控制多种细胞在同一表面有序黏附的研究进展

体外进行多种细胞共培养体系的建立,为不同种类细胞间相互作用的研究提供了有效的途径.在细胞培养的基底表面运用化学修饰,改变其对蛋白质和细胞的吸附特性,可以良好地控制不同细胞的共培养.结合微流控技术,在同一基底上也可以达到多种细胞的共培养.本文综述这一领域近期的研究进展.     

无标记检测CD4~+T淋巴细胞的免疫传感器构建

目的构建一种无标记检测CD4~+T淋巴细胞的免疫传感器。方法采用葡萄球菌A蛋白(SPA)法定向固定单克隆抗体于金叉指微阵列电极表面以捕获CD4~+T淋巴细胞,并用循环伏安法(CV)扫描对金叉指微阵列电极表面的修饰情况进行表征,最后通过电化学交流阻抗谱法(EIS)对免疫传感器捕获的CD4~+T淋巴细胞进行阻抗检测,通过等效电路拟合获得的阻抗值变化绘制标准曲线。结果该免疫传感器检测CD4~+T淋巴细胞的线性范围是(5.0×103-5.0×106)/mL,检测下限为5.0×102/mL。结论该免疫传感器的结果准确可靠,检测过程简便,价格低廉,有望用于实时检测系统,为实现快速、准确、价廉的CD4~+T淋巴细胞分类计数提供帮助。     

适度运动对人体肠道菌群结构的影响

目的 适度运动有益于身心健康.本研究从肠道菌群结构的角度来探讨运动对人体健康的影响.方法 招募运动组和少动组志愿者人群,利用16S rDNA高通量测序技术分析志愿者肠道菌群结构.结果 高通量测序共获得61 888个OTUs,其中已注释的OTUs有61 149个.PCoA分析显示,运动组和少动组之间肠道菌群结构存在显著差异.运动组中毛螺菌科(Lachnospiraceae)和拟杆菌科(Bacteroidaceae)的丰度显著高于少动组(P=2.5627×10-7,P =0.000 178 4),普雷沃氏菌科(Prevotellaceae)和韦荣氏球菌科(Veillonellaceae)的丰度显著低于少动组(P=0.000 003 46,P=0.000017 41).有3株可培养的菌株在运动组中丰度显著增加,分别为瘤胃球菌属的Ruminococcus_sp.5_1_39BFAA,双歧杆菌属的Bifidobacterium_adolescentis以及丁酸产盐菌属的Anaerostipes_hadrus.在运动组中显著增加的肠道菌,如拟杆菌科,双歧杆菌属的Bifidobacterium_adolescentis以及Anaerostipes_hadrus,能够代谢产生丰富的SCFAs,对肠粘膜免疫系统动态平衡的维持具有重要意义.结论 运动可能通过肠道菌群结构的改变及其与肠黏膜系统的相互作用对人体产生积极影响.     

不同全自动酶免分析系统性能对比研究

目的比较中国烟台艾德康公司Elisa800型全自动酶免分析系统(简称Elisa800分析仪)和瑞士帝肯公司Freedom Evolyzer型全自动酶免分析系统(简称Freedom Evolyzer分析仪)在的基本使用性能。方法采用Elisa800分析仪、Freedom Evolyzer分析仪,以及相同的试剂盒,对相同的标本进行抗甲型肝炎病毒抗体、抗丙型肝炎病毒抗体、抗丁型肝炎病毒抗体、抗戊型肝炎病毒抗体、乙型肝炎病毒前S1抗原、乙型肝炎病毒前S2抗原检测。比较两台分析仪标本检测前处理操作步骤及操作时间,以及标本检测结果。结果两台分析仪检测结果完全一致,阳性符合率为100%。当标本量大于91份时,Freedom Evolyzer分析仪检测耗时约为Elisa800分析仪检测耗时的2倍。与Freedom Evolyzer分析仪相比,Elisa800分析仪标本前处理操作步骤由24步缩减为3步,处理操作时间由11min缩减至1min。结论 Elisa800分析仪与Freedom Evolyzer分析仪检测结果一致,但Elisa800分析仪检测耗时更短,操作更简便。     

3种酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒前S1及S2抗原的比较

目的比较酶联免疫吸附试验(ELISA)的3种不同检测方式,选择最佳检测方式,用于临床诊疗。方法用Addcare ELISA800全自动酶免仪、TECAN freedom evolyzer全自动酶免分析系统、手工ELISA法等3种方式对质控品标本和患者血清标本进行乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre-S1Ag)和前S2抗原(Pre-S2Ag)检测,并采用统计学方法对其结果进行分析。结果 3种方式检测Pre-S1Ag的批内精密度分别为4.73%、5.38%、11.87%,检测Pre-S2Ag的批内精密度分别为4.91%、5.04%、11.75%;检测Pre-S1Ag的批间精密度分别为6.63%、7.90%、13.26%,检测Pre-S2Ag的批间精密度分别为6.74%、7.81%、12.59%。灵敏度均为100.00%。结论 3种方法有非常好的一致性,均能较好地检测Pre-S1Ag和Pre-S2Ag,Addcare ELISA800全自动酶免仪精密度最好,可进一步提升临床检验质量。     

CRP和SF检测在急性胰腺炎临床分型及严重程度评估中的意义

目的研究C反应蛋白(CRP)、铁蛋白(SF)的表达水平在急性胰腺炎(AP)临床分型及严重程度评估中的意义。方法收集该院2014年2月至2015年10月收治的AP患者120例,进行回顾性分析,其中重症急性胰腺炎(SAP)32例,轻型急性胰腺炎(MAP)88例,另选取30例健康体检者作为健康对照组。测定健康对照组和AP患者入院初的血清SF、CRP、淀粉酶(AMY)及脂肪酶(LPS)水平。结果与健康对照组比较,早期SAP组、MAP组的SF、CRP、AMY、LPS水平均明显升高(P0.05);SAP组的SF、CRP水平均高于MAP组(P0.05),而AMY、LPS水平与MAP组比较差异无统计学意义(P0.05);SAP组SF阳性率水平明显高于MAP组(P0.05);早期AP患者血清SF和CRP呈正相关(r=0.227,P=0.013)。结论 SF和CRP均能够作为急性胰腺炎患者分型的重要标志物,SF在判断患者严重程度上优于CRP,具有重要的临床应用价值。     

Addcare Elisa 800全自动酶免工作站临床应用经验总结

正酶联免疫吸附试验(ELISA)由于测定灵敏度高、特异度高、操作简便、酶标记试剂比较稳定、无放射性污染、易于自动化,且易与其他相关技术偶联,使其成为目前应用最广泛而且发展最快的一种免疫测定技术[1]。Addcare Elisa 800全自动酶免工作站以操作简单、快速检测、结果准确等优点,实现了ELISA分析的自动化、标准化、快速化、网络化逐渐在全国各大医院使用[2-3]。本科于2013年6月引进Addcare Elisa 800     

含银敷料的表征和银的体外释放实验方法研究及其应用

目的:建立含银敷料的表征和银体外释放及鉴别释放液中纳米银和银离子的实验方法;探讨其在相关产品检测中的应用。方法:通过扫描电子显微镜(SEM)、X射线能量色散谱仪(EDS)、X射线光电子能谱仪(XPS)对含银敷料进行形貌及银颗粒价态分析表征;采用摇床法及往复支架法考察含银敷料在纯水和模拟体液(SBF)中的释放特性。通过体外细胞毒性研究,讨论材料表征与细胞毒性风险评价的相关性。结果:通过使用10 k D滤膜的超滤管实现了纳米银颗粒的有效分离,并通过调整释放液中氯离子/银离子的浓度比排除了SBF释放液中可能存在的氯化银颗粒物的干扰。利用所建立的规范性试验方法对实验所用的2种含银敷料进行了评价。其结果显示2种含银敷料均含纳米银,往复支架法体外释放试验显示含银烧烫伤贴24 h内在纯水和SBF中释放总银分别为5.24、12.41μg·cm-2,表明在SBF中的总银释放量高于纯水中释放量(约2倍);且SBF中银颗粒的释放比例略高于纯水中的释放比例。细胞毒性评价(MTT、LDH)的结果显示含银烧烫伤贴细胞毒性大于含银创伤贴,与总银释放量呈正相关。结论:本课题建立的含银敷料表征和银释放特性的实验方法,能够有效地判定敷料中是否含有纳米银及是否有纳米银颗粒的释放,为正确地对含银敷料进行风险评估及合理有效的监管提供科学依据。