)%,高于对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的抑菌率(53.78±5.90)%,差异有统计学意义(t=6.91, P=0.000))。纳米银抑菌率在大肠埃希菌标准菌株和产ESBLs菌株之间,金黄色葡萄球菌标准菌株和耐甲氧西林菌株之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 纳米银对革兰氏阴性杆菌的抑菌能力高于革兰氏阳性球菌,而对同种菌的耐药和敏感菌株的抑菌能力无明显性差异。     

血清生化指标在胆源性重症急性胰腺炎诊治中的临床价值

目的探讨总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)各血清生化指标在胆源性急性胰腺炎鉴别诊断及严重程度评估中的临床价值。方法共筛选急性胰腺炎患者583例,根据其疾病严重程度分为急性胰腺炎组(406例)和重症急性胰腺组(177例),同时将重症急性胰腺炎患者根据其病因分为胆源性急性胰腺炎组(71例)和非胆源性急性胰腺炎组(106例),回顾性统计分析所有患者入院24 h内TBIL、DBIL、ALT、ALP、TBA、GGT等血清生化指标在急性胰腺炎严重程度及病因判断中的临床价值。结果重症急性胰腺组TBIL、DBIL、ALT、ALP、TBA、GGT血清水平显著高于急性胰腺炎组(P0.01),上述指标ROC曲线下面积(AUC)分别为0.688、0.677、0.577、0.628、0.618、0.633;胆源性重症胰腺炎组TBIL、DBIL、ALT、ALP、TBA、GGT血清水平显著高于非胆源性重症胰腺炎组(P0.01),上述指标ROC曲线下面积(AUC)分别为0.786、0.765、0.695、0.805、0.786、0.816。结论血清TBIL、DBIL、ALT、ALP、TBA、GGT有助于胆源性急性胰腺炎的鉴别诊断及严重程度的早期评估。