临床试验尿液成瘾药物筛查探讨

尿液成瘾药物筛查是目前药物Ⅰ期临床试验和生物等效性试验纳入健康受试者的关键操作之一,也是保证受试者的安全、试验结果准确可靠的必要措施之一。虽然《化学药物临床药代动力学研究技术指导原则》等指南提出临床试验需要筛查成瘾药物,但都未明确指出尿液成瘾药物筛查的品种以及在临床试验中的意义。本文根据北京大学第一医院药物Ⅰ期临床试验研究室近几年开展的项目中尿液成瘾药物筛查品种以及筛查结果,分析与探讨尿液滥用药物筛查在临床试验中的必要性及重要意义。     

2种国产盐酸二甲双胍肠溶胶囊在健康人体的生物等效性

目的 研究健康受试者单剂量口服2种国产盐酸二甲双胍(降糖药)肠溶胶囊的药代动力学和生物等效性.方法 采用开放、双周期随机交叉给药方案,22名健康男性受试者单剂量口服2种盐酸二甲双胍肠溶胶囊1 000 mg,用HPLC法测定血浆中二甲双胍浓度,计算其主要药代动力学参数.结果 单剂量口服盐酸二甲双胍肠溶胶囊受试制剂和参比制剂的主要药代动力学参数:AUC_(0-tn) 分别为(9.08±3.59)和(9.09±3.28)μg·h·mL~(-1);AUC_(0-∞)分别为(9.72±3.67)和(9.88±3.62)μg·h·mL~(-1);C_(max)分别为(1.76±0.69)和(1.80±0.63)μg·mL~(-1);t_(max)分别为(3.70±1.08)和(3.77±0.81)h;t_(1/2)分别为(3.03±0.49)和(3.08±0.52)h;F为(103.6±36.9)%.结论 2种制剂具有生物等效性.     

非洛地平缓释片在中国健康男性的生物等效性

目的评价2种非洛地平缓释片在健康中国男性人体的生物等效性。方法用双交叉设计,24名健康男性受试者随机分为2组,单剂量口服非洛地平缓释片试验药物或对照药物5 mg,用液相色谱-串联质谱法测定血浆非洛地平血药浓度,用DAS 2.0软件计算药代动力学参数。结果试验药物与对照药物的Cmax分别为(2.15±1.37),(1.67±0.87)ng.mL-1;Tmax分别为(5.40±3.42),(5.85±4.84)h;t1/2分别为(16.51±5.82),(18.78±8.16)h;AUC0-72h分别为(37.68±22.05),(34.71±20.88)ng.h.mL-1;AUC0-∞分别为(39.90±23.64),(37.93±23.75)ng.h.mL-1;Cmax、AUC0-72h和AUC0-∞的90%可信区间分别为109.6%～141.6%,99.2%～120.2%和96.2%～117.8%。两制剂的Tmax非参数法检验差异无统计学意义。试验药物对于对照药物的平均相对生物利用度F为(114.0±33.7)%。结论 2种非洛地平缓释片剂在中国健康男性受试者体内具有生物等效性。     

急性马兜铃酸肾损伤大鼠血清分泌型磷脂酶A2的变化

目的 通过测定急性马兜铃酸肾损伤大鼠血清分泌型磷脂酶A2（sPLA2）活性的变化,探讨sPLA2在马兜铃酸肾病（AAN）发病机制中的作用。 方法 将Wistar大鼠按随机数字表法分为两组：模型组给予关木通水煎剂（相当于生药30 g&#8226;kg-1&#8226;d-1）灌胃7 d,停药后正常喂养至第14天;对照组以自来水灌胃。光镜观察肾脏病理变化并用半定量方法评价肾小管间质损伤程度;生化法测定肾小球及肾小管功能;巯基显色法分别检测血清sPLA2活性;Western印迹法测定肾皮质和肾髓质环氧化酶2（COX-2）蛋白表达;放射免疫法分别测定血清和尿液中前列腺素类（PGs）代谢产物6-keto-PGF1α与血栓烷B2（TXB2）水平并计算二者的比值。 结果 给药后模型组大鼠出现明显的肾小管间质损伤和肾功能下降,并在第8天达高峰,肾小管间质损伤指数（8.14±2.55）较对照组（1.50±0.71）显著升高（P < 0.05）,Scr水平显著增高[（0.24±0.10）比（0.19±0.02） μmol/g,P < 0.05]。给药第8天时模型组血清中sPLA2活性（μmol&#8226;min-1&#8226;mg-1）（133.15±17.05）较对照组（101.3±16.07）显著增强（P < 0.05）,同时肾皮质COX-2蛋白表达也显著增加（1.16±0.36 比0.69±0.28,P < 0.05）,但肾髓质的COX-2蛋白表达无变化。尽管模型组血清中6-keto-PGF1α、TXB2及其比值无变化,但其尿液中6-keto-PGF1α和TXB2水平显著升高,分别为对照组的2倍和3倍（P < 0.05）,二者的比值显著降低（207.53±17.52比296.64±51.31,P < 0.05）。上述变化除肾小管间质损伤指数外,均在第14天时恢复,与对照组差异无统计学意义。 结论 在急性马兜铃酸肾损伤大鼠模型中,血清sPLA2呈激活状态,伴随出现的肾皮质COX-2表达增加及尿液中缩血管类PGs代谢产物增加,提示肾脏缩血管反应增强,可能是马兜铃酸肾损害时组织缺血改变的机制之一。     

以关木通为例探讨不同入药形式对中药中有毒成分含量的影响

目的:以关木通为例,探讨中药不同入药形式对其毒性成分含量的影响。方法:以3.7mmol·L^-1磷酸缓冲液(pH2.55)-乙腈为流动相,260nm为检测波长,采用RP-HPLC-DAD方法测定以粉末、水煎液2种形式入药的关木通中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅳa的含量情况。结果:关木通水煎液中马兜铃酸Ⅰ,Ⅱ,Ⅳa的煎出率分别为药材粉末中含量的53.4%,75.5%,61.9%;而在水煎后的药渣中马兜铃酸Ⅰ,Ⅱ和Ⅳa的残余量分别相当于粉末中含量的22.3%,15.7%和30.3%;3种马兜铃酸其余的约10%-25%可能在水煎过程中被破坏了;马兜铃酸Ⅰ在水煎液中仍为主要的马兜铃酸类成分。结论:不同入药形式对关木通中的毒性成分含量有很大的影响;应根据毒性成分的性质而选择合适的入药形式,以此来减少中药毒性成分对人体的损害。     

环孢素A口服溶液不同给药剂量对注射器内残留量的影响

目的:考察环孢素A口服溶液不同给药剂量对一次性注射器内残留量的影响。方法:将40支一次性无菌注射器均分为0.9%氯化钠注射液组和环孢素A口服溶液组,两组又均分为4个亚组。分别测定两组注射器内溶液的残留量,并计算残留百分比。结果:环孢素A口服溶液组各亚组一次性无菌注射器内环孢素A的残留百分比均显著高于0.9%氯化钠注射液组,差异有统计学意义(P<0.05)。环孢素A口服溶液各亚组间除0.5 ml组与0.8 ml组间比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其他各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:儿童采用一次性无菌注射器口服给予环孢素A时抽取的剂量越小,注射器内药物的残留百分比越大;当注射器抽取环孢素A溶液剂量在0.1 ml时,注射器内药物的残留量百分比最高。     

高效液相色谱法测定人血浆中伏立康唑的含量

目的建立高效液相色谱法测定人血浆中伏立康唑浓度的方法学。方法色谱柱:ZORBAX Eclipse Plus C₁₈,柱温:40℃,流速:1 mL·min^-1,流动相:甲醇-水=55∶45,检测波长:254 nm,内标:对氯苯乙酰胺。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、稳定性。结果血浆中内源性杂质对样品测定无干扰,血浆中伏立康唑在0.1~10.0μg·mL^-1内线性良好(r=0.999 2),最低检测浓度为0.1μg·mL^-1。血浆中伏立康唑日内、日间RSD均<10%,提取回收率为89%~92%。结论本方法简便、灵敏、准确、高效,适用于人体内伏立康唑的浓度监测。     

单剂口服盐酸吡格列酮片在健康人体的药代动力学

目的研究健康人体单剂量口服盐酸吡格列酮片(胰岛素增敏剂)的药代动力学。方法24名健康男性志愿者单次口服盐酸吡格列酮片30mg,用HPLC-MS/MS同时测定血浆中吡格列酮及其活性代谢产物的浓度,计算其主要药代动力学参数。结果吡格列酮:Cmax为(1504.9±447.8)ng.mL-1;tmax为(1.46±0.69)h;t1/2Ke为(7.58±3.21)h;AUC0-48为(11.22±2.60)μg.h.mL-1。吡格列酮代谢物M-Ⅲ:Cmax为(249.4±82.7)ng.mL-1;tmax为(11.94±6.14)h;t1/2Ke为(20.09±4.13)h;AUC0-120为(10.90±3.55)μg.h.mL-1。吡格列酮代谢物M-IV:Cmax为(487.2±108.6)ng.mL-1;tmax为(13.33±5.23)h;t1/2Ke为(21.07±3.99)h;AUC0-120为(22.78±5.04)μg.h.mL-1。结论健康人体单剂量口服盐酸吡格列酮片剂后,吡格列酮代谢物M-Ⅲ和M-IV的达峰时间约为12～13h,峰浓度分别约为吡格列酮的16%和32%,AUC0-120分别约为吡格列酮AUC0-48的97%和203%。     

反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中替米沙坦的浓度

目的 :建立测定大鼠血浆中替米沙坦浓度的反相高效液相色谱法。方法 :血浆样品用乙酸乙酯提取 ,选用LichrospherC18(5 μm ,15 0mm× 4 6mm ,ID)为分析柱 ,甲醇 - 0 1mol/L乙酸铵水溶液 (70∶30 )为流动相 ,流速 1 0ml/min ,对羟基苯甲酸丁酯为内标 ,检测波长 2 97nm。结果 :替米沙坦线性范围为 0 0 16～ 1 2 80 μg/ml,最低检测限达 5ng/ml (S/N >3)。样品平均回收率在 90 %以上 ,日内、日间精密度的RSD均小于 10 %。结论 :此方法可用于替米沙坦血药浓度分析及药代动力学研究。