人胃癌细胞系的建立及其评价

目的 利用已建立的胃癌人源化异种移植瘤(Patient-derived xenograft,PDX)模型建立胃癌细胞系,并对建立的胃癌细胞系进行生物学特性评价.方法 选择12例生长状态良好的胃癌PDX模型,待小鼠移植瘤体积生长至500～900mm3时,取出肿瘤组织进行癌细胞的原代培养建立细胞系,通过细胞形态学观察、染色体分析、短片段重复序列(STR)分析、免疫组织化学染色、体外药敏及体内成瘤实验对其生物学特性进行分析鉴定,并在此基础上利用建立成功的胃癌细胞系进行化疗药物药效学评价.结果 12例PDX模型中共成功建立6例胃癌细胞系,细胞系可稳定多次传代.选择其中2例胃癌细胞系(GAXC031和GAXC066)进行生物学特性鉴定.遗传学结果证实,这2例细胞系来自亲本PDX模型,符合恶性胃癌的遗传学特征,在裸小鼠体内具有致瘤性.由细胞系建立的移植瘤模型在保留主要临床生物学特征的前提下,具有成瘤率高,潜伏期短,生长均一性好等特点.体外和体内药敏实验结果均表明,GAXC031对5-氟尿嘧啶有一定的敏感性[体外半抑制浓度(IC50)为0.265μmol/L,体内肿瘤生长抑制率(TGI)为30％～50％],而GAXC066不敏感(体外IC50为＞200 μmol/L,体内TGI＜0);2例细胞系对顺铂的敏感性均较强(TGI＞60％).结论 成功建立了6例人源胃癌细胞系.对GAXC031和GAXC066细胞系全面的分析和鉴定显示,细胞系与亲本PDX模型高度相关.细胞系体内外药敏实验结果显示,对同一个化疗药物,其体内与体外数据间存在很高的一致性.这些细胞系及相关模型可用于抗癌药物的研发和肿瘤基础研究.     

灵芝总三萜与紫杉醇或与顺铂在对人源肿瘤细胞的细胞毒性中的相互作用

目的:灵芝三萜类化合物是常被用于辅助性肿瘤治疗的灵芝中具有细胞毒性作用的主要成分.本研究考察灵芝总三萜和化疗药物之间的相互作用.方法:应用了两种肿瘤细胞株即人宫颈瘤HeLa细胞株和人非小细胞肺癌A549细胞株.检测了将灵芝总三萜与紫杉醇或顺铂合用时对细胞的毒性作用,并用Chou and Talalay合用指数法判断合用的相互作用类型.结果:灵芝总三萜和紫杉醇的合用在HeLa细胞中表现为协同作用而在A549细胞中表现为加合作用.灵芝总三萜与顺铂的合用效果则依赖于该两种药物的作用强度,即当其中一种药物的作用强于另外一种时表现为拮抗作用,而当两种药物的作用相似时表现为协同作用.结论:灵芝总三萜可以促进某些化疗药物的作用.     

女贞子多糖对黑色素瘤细胞黏附能力的影响

目的探讨女贞子多糖对黑色素瘤细胞B16BL6黏附能力的影响。方法观察女贞子多糖对黑色素瘤细胞黏附力的抑制作用,分别将琼脂糖和Matrigel铺于细胞板中,用女贞子多糖作用后,MTT法观察女贞子多糖对B16BL6黏附能力的影响;同时观察了女贞子多糖对黏附分子E-cadherin表达的影响。结果女贞子多糖抑制了黑色素瘤细胞的粘附能力,抑制黑色素瘤粘附分子E-cadherin的表达。结论女贞子多糖具有抑制黑色素肿瘤细胞的黏附,破坏了肿瘤细胞的整体性,利于女贞子多糖的抗肿瘤作用。     

人源性食管癌移植瘤模型的建立、评价及其应用的初步研究

目的用,晦床新鲜肿瘤组织移植于免疫缺陷小鼠以建立人源性食管癌移植瘤模型并初步评估其应用性。方法将36例食管癌手术切除组织分别移植于SCID小鼠皮下,待移植瘤长成后对其进行裸鼠间连续传代。当每例模型的移植瘤体积生长至500-1000mm3时,收集肿瘤组织作4种处理,一部分继续用于鼠间传代,一部分组织冻存于液氮中用于将来肿瘤组织复苏模型重建,一部分组织作速冻处理用于DNA／RNA提取,一部分组织固定于福尔马林溶液中作石蜡包埋和HE染色用于病理学研究。选用其中4例模型ESX00l、Esx002、ESX003和ESX004进行体外药敏实验和体内药效实验以评价4例人源性食管癌移植瘤对常用抗肿瘤药物的敏感性。结果36例食管癌手术切除组织接种和传代,成功23例,成功率为63．89％。异种移植瘤生长稳定并能连续传代,各代移植瘤组织形态学特征与患者肿瘤组织一致。23例液氮保存的人源食管癌移植瘤组织复苏后移植于SCID小鼠皮下,21例成功生长肿瘤,复苏成功率为91．30％。体外药敏实验表明4例人食管癌模型对临床上常用的抗肿瘤药物索拉非尼（Sorafenib）、5-氟尿嘧啶（5．Fu）、阿霉素（Doxorubicin）、特罗凯（Tarceva）、和伊立替康（Irinotecan）敏感;对多西紫杉醇（Docetaxel）敏感性存在病例差异,其中ESX003和ESX004对多西紫杉醇无反应。体内药效实验表明Irinotecan在100mg／kg剂量下对4例人食管癌裸鼠移植瘤模型有较强的抑制作用,相对肿瘤增殖率分别为22．02％、39．63％、21．69％和39．70％。结论成功建立了人源性食管癌小鼠移植瘤模型,移植瘤保留了,临床食管癌的病理特征。冻存的肿瘤组织,经复苏后仍可建立小鼠移植瘤模型,提示本研究建立的人源性食管癌移植瘤模型具有可持续应用性。4例人源性食管癌移植瘤模型的体外药敏实验和体内药效实验均表明人源性食管癌移植瘤模型具有很好的应用价值,可用于抗肿瘤药物的筛选及转化医学研究。     

灵芝总三萜与紫杉醇或与顺铂在对人源肿瘤细胞细胞毒性中的相互作用

目的：灵芝三萜类化合物是常被用于辅助性肿瘤治疗的灵芝中具有细胞毒性作用的主要成分。本研究考察灵芝总三萜和化疗药物之间的相互作用。方法：应用了两种肿瘤细胞株即人宫颈瘤HeLa细胞株和人非小细胞肺癌A549细胞株。检测了将灵芝总三萜与紫杉醇或顺铂合用时对细胞的毒性作用，并用Chou and Talalay合用指数法判断合用的相互作用类型。结果：灵芝总三萜和紫杉醇的合用在HeLa细胞中表现为协同作用而在A549细胞中表现为加合作用。灵芝总三萜与顺铂的合用效果则依赖于该两种药物的作用强度，即当其中一种药物的作用强于另外一种时表现为拮抗作用，而当两种药物的作用相似时表现为协同作用。结论：灵芝总三萜可以促进某些化疗药物的作用。