制何首乌的炮制方法探索

目的:考察黑豆汁炖制时间对制何首乌外观性状及各类有效成分含量变化规律的影响。方法:采用HPLC同时测定不同炮制时间制何首乌样品中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷的含量,选择Agilent ZORBAX Extend-C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),甲醇(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0～30 min,5%～100%A; 30～40 min,100%A),流速1. 0 mL·min~(-1),柱温35℃,检测波长280 nm。结果:随炖制时间的增加,二苯乙烯苷含量逐渐降低,与8 h时相比,至64 h时含量降低76%;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷2种蒽醌苷含量先上升后下降,至24 h时达最高值,炖制40 h时降至与8 h近似的水平,之后略有波动;大黄素、大黄素甲醚2种蒽醌苷元含量先上升后下降,炖制32 h时达最大值,之后缓慢降低并趋于稳定。结论:炖制时间对制何首乌中各类成分含量的影响显著,且变化趋势不尽相同,应规范制何首乌饮片的炮制时间;同时,仅以二苯乙烯苷及蒽醌类成分作为制何首乌的指标性成分依据不够充分,应考虑增加多糖类等质量控制指标。     

维生素D和钙剂治疗营养性佝偻病疗效的Meta分析

目的：采用Meta分析对联合补充钙剂、维生素D与单用维生素D或钙剂治疗佝偻病疗效进行定量评价。方法检索Cochrance Library、Pubmed、Web of science、Scirus、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库和万方数据库,检索时间均从建库至2013年3月。获得维生素D和钙剂治疗营养性佝偻病相关的RCT文献。选取血清25-( OH)维生素-D3、磷、ALP作为主要测量指标,选取钙、甲状旁腺素、白蛋白、影像评分作为次要测量指标。采用Review Manage 5．0．2对纳入的RCT文献进行Meta分析。结果共检索到437篇文献,对符合纳入标准的3篇文献(n=218)进入Meta分析。 Meta分析结果显示：(1)血清25-(OH)维生素 D3上升程度：联合治疗组与维生素 D 组 MD =-7．88(95%CI：-12．24~-3．52);联合治疗组与钙剂组MD=-18．32(95%CI：-22．61~-14．04);(2)血清磷上升程度：联合治疗组与维生素D组MD=-0．64(95%CI：-0．86~-0．42);联合治疗组与钙剂组MD=-0．16(95%CI：-0．84~0．51);(3)血清 ALP 下降程度：联合治疗组与维生素 D 组 MD =109．99(95%CI：20．40~199．58);联合治疗组与钙剂组MD=59．89(95%CI：10．09~109．59)。(4)血清钙上升程度：联合治疗组与维生素D组MD=-0．71(95%CI：-0．91~-0．52);影像学评分下降程度：联合治疗组与维生素D组MD=0．68(95%CI：0．42~0．95)。以上指标除联合治疗组与钙剂组对血清磷的上升程度差异无统计学意义外,其余差异均具有统计学意义。结论维生素D联合钙剂长期联合治疗佝偻病的疗效要优于单用维生素D或钙剂。     

以脾虚模型小鼠胃肠激素含量为依据优化枳术颗粒提取工艺

目的探索枳术颗粒分离部位及其组合对脾虚模型小鼠胃肠激素含量的影响,优化枳术颗粒的提取工艺。方法用优化的工艺制备枳术颗粒的不同分离部位。72只小鼠随机分为对照组、脾虚模型组、多潘立酮组、枳实总黄酮组、枳实总生物碱组、枳实组、枳实白术组、枳术方组和枳术颗粒组。大黄水浸煎液灌胃制作小鼠脾虚模型,建模的同时给药,对照组则给予等量0.5%羧甲基纤维素钠溶液。酶联免疫法检测各组小鼠血清胃泌素(gastrin,GAS)、十二指肠胃动素(motilin,MTL)和胃窦组织中血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)水平的变化。结果与对照组比较,模型组小鼠血清GAS、十二指肠组织MTL含量降低,胃窦组织VIP含量升高。枳术颗粒不同分离部位均能不同程度调节脾虚小鼠胃肠激素水平,各部位合用与枳术颗粒效果相当。结论枳术颗粒分离部位合用能有效调节脾虚小鼠胃肠激素水平,优化后的工艺可行。     

抗艾滋病新药BIKTARVY的药理作用及临床评价

BIKTARVY是由比替拉韦、恩曲他滨和富马酸丙酚替诺福韦3种成分组成的口服复合制剂。该药被视为是治疗Ⅰ型艾滋病病毒(HIV-1)感染的完整方案,被批准用于治疗未经治疗或取得完全病毒学抑制3个月以上、没有耐药史、没有治疗失败史的HIV-1感染者。现对本药的药理作用、药动学、临床及安全性评价和药物相互作用等做一综述。     

脑出血100例围术期护理措施探析

为了探讨脑出血患者围术期护理措施,现对100例脑出血患者的临床资料、围术期护理过程与护理措施进行回顾性分析与总结,提出优化护理方案。通过分析表明,对脑出血患者围术期进行系统、整体护理,可以有效改善患者的病情,提高康复效果,值得在临床中推广应用。     

复发性自然流产患者宫颈分泌物中生殖支原体与解脲脲原体的检测及临床意义

目的：观察复发性自然流产患者宫颈分泌物中生殖支原体（Mg）和解脲脲原体(Uu)的检出情况，从而分析其在复发性自然流产（RSA）中的作用。方法回顾性分析48例自然流产患者的宫颈分泌物标本，采用PCR检测宫颈分泌物中Mg和Uu情况，并纳入同期50例自愿人工流产者的临床标本作为对照。结果48例RSA患者中Mg和Uu DNA检出率分别为18.8%（9例）和29.2%（14例），其中Mg合并Uu感染者6例，构成比为12.5%。对照组其Mg检出率为4%（2例），Uu检出率为22%（11例），Mg合并Uu感染1例，感染率2%。2组Mg阳性率比较差异有统计学意义（χ2=5.347，P<0.05），而Uu检出率差异无统计学意义（χ2=0.6619，P>0.05）。结论 Mg感染和RSA密切相关，而单纯Uu感染可能并不是导致RSA发生的因素。     

河南安阳地区p53基因第72密码子多态性与HPV相关食管癌的研究

目的探讨河南安阳地区p53基因第72密码子多态性与人乳头瘤病毒(HPV)相关食管癌的关系.方法收集安阳肿瘤医院食管癌病例110例,用PCR方法检测HPV,PCR-RFLP方法分析p53基因第72密码子多态性,病例对比研究方法分析在食管癌病例中HPV感染与p53基因第72密码子多态性的关系.结果 PCR检测结果表明,河南安阳地区食管癌组织中HPV检出率为59.1%;HPV阳性者中,Arg/Arg基因型的频率是60.0%,HPV阴性者中仅为17.8%,两者有统计学显著性(P＜0.05).结论 p53基因第72密码子多态性可能是安阳地区HPV相关食管癌的易感因素之一,携带p53Arg/Arg基因型的个体更容易发生HPV相关的食管癌.     

生殖支原体脂质相关膜蛋白诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2

目的观察生殖支原体脂质相关膜蛋白(LAMP)能否诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2(hBD-2),并探讨其可能的调控机制。方法体外培养End1/E6E7人宫颈上皮细胞,用不同浓度的LAMP作用细胞48 h,反转录PCR检测hBD-2 mRNA的表达,Western blot法检测hBD-2蛋白的表达;用Toll样受体2(TLR2)和TLR6中和抗体孵育End1/E6E7细胞,并用TLR2、TLR6和MyD88负显性突变体转染细胞,以明确TLR2、TLR6和MyD88在介导hBD-2表达中的作用;Western blot法检测核因子κB(NF-κB)p65亚基核转位情况,电泳迁移率实验(EMSA)分析LAMP处理前后NF-κB的DNA结合活性;采用NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)处理,观察对hBD-2表达的影响。结果生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2mRNA和蛋白。TLR2和TLR6中和抗体以及其负显性突变体转染后,能降低hBD-2表达;MyD88负显性突变体也能显著抑制LAMP诱导的hBD-2表达。Western blot结果显示,LAMP处理后可诱导p65核转位,并能增强NF-κB的DNA结合活性。而NF-κB抑制剂PDTC处理后,hBD-2表达降低。结论生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2,可能受TLR2、TLR6/MyD88/NF-κB调控。     

霍乱弧菌毒素协同调节菌毛基因tcpA的克隆及序列分析

目的 以新疆分离0139霍乱弧菌XJ93006株的DNA为模板,自行设计引物克隆毒素协同调节菌毛亚单位A(tcpA)基因(包括侧序列)并构建重组载体.方法以0139霍乱弧菌新疆分离株XJ93006基因组DNA作为模板;根据Ol群E1Tor型霍乱弧菌N16961全基因组序列设计tcpA PCR引物,高保真酶扩增tcpA片段:限制性内切酶切PCR产物和pNEBl93空质粒,T4DNA连接酶连接酶切产物,重组质粒转化大肠杆菌TB1工程菌,蓝白斑菌落试验筛选阳性克隆;提取质粒经酶切鉴定后测序并利用生物信息数据库对该序列进行序列分析,比较.结果DNA限制性内切酶可从重组质粒pNEBl93-tcpA的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间切出一个1037bp的DNA片段,测序结果与O1群E1Tor型霍乱弧菌N16961、O139霍乱弧菌标准株M045的tcpA同源性均达到99.9%以上.结论成功构建O139霍乱弧菌新疆分离株XJ93006毒素协同调节菌毛亚单位A(tcpA)基因的重组质粒pNEBl93-tcpA;序列分析表明霍乱弧菌毒素协同调节菌毛亚单位A(tcpA)基因在O1群EITor型霍乱弧菌和O139霍乱弧菌中是一类高度保守的原核基因,可作为霍乱弧菌疫苗的候选基因.另外为研究O139霍乱弧菌的来源奠定基础.