自身免疫性血小板减少性紫癜相关抗体的研究

目的　探索对自身免疫性血小板减少性紫癜 (AITP)诊断特异和敏感的实验方法。方法　采用单克隆抗体特异性俘获血小板抗原技术 (MAIPA技术 )并加以改进 ,对比检测血小板洗脱液和血浆中血小板膜糖蛋白特异性抗体。结果　AITP患者血浆游离抗血小板膜糖蛋白 (GPⅡb Ⅲa、GPⅠb Ⅸ )抗体总阳性率为 38.89%(5 4例中 2 1例 ) ,洗脱血小板表面抗血小板膜糖蛋白 (GPⅡb Ⅲa、GPⅠb Ⅸ )抗体总阳性率为 6 8.5 2 %(5 4例中 37例 ) ,两者差异有显著性 (校正 χ2 =19.39,P <0 .0 0 5 )。原发AITP组血浆游离及洗脱血小板表面抗血小板糖蛋白 (GPⅡb Ⅲa、GPⅠb Ⅸ )特异性抗体总阳性率与继发性AITP组比较差异无显著性。AITP患者血小板数量与自身抗体滴度呈明显负相关。结论　MAIPA法检测血小板洗脱液中抗血小板糖蛋白抗体在AITP的诊断和治疗中具有高度特异性 ,且敏感性较血浆抗体检测显著提高。     

高血压病患者血栓前状态的临床研究

目的通过观察高血压病患者血栓前状态分子标志物的变化,探讨其易并发血栓性疾病的机制,为临床早期诊治提供客观依据。方法对山东省血栓病防治工程技术研究中心与山东省交通医院2000-04~2004-05的1000例高血压病患者及100例健康对照者的血浆血栓前状态(PTS)分子标志物进行检测,包括:血管性血友病因子(vWF)、血小板α-颗粒膜蛋白-140(GMP-140)、11-去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)、纤维蛋白原(FIB)、抗凝血酶(AT);组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)的活性水平及血液流变学指标,并进行分析与评价。结果与对照组相比,高血压病患者的血浆vWF、GMP-140、11-DH-TXB2、FIB含量,PAI-1活性及血黏度均明显升高,而AT含量、t-PA活性均明显下降,差异极其显著(P<0·01)。随着血压升高,PTS标志物变化越显著(P<0·05)。结论高血压病患者存在PTS,PTS与其病情进展、血栓性疾病的发生密切相关。     

凝血和抗凝及纤溶功能改变在进展型脑梗死患者中的临床意义

目的研究进展型脑梗死患者凝血、抗凝和纤溶系统功能指标的变化,探讨进展型脑梗死的发病机制,为其临床早期诊断和治疗提供依据。方法对比检测了209例进展型脑梗死患者与209例完全型脑梗死患者血浆凝血酶原时间、凝血酶时间、部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、血小板聚集率、血管性血友病因子含量、抗凝血酶、组织型纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制剂-1活性水平。结果与完全型脑梗死患者比较,进展型脑梗死患者的血浆凝血酶原时间、凝血酶时间、部分凝血活酶时间显著缩短,抗凝血酶、组织型纤溶酶原激活物水平显著降低,而纤维蛋白原、血小板聚集率、血管性血友病因子、纤溶酶原激活物抑制剂-1水平显著升高(P<0.01)。结论进展型脑梗死患者存在着明显的高凝血和较低的抗凝和纤溶活性。     

特发性血小板减少性紫癜患者脾脏CD5+和CD5-B细胞共同参与血小板自身抗体的产生

目的：研究慢性特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者脾脏CD5^ B细胞水平的变化及CD5^ 和CD5^-B细胞与血小板膜糖蛋白（GP）特异性自身抗体产生的关系，以识别致病B细胞亚群。方法：应用双色流式细胞仪检测8例慢性ITP患者脾脏CD5^ B细胞水平。选择4例血浆抗GPⅡb/Ⅲa和抗GP Ⅰb/Ⅸ抗体双阳性ITP切脾患者，应用Ficoll密度梯度离心及花环形成分离法分离脾脏B淋巴细胞，继而采用镝产珠分选法分选、纯化CD5^ B细胞和CD5^-B细胞，并分别进行体外培养，应用改良MAIPA法检测血浆和细胞培养上清液的血小板特异性抗体。结果：ITP患者脾脏CD5^ B细胞水平圈晨自身免疫性疾病患者略有增高，二者之间差异无统计学意义。CD5^ B细胞水平与患者血小板计数无相关性。4例血浆抗GPⅡb/Ⅲa抗体和抗GPⅠb/Ⅸ抗体双阳性。另外1例CD5^ B细胞培养液抗GPⅡb/Ⅲa抗体阴性，抗GPⅠb/Ⅸ抗体阳性;CD5^-B细胞培养液抗GPⅡb/Ⅲa抗体和抗GPⅠb/Ⅸ抗体双阳性。结论：脾脏CD5^ 和CD5^-B细胞 均可产生血小板GP特异性自身抗体，抗体产生种类和滴度无明显差异。提示二者共同参与了ITP的发病过程。     

应用基因表达谱芯片研究骨髓基质细胞诱导分化为成骨细胞中基因表达水平的变化

目的 探讨骨髓基质细胞（MSC）诱导分化为成骨细胞过程中各基因表达水平的变化,同时为合理选择及构建符合临床需求的组织细胞系在基因水平上寻求理论依据.方法 无菌条件下分离SD大鼠MSC进行原代培养,根据培养体系不同,将其分为两组：①诱导分化组（6例）,采用含浓度为1×10-8mol/L地塞米松,浓度为10 mmol/L β-甘油磷酸钠及浓度为50 mg/L维生素C的诱导性DMEM培养基进行诱导分化培养;②对照组（6例）,采用DMEM培养基进行同步培养.通过倒置相差显微镜观察诱导分化组与对照组MSC的形态特征,并采用茜素红染色观察细胞的生长与分化情况.采用基因表达谱芯片杂交技术选出诱导分化组与对照组的表达水平存在差异的基因,并对差异基因进行生物学功能分析.结果 ①分离MSC进行原代培养.培养72 h后,MSC开始增殖,细胞形态多呈梭形、三角形或不规则细胞形态.继续培养6～7 d后,细胞逐渐形成散在的细胞集落,多呈成纤维细胞形态.培养10～12 d后,MSC集落间相互融合成单层细胞.②MSC传代培养,诱导分化组细胞与对照组相比细胞增殖速度缓慢,细胞形态多呈梭形或多角形,且逐渐向成骨细胞转变;培养10～12 d后,密集的细胞间出现较多散在的致密圆形透光性差的钙化结节;钙化结节经茜素红染色呈片状棕染,茜素红染色呈显著阳性.对照组细胞增殖迅速,多呈成纤维细胞形态生长,在常规培养14 d后未出现明显钙化结节.③诱导分化组细胞内表达水平发生改变的基因占总有效基因的27.7％,显著高于对照组MSC传代培养中表达水平发生改变的基因数,差异有统计学意义（P=0.01）.诱导分化组细胞与原代细胞、对照组细胞基因表达水平的相关性较低（R2 =0.524 8,0.495 4）,诱导分化组细胞表达水平发生改变的基因数目增多.诱导分化组与对照组MSC表达水平存在＞3倍差异的部分已知基因,包?     

降纤酶治疗急性脑梗塞31例临床观察

降纤酶是我国新近研制的新型强力单成分溶血栓治疗剂。我们于1999-01／12期间应用降纤酶治疗急性脑梗塞患31例，疗效满意，现报告如下。     

老年原发性高血压患者血栓前状态的研究

目的 探讨老年原发性高血压（EH）患者血栓前状态（PTS）分子标志物的变化及其易并发血栓性疾病的机制。方法 测定100例老年EH患者及100例老年健康对照者的血浆血管性血友病因子（vWF）、血小板α-颗粒膜蛋白-140（GMP-140）、纤维蛋白原（Fg）、凝血酶原片段1＋2（F1＋2）的含量，抗凝血酶（AT）、组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）的活性及血液流变学指标，并进行了分析与评价。结果 老年EH病人血浆vWF、GMP-140、Fg、F1＋2含量、PAI-1活性、血黏度较对照组均明显升高，而AT、t-PA活性均明显下降（P〈0.01）。随着血压水平升高，PTS标志物水平变化越明显。结论 PTS与老年EH患者的病情发展及血栓性疾病的发生密切相关。     

高血压病患者血栓前状态的临床研究

目的 通过观察高血压病患者血栓前状态分子标志物的变化，探讨其易并发血栓性疾病的机制，为临床早期诊治提供客观依据。方法 对山东省血栓病防治工程技术研究中心与山东省交通医院2000—04—2004—05的1000例高血压病患者及100例健康对照者的血浆血栓前状态（PTS）分子标志物进行检测，包括：血管性血友病因子（vWF）、血小板α-颗粒膜蛋白-140（GMP-140）、11-去氢血栓烷B2（11-DH—TXB2）、纤维蛋白原（FIB）、抗凝血酶（AT）；组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）、纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）的活性水平及血液流变学指标，并进行分析与评价。结果 与对照组相比，高血压病患者的血浆vWF、GMP-140、11-DH—TXB2、FIB含量，PAI—1活性及血黏度均明显升高，而AT含量、t—PA活性均明显下降，差异极其显著（P〈0．01）。随着血压升高，PTS标志物变化越显著（P〈0．05）。结论 高血压病患者存在PTS，PTS与其病情进展、血栓性疾病的发生密切相关。     

利伐沙班在低相对分子质量肝素诱导的血小板减少患者中的应用探讨

1病例介绍患者男,59岁,因"左下肢肿胀30 h"于2012年5月23日入院。既往有"直肠癌"病史半年。2012年4月16日在北京301医院行直肠癌根治术,术后给予乐沙定及5-FU化疗1个疗程后,出现左下肢胀痛,以左小腿为著,局部皮温高,活动后肿痛加重,休息后略有减轻,即收住院。入院查体:T 37.2℃,BP 120/89 mmHg,心肺无异常,腹软,左腹部可见结肠造瘘口。     

急性脑梗死死亡与多脏器系统功能衰竭

目的 探讨脑梗死急性期死亡与多脏器系统功能衰竭的关系。方法 收集脑梗死急性期死亡病例112例，分析其性别、原发性高血压、梗死后高血糖、梗死部位及梗死灶大小对脏器功能衰竭的影响。结果 多脏器系统功能衰竭女性明显高于男性(P＜0．05)，原发性高血压及梗死后高血糖病人非常明显地高于血压、血糖正常者(P＜0．01)，多脏器系统功能衰竭与梗死部位有关而与梗死灶大小无关。结论 脑梗死急性期病死率与多脏器系统功能衰竭密切相关，预防和治疗多脏器系统功能衰竭能有效降低梗死急性期病死率。