骨髓间充质干细胞来源的内皮细胞构建组织工程瓣膜及其抗血栓作用

目的：分析骨髓间充质干细胞来源的内皮细胞构建组织工程瓣膜的可行性，评价其抗血栓功能。方法：实验于2005-08／2006—04在复旦大学上海医学院分子生物学实验室完成。①人骨髓来源为中山医院胸外科手术摘除的一段肋骨（患者知情同意）；取健康志愿者静脉血进行血小板黏附观察；新鲜猪心瓣膜取自上海复新屠宰场。②利用胰酶-乙二胺四乙酸、核酸酶处理猪心瓣膜制备脱细胞支架。将摘除的一段肋骨无菌条件下用含肝素的磷酸盐缓冲液充分冲洗骨髓腔，进行骨髓间充质干细胞的分离培养及体外诱导分化。⑧经体外诱导成的内皮细胞后，种植于瓣膜支架，构建组织工程瓣膜。体外培养1周后，取组织工程瓣膜及未种细胞的空支架做血小板黏附试验。以CD31、vWF对细胞进行鉴定，采用苏木精-伊红染色、免疫荧光及扫描电镜对组织工程瓣膜进行评价。结果：①骨髓间充质干细胞定向诱导为内皮细胞及其性质鉴定：骨髓间充质干细胞定向诱导为内皮细胞后，CD31及vWF染色由阴性转为阳性，呈现出“铺路石”样形态。瞧糯膜组织形态观察结果：猪心瓣膜的细胞成分完全去除，胞外基质保存良好，组织工程瓣膜表面形成一连续的内皮细胞单层。⑧血小板黏附情况：扫描电镜显示空支架表面有大量血小板聚集和黏附，而组织工程瓣膜表面无此现象，显示了良好的抗血栓性能。结论：骨髓间充质干细胞来源的内皮细胞叮以用来构建具有良好的抗血栓性能组织工程瓣膜。     

TNF-α和IFN-γ刺激的人脐静脉内皮细胞上IgG受体的表达

目的:检测IgG受体(FcγR)在炎症细胞因子刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)上的表达。方法:采用ELISA、免疫组化染色法、免疫荧光法和RT-PCR等方法,检测FcγRII及其表达。结果:未经细胞因子刺激的正常HU-VEC可表达低水平的FcγRIIa;经2×105U/L TNF-α和1×105U/L IFN-γ联合刺激3d后,FcγRIIa的表达提高16倍(P<0.01)。免疫荧光法检测显示,TNF-α和IFN-γ诱导的FcγRIIa表达于HUVEC表面。RT-PCR结果显示,FcγRIIamRNA表达量在TNF-α和IFN-γ刺激24h后有明显提高。结论:TNF-α和IFN-γ可通过调节FcγRIIa的转录和翻译,增强其在HUVEC上的表达。FcγRIIa的表达可能与血管炎条件下,免疫复合物在血管上的特异性定位有关。     

胎盘羊膜贴补治疗外伤性鼓膜穿孔112例

通过胎盘羊膜贴补治疗外伤性鼓膜穿孔１１２例病人的临床观察，显示外伤性鼓膜穿孔及早行羊膜贴补治疗，可预防感染，缩短疗程，减少并发症，提高听力。故外伤性鼓膜穿孔，尤其是大穿孔，行羊膜贴补治疗是有效积极的治疗方法。     

骨髓间充质干细胞来源的内皮细胞构建组织工程瓣膜及其抗血栓作用

目的:分析骨髓间充质干细胞来源的内皮细胞构建组织工程瓣膜的可行性,评价其抗血栓功能。方法:实验于2005-08/2006-04在复旦大学上海医学院分子生物学实验室完成。①人骨髓来源为中山医院胸外科手术摘除的一段肋骨(患者知情同意);取健康志愿者静脉血进行血小板黏附观察;新鲜猪心瓣膜取自上海复新屠宰场。②利用胰酶-乙二胺四乙酸、核酸酶处理猪心瓣膜制备脱细胞支架。将摘除的一段肋骨无菌条件下用含肝素的磷酸盐缓冲液充分冲洗骨髓腔,进行骨髓间充质干细胞的分离培养及体外诱导分化。③经体外诱导成的内皮细胞后,种植于瓣膜支架,构建组织工程瓣膜。体外培养1周后,取组织工程瓣膜及未种细胞的空支架做血小板黏附试验。以CD31、vWF对细胞进行鉴定,采用苏木精-伊红染色、免疫荧光及扫描电镜对组织工程瓣膜进行评价。结果:①骨髓间充质干细胞定向诱导为内皮细胞及其性质鉴定:骨髓间充质干细胞定向诱导为内皮细胞后,CD31及vWF染色由阴性转为阳性,呈现出“铺路石”样形态。②瓣膜组织形态观察结果:猪心瓣膜的细胞成分完全去除,胞外基质保存良好,组织工程瓣膜表面形成一连续的内皮细胞单层。③血小板黏附情况:扫描电镜显示空支架表面有大量血小板聚集和黏附,而组织工程瓣膜表面无此现象,显示了良好的抗血栓性能。结论:骨髓间充质干细胞来源的内皮细胞可以用来构建具有良好的抗血栓性能组织工程瓣膜。     

ATP治疗药物性鼻炎的疗效观察

药物性鼻炎是耳鼻喉科常见病 ,多由长期应用市上出售的鼻粘膜血管收缩剂而引起。我科自 2 0 0 0年 5月起 ,应用ATP治疗药物性鼻炎 60例 ,疗效满意。现报告如下 :1　资料与方法1 1　临床资料 :药物性鼻炎 60例 ,男 3 2例 ,女 2 8例 ,年龄17～ 5 5岁 ,病程 1～ 10年。诊断标准为 :主要根据鼻用药连续超过 10天 ,并有多用减效现象 ;检查见双下鼻甲肿胀 ,对麻黄素棉片反应不敏感。1 2　治疗方法与疗效判定 :全部病例给予口服ATP40mg ,3次 /日 ,连用 3日 ,最多为 1周。疗效判定 :主观上根据病人主诉 ,同时观察鼻粘膜外观改善状况。治疗后患者…     

Merocel高膨胀止血材料在鼻腔填塞中的应用

传统上治疗鼻出血及鼻腔术后的填塞多应用凡士林纱条 ,不但给患者造成的痛苦大 ,而且在抽填过程中多会造成鼻黏膜的损伤。我科自 2 0 0 1年 5月起应用Merocel进行鼻腔填塞止血 ,效果满意 ,现报告如下。1　资料与方法1.1　一般资料 :鼻出血患者 34例 ,其中男 2 1例 ,女 13例 ;平均年龄 5 6岁。右侧鼻出血 19例 ,左侧 15例 ,多为中后段下鼻道出血。鼻腔术后患者 2 8例 (其中下鼻甲部分切除术12例 ,鼻中隔矫正术 10例 ,鼻息肉摘除术 6例 ) ,男 16例 ,女12例 ,平均 4 0岁。1.2　治疗方法 :全部患者应用Merocel高膨胀止血材料(美国MedtronicXom…     

分子生物学实验教学中创新能力的培养

本文以分子生物学实验教学的具体实施为内客，来阐述如何培养学生良好的创新能力、科学思维方式和科学探索能力。     

鼻内镜下鼓膜穿刺治疗分泌性中耳炎149例

分泌性中耳炎是以中耳积液及听力减退为主要特征的中耳非化脓性炎症[1],鼓膜穿刺是一种有效的治疗方法.我科2004年6月至2007年12月在鼻内镜下行鼓膜穿刺治疗分泌性中耳炎,效果良好,现报道如下.     

基础医学专业《分子生物学理论与实验》教学初探

对《分子生物学理论与实验》课程的框架-网络-应用的教学思想、教学方法和手段进行总结,探索基础医学教育改革。     

平阳霉素囊内注射治疗耳廓假性囊肿

耳廓假性囊肿 ,是一种非化脓性浆液性囊肿。我科自 1998年起 ,采用平阳霉素囊内注射治疗耳廓假性囊肿 3 6例 ,效果满意 ,现报告如下。1　资料与方法本组 3 6例 ,男 3 1例 ,女 5例 ,年龄 2 4～ 5 3岁 ,平均 3 2岁 ,囊肿位于左耳 2 0例 ,右耳 16例 ,病程 6月～ 4年。治疗方法 :碘酊消毒耳廓囊肿突起处 ,用注射器接 7号针头 ,在隆起处刺入囊内 ,尽可能抽尽囊液 ,不拔除针头 ,更换内有平阳霉素的注射器 ,将 2ml平阳霉素注入囊内 ,拔除针头 ,术毕。如 1周未愈 ,可再用本法治疗。2　结果3 6例中 ,1次治愈 2 9例 ,2次治愈 7例 ,随访 1～ 2年 ,无复…