黄芪葛根配伍调节糖尿病大鼠血糖血脂炎症的作用与机制

目的:考察黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠血糖、血脂及炎症的调节作用与机制,分析黄芪葛根配伍在降糖降脂抗炎过程中的交互作用。方法:66只大鼠随机分为6组,除正常组外,其余各组采用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型。正常组、模型组灌服蒸馏水(10 m L·kg-1),阳性药组灌服金芪降糖片混悬液(1.47 g·kg-1),黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组分别灌服黄芪水煎液(2.7,1.35,4.05 g·kg-1),连续给药30 d后处死。酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测肝组织胰岛素(Ins),胰岛素受体(InsR),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测肝组织脂联素受体1(AdipoR1),腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK),葡萄糖转运体-4(GLUT-4),过氧化物酶增殖体激活受体α(PPARα),脂肪酸转运蛋白4(FATP4),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)mRNA相对表达量。结果:与模型组比较,黄芪、葛根及其配伍(黄芪葛根汤)能升高糖尿病大鼠肝脏Ins(葛根组除外),InsR水平,增加AdipoR1,AMPK(葛根组除外),GLUT-4,PPARα,FATP4mRNA表达,降低TNF-α(葛根组除外)水平,减少p38 MAPK mRNA表达(P0.05)。在调节InsR,PPARαmRNA,TNF-α水平时,单用黄芪作用比两药合用效果好。结论:黄芪葛根配伍在调节血糖血脂炎症过程中各有侧重,其机制与升高肝脏Ins水平、增加GLUT-4,FATP4 mRNA,降低p38 MAPK mRNA有关。     

综合性实验设计在《中药制剂分析》实验教学中的应用

《中药制剂分析》课是一门应用性极强的学科,也是关系到本专业毕业生未来工作的一门重要专业课。提高学生设计性实验能力,是当前毕业生毕业前的一大教学内容。综合性实验设计是培养具有现代思维的高素质人才的需要。实验设计包括拟题、实验设计、完善和实施、问题和分析、实验报告等几个部分,在教师指导下让学生进行实验设计可增强学生实验的主动性,提高学生分析问题的能力。通过对实验方案的设计和结果处理,培养学生的科研能力。     

伤湿止痛流浸膏的提取工艺研究

目的:优选伤湿止痛流浸膏的提取工艺。方法:采用正交试验法考察药材浸泡时间、煎煮时间、溶媒pH值、药液处理方法对提取工艺的影响。结果:确定最佳提取工艺为溶媒pH3~4的酸水,药材浸泡12h,煎煮6h,药液75%醇沉处理。结论:按优选的最佳提取工艺条件,以指标性成分士的宁的得率为指标,预测并验证试验结果满意。     

淫羊藿苷及其代谢产物在骨质疏松模型大鼠肾脏组织中的分布

目的:探索骨质疏松模型大鼠灌胃给予淫羊藿苷后淫羊藿苷及其代谢产物在肾脏中分布情况。方法:按118mg·kg-1灌胃给予骨质疏松模型大鼠淫羊藿苷单体,分别于40 min,1.5,2.5,4,12,24 h取出肾脏组织,经生物样品预处理后,采用HPLC测定肾脏中淫羊藿苷及其代谢产物(淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿素)的质量浓度,流动相0.4%乙酸水溶液(A)-甲醇(B)梯度洗脱(0~11 min,43%A;12~30 min,37%A;31~46 min,43%A),检测波长270 nm。结果:给药40 min后,在肾脏组织中检测到淫羊藿苷(0.017 5 mg·L-1)淫羊藿次苷Ⅰ(0.014 2 mg·L-1)及淫羊藿次苷Ⅱ(0.012 7 mg·L-1);给药2.5 h后,淫羊藿苷(0.134 3 mg·L-1)、淫羊藿次苷Ⅰ(0.080 4 mg·L-1)及淫羊藿次苷Ⅱ(0.102 4 mg·L-1)质量浓度均较高,24 h后基本消除;2.5 h检测到淫羊藿素(0.027 2 mg·L-1),4 h质量浓度较高(0.082 2 mg·L-1),24 h时仍存在(0.025 9 mg·L-1)。结论:淫羊藿苷在大鼠肾脏中分布较快,与其代谢产物共存于肾脏组织中,具有较高的质量浓度并能维持一定时间,提示其作用靶点可能为肾脏,与中医学理论认为淫羊藿归肝、肾经相符合。建立的HPLC简便、快速,为淫羊藿苷的体内研究提供参考。     

设置方剂学实验教学模式探讨

依托本校方剂学科被列入2010年辽宁省"提升学科项目"及教育科学研究课题"设置方剂学实验教学模式研究",方剂学科从实验室建设到人才队伍已经具备了开展方剂学实验教学的条件。文章从设置方剂学实验教学的重要性、实验教学的条件、实验教学的内容、实验教学的考核方式及存在的问题方面进行探讨,为本校方剂学教学改革提供新的思路。     

黄芪葛根汤总黄酮、总皂苷对糖尿病大鼠肝脏IL-12、IL-15的影响及其交互作用

目的：考察黄芪葛根汤总黄酮、总皂苷对糖尿病大鼠血糖、血脂及肝脏白介素12（IL-12）、白介素15（IL-15）的影响及其在调节糖尿病糖脂代谢过程中的交互作用。方法：将66只大鼠随机分为6组：正常组、模型组（A1B1）、对照组、总黄酮组（A2B1）、总皂苷组（A1B2）、总黄酮和皂苷组（A2B2）,每组11只。除正常组外,其余各组用链脲佐菌素（STZ）造模后,按2×2析因设计实验方案实施实验,分别于造模前、造模后第7天测定大鼠随机血糖,造模后30天测定血糖、血脂以及肝脏IL-12、IL-15等指标。有关联的指标计算加权综合评分,对综合指标运用析因设计方差分析方法分析总黄酮、总皂苷的主效应及其交互效应。结果：与正常组比较,模型组各项指标差异均有统计学意义（P<0.05）。总黄酮、总皂苷均可降低大鼠血糖水平,两者之间无交互作用;总黄酮、总皂苷均能降低血清胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、IL-15、IL-12水平,两药之间有交互作用,单一用药比合用效果好。结论：黄芪葛根汤总黄酮、总皂苷具有降低糖尿病大鼠血糖、CHO、TG水平以及肝脏IL-12、IL-15水平的作用;但总黄酮、总皂苷对上述指标的调节未呈现叠加协同作用。     

吴茱萸当归药对不同配伍比例对吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量的影响

目的:考察吴茱萸当归药对中主要成分随吴茱萸当归配比变化的溶出规律。方法:采用高效液相色谱法测定吴茱萸当归药对不同配伍比例对吴茱萸中活性成分吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量的影响。色谱柱:DiamonsilC18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-0.04%辛烷磺酸钠溶液(45∶55);检测波长:225nm;流速:1.0mL·min-1。结果:在所观察的吴茱萸与当归的9个配伍比例中,随着当归比例的降低,吴茱萸碱和吴茱萸次碱溶出率逐渐增高,以6∶4配伍组含量较高,且其后含量增加趋于平稳,与《金匮要略》温经汤配伍比例相符合。结论:以现代研究方法证实吴茱萸当归药对的最佳配伍比例与《金匮要略》温经汤中的两药配伍比例相符合。     

HPLC法测定降香药材中木犀草素的含量

目的:建立降香药材中木犀草素的含量测定方法.方法:用高效液相色谱法测定了木犀草素的含量,色谱柱:Zorbax eclipse XDB C18(4.6 mm×150 mm);流动相:甲醇-0.49白磷酸溶液(43∶57);流速∶1.0 mL·min-1,检测波长:353 nm.结果:平均回收率98.9%(RSD=2.0%),线性关系r=0.999 7,进样量在0.042 5～0.34 μg内线性关系良好.重复性RSD=1.6%,精密度RSD=1.5%.结论:该方法稳定、可靠,可作为其质量控制方法.     

HPLC法测定香连片中木香烃内脂和去氢木香内脂含量

目的：建立高效液相色谱法测定香连片中木香烃内脂和去氢木香内脂的含量。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱：KromasilCl8色谱枉（150mm×4．6mm,5μm）;流动相：乙腈一水（58：42）;检测波长：223nm;流速：1．0mL·minl-1;柱温：28℃。结果：木香烃内脂的线性范围为0．1212-1．212μg,去氢木香内酯的线性范围为0．141-1．41μg。平均回收率分别为97．9％,98．3％,相对标准偏差RSD分别为1．3％,2．3％（n=9）。结论：该方法简单、快速、准确,可用于香连片的质量控制。     

淫羊藿次苷Ⅰ与其原型药物淫羊藿苷对rBMSCs成骨性分化的影响比较

目的观察淫羊藿次苷Ⅰ(IcarisideⅠ)与其原型药物淫羊藿苷(Icariin,ICA)对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stromal cells,r BMSCs)成骨分化过程中碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)蛋白表达量及ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA表达的影响。方法贴壁筛选法体外培养r BMSCs,以1×10-5mol/L的ICA和IcarisideⅠ对r BMSCs的成骨性分化进行药物干预。ELISA法检测ICA组、IcarisideⅠ组和空白对照组及转化液组之间ALP活性、BGP分泌量;RT Real-Time PCR法检测ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA基因表达。结果与空白对照组相比,IcarisideⅠ与其原型药物ICA均可显著增强r BMSCs的ALP活性,促进BGP的分泌,提高ALP、BGP、Osterix和Runx-2的mRNA水平(P0.01)。IcarisideⅠ与ICA组比较,其ALP、BGP蛋白表达量及基因表达明显高于ICA组(P0.01),Osterix和Runx-2的基因表达两组无显著性差异。结论 IcarisideⅠ也能促进r BMSCs成骨性分化,并且其活性高于原型药物ICA,也是淫羊藿发挥抗骨质疏松活性的主要成分。(2)提示补肾中药淫羊藿其补肾壮骨作用与促进ALP、BGP蛋白分泌量,上调ALP、BGP、Osterix和Runx-2的mRNA水平有关。