重组腺苷蛋氨酸合成酶酶促反应条件的研究

目的：对重组腺苷蛋氨酸合成酶催化L-蛋氨酸（Met）和三磷酸腺苷（ATP）合成腺苷蛋氨酸的反应条件进行研究。方法：将重组腺苷蛋氨酸合成酶制成粗酶液,对其酶促反应条件进行研究和优化,摸索反应的最适pH值、最适反应时间及最适酶量,解决产物抑制问题和产物分解问题。根据试验摸索的条件进行450L生物反应罐的中试放大。结果：重组腺苷蛋氨酸合成酶催化Met和ATP合成的反应最适pH值为7．0,反应时间为8h,选择硼酸钠-硫酸缓冲液作为反应的缓冲系统,确定了反应液中酶液的最佳比例为1：10,解决产物抑制问题的对甲苯磺酸钠的用量为9％。将镁离子和钾离子的盐酸盐形式改为硫酸盐形式,从而保证了最小限度的产物分解。中试放大结果：三批收率分别达到86．8％、87．1％和88．4％。结论：建立了重组腺苷蛋氨酸合成酶酶促反应的方法,为酶促法合成腺苷蛋氨酸大规模生产奠定了基础。