骨髓干细胞体外组织工程软骨形成的实验研究

[目的] 探讨骨髓干细胞(BMSCs)在体外不同载体中软骨形成的能力和可行性.[方法] 分离培养猪BMSCs,将第3代BMSCs以载体内多点注射和表面点滴法植于A组:Ⅱ型纤维胶原蛋白海绵(fibrin collagen sponge),B组:生物蛋白海绵(fibrin collagen sponge and bFGF);C组:明胶海绵(gelatin sponge)3种载体上,于4周取材进行组织学分析.[结果] 纤维胶原蛋白海绵和生物蛋白海绵组均有软骨细胞形成,明胶海绵无细胞生长.利用SPSS 10.0软件统计学处理,显示B组软骨细胞阳性数量(92.75±10.57)多于A组(36.45±8.34),有统计学差异(P<0.01),两组都明显多于C组(0),有统计学差异(P<0.01).[结论] MSCs经分离扩增后种植于三维立体结构的纤维蛋白海绵载体上,在含有TGF-β1培养液中形成软骨;在TGF-β1和FGF的双重因子培养中,其软骨的形成能力明显增加.     

梗阻性黄疸引起肾脏病理学及超微病理学改变的实验与临床研究

作者对梗阻性黄疸（梗黄）大鼠及６例临床梗黄病人的肾脏组织进行了光镜和电镜观察。目的是描述肾脏损害的病理和超微病理改变，并试图从病理改变来探讨肾脏损害的可能病因及肾脏功能的改变。观察发现主要病变为肾小球萎缩，鲍曼氏囊间隙扩大，肾小球毛细血管基膜明显增厚，其三层结构消失，内有大量胆色素颗粒沉积，血管内皮窗孔明显减少，足突融合；近曲小管上皮细胞变性、坏死，胞质内有大量胆色素颗粒沉积，小管腔内可见脱落的坏死细胞、胆泥、胆栓及蛋白管型，微绒毛紊乱、稀疏、脱落，线粒体高度水肿，内质网扩张，脂滴、溶酶体明显增多。据此，我们认为：（１）梗黄可引起明显肾脏损害，其病变同时累及肾小球和肾小管，但以近曲小管病变为重；（２）胆汁成分于肾脏内的沉积在梗黄引起肾脏损害的发病中起一定作用；（３）梗黄可导致肾脏功能改变。     

氟砷联合染毒对大鼠子代大脑氧化性损伤的研究

目的 揭示氟砷共存时对子代健康的影响。方法 采用两代一窝繁殖实验的方法,测定Ｗｉｓｔａｒ大鼠暴露于氟砷后其子代大脑中氟砷蓄积情况、脂质过氧化水平。结果 随着暴露剂量的增加,大脑氟砷含量显著增加,ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性随之降低,而ＬＰＯ含量却逐渐增加,同代不同剂量组间比较,差异均有非常显著意义（Ｐ〈０．０１）,并出出明显的病理性变化;停止氟砷暴露８周后,大脑氟砷含量显著降低,酶的生有所恢复,而ＬＰ     

以3种材料为载体体外构建组织工程软骨

背景：纤维胶原蛋白被公认是非常理想的载体,但其胶性易流动,降解较快,且通透性有待置疑。而海绵状胶原蛋白多微孔,三维立体结构,吸附性好,临时基质与细胞基质相近（Ⅱ型胶原）,作者所查文献中作为骨髓间充质干细胞载体用于软骨形成的报道较少。 目的：对比观察骨髓间充质干细胞在纤维蛋白海绵、生物蛋白海绵、明胶海绵载体中软骨形成的能力和可行性。 设计、时间及地点：体外对比观察实验,于2004-12/2008-08在海南省人民医院中心实验室完成。 材料：纤维胶原蛋白海绵由美国Sigma 公司提供,生物蛋白海绵 (主要成分为Ⅱ型胶原,并吸附定量的碱性成纤维细胞生长因子)由辽宁绿谷制药有限公司提供,明胶海绵由南京金陵制药有限公司提供。 方法：抽取猪髂骨骨髓血,用密度梯度离心法分离出有核细胞,在含转化生长因子β1的DMEM培养液中扩增骨髓间充质干细胞,将第3代骨髓间充质干细胞以载体内多点注射和表面点滴法植于Ⅱ型纤维胶原蛋白海绵、生物蛋白海绵及明胶海绵3种载体上,继续以含有转化生长因子β1的DMEM培养液体外培养。 主要观察指标：观察细胞的生长情况,于4周取材进行大体组织观察,组织学分析及超微结构观察。 结果：骨髓间充质干细胞在体外分离后可在转化生长因子β1培养液下扩增。纤维胶原蛋白海绵组可见少量的软骨基质与细胞;生物蛋白海绵组可见较多的基质与软骨细胞,细胞生长活跃,明胶海绵组可见少量散在的胶原基质,但无细胞生长。生物蛋白海绵组软骨细胞阳性数量多于纤维胶原蛋白海绵组(P < 0.01),两组都明显多于明胶海绵组（P < 0.01）。 结论：骨髓间充质干细胞在生物蛋白海绵载体中软骨形成能力最强,纤维蛋白海绵次之,而明胶海绵与细胞生长不同步,软骨形成能力最差。     

氟砷染毒对大鼠子代肝脏氧化性损伤的研究

「目的」揭示氟、砷共存时对工健康的研究。「方法」采用两代一窝繁殖实验的方法，测定Ｗｉｓｔａｒ大鼠暴露于氟、砷后其子代肝脏中氟、砷的蓄积水平、脂质过化水平和抗氧化能力以及病理组织学检查。「结果」随着暴露剂量的增加肝脏中氟、砷含量显著增加，ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐx活性随之降低，而ＬＰＯ含量地逐渐增加。肝脏的超微结构的出现病理变 化。停止氟、砷暴露８击后，肝脏中氟、砷含量显著降低，酶的生有所恢复，ＬＰＯ含量明     

以3种材料为载体体外构建组织工程软骨

背景:纤维胶原蛋白被公认是菲常理想的载体,但其胶性易流动,降解较快,且通透性有待置疑.而海绵状胶原蛋白多微孔,三维立体结构,吸附性好,临时基质与细胞基质相近(Ⅱ型胶原),作者所查文献中作为骨髓间充质干细胞载体用于软骨形成的报道较少.目的:对比观察骨髓间充质干细胞在纤维蛋白海绵、生物蛋白海绵、明胶海绵载体中软骨形成的能力和可行性.设计、时间及地点:体外对比观察实验,于2004 12/2008-08在海南省人民医院中心实验室完成.材料:纤维胶原蛋自海绵由美国Sigma公司提供,生物蛋白海绵(主要成分为Ⅱ型胶原,并吸附定量的碱性成纤维细胞生长因子)由辽宁绿谷制药有限公司提供,明胶海绵由南京金陵制约有限公司提供.方法:抽取猪髂骨骨髓血,用密度梯度离心法分离出有核细胞,在含转化生长因子β 1的DMEM培养液中扩增骨髓间充质干细胞,将第3代骨髓间充质干细胞以载体内多点注射和表面点滴法植于Ⅱ型纤维胶原蛋白海绵、生物蛋白海绵及明胶海绵3种载体上,继续以含有转化生长凶子β 1的DMEM培养液体外培养.主要观察指标:观察细胞的生长情况,于4周取材进行大体组织观察,组织学分析及超微结构观察.结果:骨髓间充质干细胞存体外分离后可在转化生长因子β 1培养液下扩增.纤维胶原蛋白海绵组可见少量的软骨基质与细胞:生物蛋白海绵组可见较多的基质与软骨细胞,细胞生长活跃,明胶海绵组可见少量散在的胶原基质,但无细胞生长.生物蛋白海绵组软骨细胞阳性数量多于纤维胶原蛋白海绵组(P<0.01),两组都明显多于明胶海绵组(P<0.01).结论:骨髓间充质干细胞在生物蛋白海绵载体中软骨形成能力最强,纤维蛋白海绵次之,而明胶海绵与细胞生长不同步,软骨形成能力最差.     

电子显微镜在肿瘤诊断中的应用

通过国内外相关文献的复习,分析探讨电子显微镜在肿瘤尤其是恶性肿瘤诊断中的优势和意义。结果显示电镜能够提供光镜所不能得到的组织和细胞信息;发现肿瘤细胞的分化差异;判断肿瘤的起源,因此有助于肿瘤的研究和诊断。     

氧合温血停搏液对心肌保护的临床与基础研究

目的：观察氧合温血停搏液对心脏直视手术缺血期间的心肌保护作用。方法：选取30例病人,分为3组,对照组、氧合温血组、氧合温血加1,6二磷酸果糖组（简称FDP组）各10例。观察3组术前、术后12h、术后24h心肌酶谱的动态变化;心脏停跳后10min、30min及升主动脉开放前3个时相的心肌超微结构的改变;术毕心脏自动复跳率的变化。结果：对照组心脏均经室颤停跳,其余两组均不经室颤且心脏自动复苏率明显高于对照组。心肌酶谱变趋势显示对照组释放峰值高于氧合温血组及FDP组,下降也低于其余两组。电镜观察显示氧合温血组及FDP组保存了较好的心肌超微结构。结论：氧合温血及FDP具有心肌保护作用。     

氟砷染毒大鼠其子代脾脏氧化性损伤的研究

目的：揭示氟砷共存时对子代健康影响。方法：采用两代一窝繁殖实验 的方法,测定Wistar大鼠暴露于氟砷后其子代脾脏中氟砷的蓄积水平、脂质过氧化水平和抗氧化能力,以及病理组织学检查。结果：随着暴露剂量的增加脾脏中氟、砷含量显著增加,SOD和GSH－Px活性随之降低, 而LPO含量却逐渐增加;停止氟砷暴露8周后,脾脏中氟砷含量显著降低,酶的活性有所恢复,而LPO含量明显减少。结论：氟砷联合染毒可导致大鼠子代脾脏的氧化性损伤。     

砷在体外对人T淋巴细胞和Jurkat T细胞系的生长抑制作用

目的:通过三氧化二砷在体外对人 T淋巴细胞生长的影响 ,探讨三氧化二砷的免疫毒性和免疫抑制作用的机制。 方法 :应用正常人外周血 T细胞和人 Jurkat T细胞作为体外实验模型 ,观察不同浓度 (0 .5～ 10 0μM)三氧化二砷对正常人淋巴细胞和人 Jurkat T细胞的生长影响 ,并用电镜观察三氧化二砷对人 Jurkat T细胞的形态学改变。结果 :体外实验结果显示 ,三氧化二砷在 0 .5～ 10 0 μM浓度范围对正常人 T细胞和人 Jurkat T细胞的生长有明显的抑制作用 ,并随着三氧化二砷的浓度增高而抑制作用增强 ,呈现为剂量 -反应关系。三氧化二砷对正常人 T淋巴细胞和人 Jurkat T细胞的 IC50 分别为 8.0 5 μM和 8.9μM。电镜观察结果提示 ,三氧化二砷 (5 μM,2 4 h)处理 Jurkat T细胞 ,导致较多细胞出现细胞体积缩小 ,细胞核内染色质浓集于核膜内面成团块状 ,或染色体断裂成碎块状 ,或胞核固缩边缘化等典型的凋亡细胞特征性形态改变。存活的部分细胞线粒体增生 ,提示细胞功能活跃。同时 ,见到许多细胞浆内有空泡形成。结论 :三氧化二砷在体外能明显地抑制人 T淋巴细胞生长 ,这种生长抑制作用的机制之一是诱导细胞凋亡 ,可能也是砷的免疫毒性和免疫抑制作用的机制之一