IL-12~+重组卡介苗降低哮喘小鼠气道炎症的作用及其机制研究

目的探讨IL-12+重组卡介苗(recombinant balillus calmette-guerin secreting IL-12,rBCG)新生期接种对实验性哮喘小鼠气道炎症和气道高反应(airway hyperresponsiveness,AHR)的作用及其可能机制。方法新生Balb/c小鼠分4组:对照组(control组),卵白蛋白(OVA)组,rBCG干预(rBCG/OVA)组,rBCG/OVA/IFN-gamma中和抗体(rBCG/OVA/anti-IFN-gamma Ab)组。除对照组外,其余3组均给予OVA致敏和激发。最后一次激发后测24 h内AHR,观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavage fluid,BALF)中细胞总数及分类,评估肺部炎症变化程度,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测BALF中IFN-gamma、IL-10水平。结果 1)OVA组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞绝对计数和炎症病理评分均明显高于对照组,rBCG/OVA组上述内容均显著低于OVA组。2)新生期rBCG接种能显著降低哮喘小鼠模型的气道高反应性。3)rBCG/OVA组支气管肺泡灌洗液中IFN-gamma、IL-10水平明显高于OVA组。4)rBCG/OVA组与接种rBCG同时并使用anti-IFN-gamma Ab的哮喘小鼠相比气道炎症和AHR无显著差异。结论新生期rBCG接种能抑制哮喘小鼠气道炎症和AHR,促进IFN-gamma和IL-10的产生,其抗哮喘效应可能与其促进IL-10分泌有关。     

白藜芦醇对呼吸道合胞病毒感染小鼠肺部病毒滴度及其气道炎症的影响

目的 研究白藜芦醇(resveratrol,RES)对呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）感染小鼠肺部病毒滴度及其所致气道炎症的影响。方法6～8周龄雌性BALB/c小鼠,环磷酰胺100 mg/kg腹腔注射后,随机分为对照组、RSV感染组、白藜芦醇腹腔注射组、白藜芦醇雾化组,每...     

沉默A549细胞中的CD46和DSG2可抑制人3型和7型腺病毒的侵入及IL-8的释放

目的 探讨沉默受体CD46、桥粒芯蛋白（DSG2）对人3型腺病毒（HAdV-3）和7型腺病毒（HAdV-7）的侵入及炎症因子释放的影响。方法 通过RNA干扰技术沉默A549细胞中CD46、DSG2的表达。实验分为HAdV-3组、HAdV-3+siRNA-NC组（siRNA无关序列对照组）、HAdV-3+siRNA-CD46组（转染siRNA-CD46）、HAdV-3+siRNA-DSG2组（转染siRNA-DSG2）;HAdV-7组、HAdV-7+siRNA-NC组（siRNA无关序列对照组）、HAdV-7+siRNA-CD46组（转染siRNA-CD46）、HAdV-7+siRNA-DSG2组（转染siRNA-DSG2）。HAdV-3、7感染A549细胞后0.5、2 h,通过激光共聚焦显微镜观察两种腺病毒与受体CD46、DSG2结合水平;体外转染siRNA-CD46、siRNA-DSG2后不同时间点,qRT-PCR技术检测HAdV-3、7拷贝数,ELISA检测转染后IL-8表达情况。结果 腺病毒感染A549细胞后0.5、2 h,HAdV-3、7与其受体CD46、DSG2结合共定位;腺病毒入胞后,随时间延长,病毒拷贝数增加,转染 siRNA-CD46 后 2、6、12、24 h,HAdV+siRNA-CD46 组的病毒拷贝数较 HAdV 组降低（HAdV-3+siRNA-CD46 vs HAdV-3：6 h,P<0.05;12、24 h,P<0.0001;2 h,降低趋势无统计学差异;HAdV-7+siRNA-CD46 vs HAdV-7：2 h, P<0.01;6 h,P<0.001;12、24 h,P<0.0001）。转染siRNA-DSG2后2、6、12、24 h,同样明显降低了病毒载量（HAdV-3+siRNA-DSG2 vs HAdV-3,HAdV-7+siRNA-DSG2 vs HAdV-7,P<0.0001）。HAdV-3、7 感染 A549 细胞后,炎症因子 IL-8 释放增多（P<0.0001）,沉默CD46和DSG2的表达后2、6 h,炎症因子IL-8水平降低（P<0.0001）。结论 HAdV-3、7与其受体CD46、DSG2结合后入胞,病毒拷贝数随时间延长而增加,沉默CD46、DSG2后,抑制HAdV-3、7型腺病毒的侵入及IL-8释放。     

呼吸道合胞病毒感染后期Poly(I:C)诱发小鼠气道炎症及其机制研究

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染后再发呼吸道病毒感染时诱发气道炎症及反复喘息的致病机制。方法 64只6~8周雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、RSV组、Poly(I:C)组及RSV+Poly(I:C)组(n=16)。收集各组肺泡灌洗液(BALF),计数BALF中细胞总数及分类计数,苏木精-伊红(HE)染色观察肺部病理损伤,检测小鼠气道反应性(AHR),ELISA法检测BALF中IFN-γ、IL-4、IL-13、基质金属蛋白酸9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)水平。结果 RSV+Poly(I:C)组小鼠的气道炎症细胞浸润总数及AHR较其他3组显著增高(P0.05)。RSV+Poly(I:C)组小鼠的肺组织病理损伤较对照组及RSV组加重(P0.01);BALF中MMP-9水平较其他3组明显升高(P0.05),IL-4及TIMP-1显著低于RSV组(P0.01)。结论 RSV感染后病毒再感染可能引起MMP-9/TIMP-1表达失衡,加重气道炎症反应。     

2013~2018年重庆地区2 066例急性下呼吸道感染住院患儿呼吸道合胞病毒流行特征分析

目的 研究急性下呼吸道感染住院患儿呼吸道合胞病毒（RSV）检出率、流行规律及临床特征。方法 收集2013年6月至2018年5月于重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心住院的2岁以下急性下呼吸道感染（ALRI）患儿鼻咽抽吸物,采用多重PCR检测16种常见呼吸道病毒,分析RSV流行特征。结果 共纳入2 066例ALRI住院患儿,病毒检出阳性1 595份（77.20%）。其中RSV阳性检出826份（39.98%）。RSV阳性样本中,RSV-A阳性410份（49.6%）,RSV-B阳性414份（50.1%）,RSV-A与RSV-B均阳性2份（0.2%）。2013~2014年、2016~2017年主导流行亚型为RSV-B,2014~2015年、2017~2018年以RSV-A为主要检出亚型,2015~2016年为RSV-A与RSV-B共同流行。冬季检出率最高。RSV合并人鼻病毒为最常见的2种病毒混合检出组合（123份）。该组患儿较单一RSV检出患儿更易出现喘息（P=0.030）。在2 066例患儿中,单一RSV检出298份,RSV混合其他病毒检出148份,其他病毒检出389份,病毒检出阴性241份。RSV单一检出组较其他病毒检出组和病毒检出阴性组月龄更小,更易发生呼吸困难、呼吸衰竭及重症下呼吸道感染（P < 0.0083）。RSV-A阳性患儿中的男性比例高于RSV-B阳性患儿（P=0.004）,而临床表现二者未见显著差异。结论 2013~2018年重庆地区RSV-A与RSV-B既可分别主导流行,也可共同流行;RSV为急性下呼吸道感染住院患儿最主要病毒病原,易导致重症下呼吸道感染;RSV-A和RSV-B感染患儿临床表现无差异,但RSV-A更易感染男性患儿。     

应用抗生素清除咽部菌群对RSV感染后小鼠肺部CD11c~+细胞的影响

目的探讨呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染后,使用广谱抗生素头孢哌酮引起的咽部优势菌群清除对其气道炎症、气道高反应,以及对肺部CD11c+细胞状态的影响。方法 3周龄雌性Balb/c随机分入空白对照组、RSV感染组和RSV感染后口服头孢哌酮组。7 d后检测口服头孢哌酮对咽部优势菌群的清除作用,并对各组小鼠进行肺泡灌洗液炎症细胞分类计数、病理切片HE染色及气道高反应性检测,流式细胞术检测肺部CD11c+细胞MHC-II及共刺激分子表达。结果 1)正常小鼠咽部优势菌群为链球菌,RSV感染未影响咽部优势菌群的改变,口服头孢哌酮可有效清除链球菌;2)RSV感染后急性期支气管肺泡灌洗液中炎症细胞明显增多[(13.20±1.72)×105 vs(6.17±0.28)×105 cells/ml,P<0.05],肺部病理损伤加重,气道高反应性轻微上升,肺部CD11c+细胞上MHC-II表达较空白对照明显上调(平均荧光强度:14 205±1 519 vs 9 707±1 140,P<0.05);头孢哌酮致咽部优势菌的清除未进一步加重气道炎症及气道高反应性,但在一定程度上抑制了CD11c+细胞的成熟,表现为单个细胞表面MHC-II表达水平较单独感染RSV组降低,与空白对照无明显差异。结论 Balb/c小鼠感染RSV同时使用广谱抗生素头孢哌酮导致咽部优势菌被清除,可能减少抗原对肺部CD11c+细胞刺激,从而一定程度上影响CD11c+细胞的成熟。     

COVID-19流行期间儿童家长认知、态度及防控行为的调查与分析

目的：调查并分析18岁以下儿童家长对新型冠状病毒肺炎（coronavirus disease 2019,COVID-19）的认知、态度及家庭防控行为,以便医疗卫生人员更好地了解儿童家长需求,制定科学、针对性的健康教育策略。方法：采用滚雪球抽样方法,利用自行设计的调查问卷,通过网络收集全国各省市18岁以下儿童家长填写的问卷,共1 020份。结果：73.2%的儿童家长对COVID-19及其相关知识知晓率较高、47.1%的儿童家长对COVID-19预防控制持有积极乐观态度、87.5%的儿童家长COVID-19防控行为很好。而与儿童相关的新型冠状病毒感染预防知识知晓率为50%左右,36%的儿童出现过情绪不稳定、孤独、焦虑等不良情绪,67.5%的儿童家长出现情绪不稳定、焦虑等不良情绪;Pearson相关分析结果显示,认知、态度、防控行为得分三者间呈正相关,单因素分析结果显示仅儿童家长职业影响知信行（P＜0.05）。结论：医疗卫生人员可通过多种途径普及与儿童相关的COVID-19预防知识,重点关注儿童及家长的心理问题,并针对性地给予指导。     

下肢骨折术后深静脉血栓形成的原因及护理

下肢深静脉血栓形成(DVT)是下肢骨折术后常见并发症之一,且一旦发生轻者早期造成肢体肿胀、疼痛、功能障碍,严重者静脉血栓可进入肺循环发生肺动脉栓塞而危及生命.如何针对下肢骨折患者的特点及特殊性,尽可能的预防下肢静脉血栓的发生,做好护理,下面就针对这一并发症发生的原因及有效预防方法进行一下探讨.     

地龙散联合芒针深刺阿是穴治疗第三腰椎横突综合征疗效观察

目的观察地龙散联合芒针深刺阿是穴治疗第三腰椎横突综合征的临床效果。方法将80例第三腰椎横突综合征患者随机分为2组,对照组给予地龙散+普通针刺治疗,观察组给予地龙散+芒针深刺阿是穴治疗,观察2组治疗20 d后的临床疗效及治疗前后日常生活能力(ADL)评分、临床体征评分、疼痛评分变化情况。结果观察组治疗20 d后的临床总有效率明显高于对照组;2组治疗后VAS评分、日常生活能力评分、临床症状评分均较治疗前明显降低(P均<0.05),且观察组各项评分均明显低于对照组(P均<0.05);2组均未见明显不良反应。结论地龙散联合芒针深刺阿是穴治疗第三腰椎横突综合征疗效显著,且安全性好,值得临床推广应用。     

安徽省某镇空巢老人抑郁因素分析

目的:了解安徽省某镇空巢老人抑郁现状,分析其相关影响因素。方法:采用整群抽样方法选择安徽省某镇作为研究地区,以生活质量问卷SF-36及抑郁自评量表SDS对60岁以上老人进行调查。结果:共调查695名老人,抑郁症状检出率为20.43%;其中非空巢老人352人,抑郁症状检出率为13.92%;空巢老人343人,抑郁症状检出率为27.11%,其中空巢夫妻同住老人256人,抑郁症状检出率为25.78%;空巢独居老人87人,抑郁症状检出率为31.03%;空巢独居老人抑郁症状检出率最高,差异有统计学意义(P<0.001)。Logistic回归分析显示性别(OR=0.543)、经济收入(OR=0.518)、对生活满意度(OR=0.499)、家庭关系(OR=1.632)与抑郁症状相关。结论:空巢老人的抑郁症状发生率较高,影响因素复杂,我们应加强对空巢老人特别是独居空巢老人的关注,从提高经济收入、改善家庭关系等方面有针对性地提供更多的社会支持。