DJ-1基因及其与帕金森病关系的研究进展

帕金森病是目前世界上最常见的神经系统退行性病变之一,DJ-1基因是一个与帕金森病相关的基因,其致病机制还不完全清楚.很多研究人员对DJ-1蛋白的功能进行了研究,目前已经发现DJ-1蛋白具有抗氧化、调节转录、参与能量代谢、抑制细胞凋亡等作用,本文总结了DJ-1基因的结构、突变形式、生物学作用及其与帕金森病发生的关系,以及DJ-1基因与其他导致帕金森病的基因之间的相互作用.对研究和了解帕金森病及其基因治疗具有重要意义.     

荧光定量PCR法检测4212例生殖道沙眼衣原体标本结果分析

目的分析荧光定量PCR (FQ-PCR)法检测4 212例生殖道沙眼衣原体(CT)标本的结果。方法采用FQ-PCR与胶体金法检测4 212例生殖道CT标本,检测阳性的标本进行核酸测序分析,分析阳性结果的真实性。结果 FQ-PCR法和胶体金法检测生殖道CT阳性检出率分别为1. 94%(82例)和0. 24%(10例),差异有统计学意义(P<0. 05)。FQ-PCR法检测CT阳性标本核酸成功测序,结果分析均为CT。结论 FQ-PCR法检测CT的检出率高、敏感、结果真实可信,是生殖健康、优生优育、不孕不育检查早期发现并预防CT感染的可信方法。     

DJ-1基因与帕金森氏病的研究进展

[摘要] 帕金森氏病是目前世界上最常见的神经系统退行性病变之一，DJ-1是一个与帕金森氏病相关的基因，其致病的作用机制不完全清楚。很多研究人员对DJ-1的蛋白功能进行了研究，目前已经发现DJ-1蛋白具有抗氧化、调节转录、参与能量代谢、抑制细胞凋亡等作用，本文总结了DJ-1的结构、突变形式、生物学作用与帕金森病发生的关系，以及DJ-1基因与其它导致帕金森氏病的基因之间的相互作用。对研究和了解帕金森氏病及其基因治疗具有重要意义。     

突变DJ-1转基因小鼠模型的建立

目的 探讨DJ-1~(L166P)突变基因在帕金森病发生中的作用.方法 构建pcDNA3.1-myc-his-DJ-1~(L166P)真核表达载体,利用显微注射方法将DJ-1~(L166P)基因片段(约3.9 kb)导入BDF1小鼠受精卵雄原核并移植到同期受孕的ICR假孕母鼠输卵管中,对产出仔鼠的鼠尾组织DNA进行聚合酶链反应和Southern blot检测,对Southern blot鉴定阳性的转基因小鼠进行逆转录聚合酶链反应和Western blot检测.结果 共产生20只子代小鼠,1号和7号为DJ-1~(L166P)转基因阳性小鼠.1号转基因小鼠大脑、小脑、肝、肺、肾、睾丸有不同程度的DJ-1 mRNA表达,均高于正常对照小鼠,但只有大脑中DJ-1 mRNA的表达水平显著高于正常对照小鼠(P<0.05);7号转基因小鼠只有肝、肺组织中有DJ-1 mRNA表达,也高于正常对照小鼠,但差异无统计学意义.只有1号小鼠大脑有His标签蛋白的表达.结论 成功获得1只DJ-1~(L166P)基因突变转基因小鼠模型,为课题的下一步实验研究打下良好的基础.     

转染DJ-J和DJ-1^L166P基因的NIH3T3细胞中tau基因表达的研究

目的在转染pEGFP-DJ-1和pEGFP-DJ-1^L166P质粒的NIH3T3细胞中进行tau基因表达与DJ-1基因相关性的研究，为进一步建立DJ-1和DJ-1^L166P转基因小鼠模型及在动物整体水平研究DJ-1基因功能和帕金森病发病机制提供实验基础。方法采用RT-PCR的方法从人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）总RNA反转录获得DJ-1cDNA片段，采用突变试剂盒将第166位氨基酸突变，分别构建pEGFP-DJ-1和pEGFP-DJ-1^L166P重组表达载体，采用脂质体转染的方法分别将pEGFP-DJ-1、pEGFP-DJ-1^L166P、pEGFP-C3质粒转染NIH3T3细胞并用G418压力筛选稳定克隆，对获得的三种转染细胞在转录水平和蛋白质水平进行tau基因表达的检测。结果pEGFP—DJ-1、pEGFP-DJ-1^L166P、pEGFP—C3质粒转染NIH3T3细胞G418筛选后，分别获得6、2、9个阳性细胞克隆，RT—PCR及western blot方法进行tau基因表达检测，结果均显示pEGFP—DJ-1质粒转染组tau表达低于pEGFP—C3质粒转染组，而pEGFP—DJ-1^L166P质粒转染组tau表达则高于pEGFP—C3质粒转染组，实验结果统计学分析均具有明显差异（P〈0．05）。结论在转录水平及蛋白质水平，DJ-1基因使tau基因的表达下降，而DJ-1^L166P使tau基因表达上升。在NIH3T3细胞中tau基因表达与DJ-1基因具有一定的相关性。     

转染DJ-1和DJ-1L166P基因的NIH3T3细胞中tau基因表达的研究

目的 在转染pEGFP-DJ-1和pEGFP-DJ-1L166P质粒的NIH3T3细胞中进行tau基因表达与DJ-1基因相关性的研究,为进一步建立DJ-1和DJ-1L166P转基因小鼠模型及在动物整体水平研究DJ-1基因功能和帕金森病发病机制提供实验基础.方法 采用RT-PCR的方法从人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)总RNA反转录获得DJ-1cDNA片段,采用突变试剂盒将第166位氨基酸突变,分别构建pEGFP-DJ-1和pEGFP-DJ-1L166P重组表达载体,采用脂质体转染的方法分别将pEGFPDJ-1、DEGFP-DJ-1L166P、pEGFP-C3质粒转染NIH3T3细胞并用G418压力筛选稳定克隆,对获得的三种转染细胞在转录水平和蛋白质水平进行tau基因表达的检测.结果 pEGFP-DJ-1、pEGFPDJ-1L166P、pEGFP-C3质粒转染NIH3T3细胞G418筛选后,分别获得6、2、9个阳性细胞克隆,RTPCR及westem blot 方法进行tau基因表述检测,结果均显示pEGFP-DJ-1质粒转染组tau表达低于pEGFP-C3质粒转染组,而pEGFP-DJ-1L166P质粒转染组tau表达则高于pEGFP-C3质粒转染组,实验结果统计学分析均具有明显差异(P＜0.05).结论 在转录水平及蛋白质水平,DJ-1基因使tau基因的表达下降,而DJ-1L166P使tau基因表达上升.在NIH3T3细胞中tau基因表达与DJ-1基因具有一定的相关性.