肝细胞生长因子对心肌细胞肥大的影响

目的 探讨肝细胞生长因子（HGF）在培养新生大鼠心肌细胞肥大中的作用。方法 原代心肌细胞中进行，分对照组和不同浓度HGF组（1ng／mL、10ng／mL、100ng／mL），采用放射性同位素3H-leu掺入法检测培养心肌细胞蛋白质合成速率。应用荧光定量PCR方法检测HGF对培养心肌细胞肥大相关基因ANF、B-MHC表达的影响。结果 HGF（1ng／mL、10ng／mL、100ng／mL）作用心肌细胞24h后可明显增加心肌细胞3H—leu的掺入量，分别增高2．15、4．66、2．51倍，与对照组比较有显著性差异（P〈0．01，0．01，0．01）；并可诱导心肌细胞ANF和B-MHC表达增加，ANFmRNA表达增加平均为（2．63±0．04，4．32±0．08，3．91±0．05），分别增高1．61、3．32、2．91倍，与对照组（1±0．00）比较有显著性差异（P〈0．01，0．01，0．01）；B-MHCmRNA表达增加平均为（2．14±0．03，2．81±0．07，2．42±0．06），分别增高1．10、1．82、1．41倍，与对照组比较有显著性差异（P〈0．01，0．01，0．01）；上述结果表明1ng／mL已经起作用，10ng／mL作用最强，100ng／mLHGF有所下降。结论 肝细胞生长因子可促进心肌细胞蛋白质合成速率和心肌细胞ANF、B-MHC表达增加，它可直接促进心肌细胞的肥大。     

环孢菌素A对大鼠腹主动脉球囊损伤后内膜增生的抑制作用

目的: 探讨环孢菌素A对大鼠腹主动脉球囊损伤后内膜增生的影响。方法: 雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组(n=12)、球囊损伤组(n=12)和环孢菌素治疗组(n=12)。环孢菌素组大鼠行腹主动脉球囊损伤术前3 d开始每天灌喂环孢菌素A 12.5 mg/kg,假手术组和球囊损伤组灌喂等容积的水,直至术后30 d。球囊损伤术后30 d取材,血管组织作HE染色、免疫组化检测钙调神经磷酸酶(CaN)在血管壁中的表达,光学显微镜观察病理学改变;rea1-time PCR技术检测血管壁组织中CaN和活化T细胞核因子3(NFATc3)的表达变化。结果: 球囊损伤后血管壁出现新生内膜,形成的新生内膜厚度不均。环孢菌素治疗组与球囊损伤组相比较,内膜增生减轻,内膜/中膜厚度明显降低(P<0.05)。免疫组化检测血管壁上CaN表达,环孢菌素治疗组明显低于球囊损伤组 (P<0.05)。大鼠腹主动脉损伤后,损伤血管壁组织CaN和NFATc3 mRNA表达升高,环孢菌素治疗组与球囊损伤组相比表达明显减少(P<0.05)。结论: 环孢菌素A可能通过抑制CaN-NFATc途径减轻球囊扩张术后动脉再狭窄。     

神经肽Y对大鼠心肌细胞肌浆网钙的影响

目的观察神经肽Y（NPY）刺激对大鼠心肌细胞肌浆网（Sarcoplasmic Reticulum,SR）内钙含量的影响。方法用100nmol·L^-1NPY刺激Sprague-Dawley乳鼠心肌细胞24h,用荧光染料Fluo-4AM负载胞浆钙,并用咖啡因诱导的胞浆钙瞬变（Caffeine-induced Ca2＋ transient,CCT）幅度来反映肌浆网内总钙负荷;用荧光染料Fluo-5NAM直接标记心肌细胞肌浆网内游离钙离子。所有钙影像均由LeicaSP2激光共聚焦显微镜记录。结果经100nmol·L^-1NPY刺激24h后,心肌细胞肌浆网内游离钙含量明显低于对照组（p〈0.01）;咖啡因诱导下钙瞬变幅度也低于对照组。结论长时间的NPY刺激可导致肌浆网内钙含量减少。     

hBcl-2和hVEGF165双基因共表达重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建hBcl-2和hVEGF165双基因共表达的重组腺病毒载体,为后续基因转染和动物实验提供实验基础。方法通过RT-PCR从A549细胞中分别获得hBcl-2和hVEGF165基因片段,并克隆到pMD-19T载体。将目的基因hBcl-2、IRES元件和hVEGF165依次定向克隆到腺病毒穿梭载体质粒pAd-Track-CMV上。线性化重组穿梭质粒后通过电穿孔转化含有腺病毒骨架质粒pAd-easy-1的感受态大肠杆菌BJ5183构建重组腺病毒载体质粒。脂质体转染线性化的重组腺病毒载体质粒于HEK293细胞以包装制备重组腺病毒。重组腺病毒经PCR鉴定之后进一步扩增、纯化。通过荧光计数确定病毒感染滴度。结果克隆的hBcl-2和hVEGF165基因测序正确,酶切重组穿梭载体质粒和腺病毒载体质粒得到特异酶切产物,重组腺病毒载体质粒转染HEK293细胞3 d后观察到GFP的表达,重组腺病毒的PCR得到hBcl-2和hVEGF165基因的PCR产物,滴度测定为5×109pfu/mL。结论成功构建制备了高滴度的hBcl-2和hVEGF165双基因共表达的重组腺病毒载体,为联合基因治疗心肌梗死的研究提供实验基础。     

两种中药合剂对悬吊大鼠生理防护效应的初步观察

目的：观察两种中药合剂对模拟失重大鼠血液循环，肌肉、骨骼系统的影响。方法：比较4组大鼠（对照组，悬吊组，中药1组，中药2组，n=15)在30d实验后血循环，肌肉，骨骼系统各项生理指标的变化。结果：两种中药合剂具有明显改善模拟失重鼠血循环的作用，对骨骼和肌肉系统也有一定的改善作用。结论：中药作为失重的防护措施是可行的，应进一步研究。     

模拟失重大鼠血液流变学异常与肌肉退行性变化的中药防护

目的观察四组中药合剂对尾吊大鼠血液流变学异常和肌肉退行性变的防护作用.方法采用大鼠头低位30°尾部悬吊模型模拟失重对机体的影响.120只SD雄性大鼠随机分为6组:对照组、单纯尾吊组、丹黄刺组(尾吊同时给予丹参、黄芪和刺五加生药的水煎剂)、参川熟组(尾吊同时给予川芎生药、熟地和人参地上甙的水煎剂)、参山杜组(尾吊同时给予西洋参、山楂、杜仲生药的水煎剂)、参银生组(尾吊同时给予人参根、银杏叶、生地的水煎剂). 实验第30d,经心脏取血,检测全血粘度、红细胞变形性、纤维蛋白原含量、血细胞压积、红细胞形态、肌肉重量、肌纤维类型和面积等指标.结果单纯尾吊导致大鼠体重明显降低(p<0.001),肌肉重量、肌肉纤维面积、Ⅰ型纤维比例显著下降(p<0.05,0.01),中切和低切血粘度、纤维蛋白原含量、异形红细胞比例明显增高(p<0.001);红细胞最大变形指数(DImax)和积分变形指数(IDI)(p<0.001,0.01)、血细胞压积明显降低(p<0.001).中药合剂组与单纯尾吊组相比, 血液流变学指标有较大改善,并可显著增加尾吊大鼠腓肠肌重量(p<0.05).结论中药合剂可改善尾吊导致的血液流变学及肌肉组织改变.     

伊贝沙坦对血管紧张素Ⅱ所致心肌细胞蛋白质合成和肌球蛋白重链表达的影响

目的 观察伊贝沙坦对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）所致心肌细胞中蛋白质合成速率及肌球蛋白重链（MHC）基因表达改变的影响.方法 以AngⅡ及伊贝沙坦分别或同时作用于培养的细胞.采用放射性同位素[^3H]-leu掺入法检测培养心肌细胞蛋白质合成速率.应用荧光定量PCR方法检测心肌细胞心房利钠肽因子（ANF）以及α-MHC、β-MHC的表达.结果 AngⅡ处理使心肌细胞中[^3H]-Leu掺人增加（P＜0.05）,同时ANF mRNA的表达明显高于正常（P＜0.05）;α-MHC mRNA的表达显著低于正常（P＜0.05）,而β-MHC mRNA的表达显著高于正常（P＜0.05）,α-MHC/β-MHC的比值下降（P＜0.05）.当伊贝沙坦与AngⅡ共同作用于培养的心肌细胞时,与AngⅡ组比较,[^3H]-Leu的掺入明显下降（P＜0.05）,与正常组比无统计学意义（P＞0.05）;同时ANF的表达下降,与正常组比无统计学意义（P＞0.05）;心肌细胞中α-MHC的表达明显增高（P＜0.05）,而β-MHCmRNA的表达显著降低（P＜0.05）,α-MHC/β-MHC的比值上升（P＜0.05）.结论 伊贝沙坦能抑制AngⅡ所致的心肌细胞肥大和细胞中α-MHC向β-MHC表达的转换.     

出舱活动对心血管系统的影响

舱外活动（EVA）是指航天员离开座舱在太空的微重力环境或其他星球中从事的运动，它是保障航天中航天员正常生活和工作及未来太空探险必不可缺少的一项活动。在载人航天计划的实施过程中，EVA已从偶尔、短暂的事件演变为长时间的、极富成效和大有用处的航天员工作，成为载人航天获得迅速发展的重要因素。从1965年3月18日苏联航天员列昂诺夫完成首次EVA，截至2005年底，共有154名航天员完成了245次EVA，EVA达474人次，在舱外停留的时间累计236h45min。     

神经肽Y(NPY)诱导大鼠心肌细胞肥大的效应观察

目的 :观察神经肽Y(NPY)诱导大鼠心肌细胞肥大效应。方法 :用不同浓度NPY(10nmol/L、10 0nmol/L)刺激心肌细胞 ,应用3 H Leu掺入量法测定心肌细胞蛋白质合成速率、RT PCR法测心肌细胞c junmRNA表达。结果 :1.心肌细胞3 H Leu掺入量测定 :较大剂量NPY刺激心肌细胞蛋白合成速率显著增加。与对照组相比 ,NPY10nmol/L组3 H Leu掺入量有所增高 ,但差异无显著性 ,而NPY10 0nmol/L组心肌细胞 3H Leu掺入量较对照组明显增高 (P <0 .0 5 )。 2 .心肌细胞内c junmRNA表达 :NPY组心肌细胞c junmRNA的RT PCR产物量明显高于对照组(P <0 .0 0 1)。结论 :NPY刺激心肌细胞蛋白质合成增加、心肌细胞原癌基因 (肥大早期反应基因 )c junmRNA表达增加 ,提示NPY可通过其生长因子样效应 ,诱导心肌细胞肥大。     

神经肽Y经Ca2+/CaM依赖的钙调神经磷酸酶途径诱导心肌细胞肥大

目的 观察神经肽Y(NPY)诱导心肌细胞肥大效应,及Ca2+/CaM依赖的钙调神经磷酸酶(CaN)途径在其中起的作用.方法 用NPY(10、100nmol)刺激心肌细胞,用环胞索A(CsA)特异性抑制CaN活性.测定心肌细胞蛋白合成速率(3H-Leu掺入量)、CaN-蛋白表达、c-jun mRNA表达、CaN酶活性、细胞内游离钙含量.结果 (1)在100nmol NPY作用下,心肌细胞3H-Leu掺入量及c-jun mRNA表达量均较对照组显著增高(P<0.05,P<0.001).NPY+CsA组和对照组相比无显著差别.(2)在100 nmol NPY作用下,NPY组心肌细胞内CaN酶比活力、CaN-α表达、胞浆及核内钙含量较对照组显著增高(P<0.05,P<0.05,P<0.001,P<0.001).结论 NPY可刺激心肌细胞肥大,CaN信号途径在其中起重要作用.