血液来源人葡萄球菌生物被膜形成能力及耐药性的研究

目的探究人葡萄球菌生物被膜能力和耐药性,为预防与治疗提供理论依据。方法收集临床分离血液来源人葡萄球菌,琼脂稀释法检测16种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),通过耐苯唑西林表型和mecA基因型以准确区分耐甲氧西林人葡萄球菌(MRSHo)和甲氧西林敏感人葡萄球菌(MSSHo),比较二者在耐药性上的差异;体外微孔板黏附实验(TCP)测定生物被膜,并分析其对耐药性的影响。结果收集菌株共计55株,药物耐药率由高到低分别为青霉素92.73%、红霉素87.27%、苯唑西林83.64%、克林霉素67.27%、复方磺胺甲噁唑65.45%、环丙沙星47.27%、左氧氟沙星47.27%、四环素41.82%、莫西沙星34.55%、利福平16.36%和庆大霉素10.91%及万古霉素、利奈唑胺、普丁/达福、呋喃妥因和替加环素0.00%,无耐药株检出。46株(83.6%)mecA阳性为MRSHo,与MSSHo相比MRSHo更易对青霉素、四环素、奎诺酮类及复方磺胺甲噁唑耐药,差异有统计学意义(P0.05)。35株(63.6%)可产生物被膜,生物被膜阴阳性菌株组间在16种抗菌药物耐药性比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论临床分离血液来源人葡萄球菌易产生物被膜、甲氧西林耐药率高、MRSHo常为多重耐药。     

抗癌药物羟基喜树碱对PC12细胞毒副作用的研究

目的 研究抗癌药物羟基喜树碱(HCPT)对PC12细胞的毒副作用,探讨HCPT对神经系统的副作用.方法 用CCK-8试剂盒(cell counting kit-8)测定不同浓度的HCPT对PC12细胞的生长抑制作用;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色观察细胞生长情况;琼脂糖凝胶电泳验证细胞凋亡的特征性DNA条带;流式细...     

血液来源携带psm-mec基因人葡萄球菌SCCmec型别分析与生物被膜能力的研究

目的研究血液来源携带psm-mec基因人葡萄球菌SCCmec型别和psm-mec基因与生物被膜的相关性,为其临床感染的防治提供依据。方法收集临床血液来源经全自动微生物鉴定仪确认的人葡萄球菌。通过PCR扩增mecA基因区分耐甲氧西林人葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus hominis,MRSHo)和甲氧西林敏感人葡萄球菌(methicillin-susceptive Staphylococcus hominis,MSSHo)。体外粘附实验(Microtite Plate Assay,TCP)检测生物被膜。PCR扩增psm-mec基因并测序,分析其与生物被膜的相关性。PCR扩增psm-mec与mecR1及xylR基因的间隔序列和对psm-mec基因阳性菌株做SCCmec、mec和ccr型别检测,探究其在SCCmec上的定位与分布特征。结果共收集菌株55株,其中46株检出mecA基因为MRSHo,18株携带psm-mec基因,35株产生物被膜。携带与未携带psm-mec基因的菌株形成生物被膜的比率分别为83.33%和54.1%,二者差异显著(P=0.03)。DNA测序显示,3株psm-mec阳性生物被膜阴性的菌株中,2株于psm-mec编码区上游-12处发现G>A的点突变。所有psm-mec与mecR1及xylR的基因间隔序列阳性。携带psm-mec基因菌株分为,2株SCCmecⅢ型,7株Ⅲ型的变异型,9株SCCmec新型别;所有菌株均为Class A类mec;6株为ccr type 1,1株为ccr type 1+2,2株为ccr type 1+3,2株为ccr type 3,7株未扩增出ccr。结论在血液来源人葡萄球菌中,psm-mec基因与生物被膜存在相关性,其定位于mecR1与xylR两个基因之间,主要分布于SCCmecⅢ型、Ⅲ型变异型和新型别中,ccr基因存在高度变异,是造成SCCmec多态性的原因。     

舒芬太尼对腹腔镜手术患者术中应激反应的影响

摘 要 目的: 探讨舒芬太尼对腹腔镜手术患者血流动力学、血清皮质醇及β-内啡肽水平的影响。方法: 将68例腹腔镜胆囊切除术患者随机分为舒芬太尼组与芬太尼组,分别使用舒芬太尼与芬太尼静脉麻醉。观察两组患者各时点血流动力学、血清皮质醇及β-内啡肽水平变化。结果:芬太尼组气腹后20 min 平均动脉压（MAP）较麻醉前明显上升(P<0.05),高于同时点舒芬太尼组(P<0.05),解除气腹后60 min MAP降到麻醉前水平;两组气腹后20 min、解除气腹后60 min血清皮质醇及β 内啡肽均较麻醉前明显上升(P<0.05),而舒芬太尼组上升幅度明显低于芬太尼组(P<0.05);舒芬太尼组和芬太尼组发生药物不良反应的例数分别为6例和9例（P>0.05),症状均较轻微。结论:舒芬太尼静脉麻醉较芬太尼麻醉能更好抑制CO2气腹刺激引起的机体应激反应,维持血流动力学的稳定,不良反应轻,安全性较好。     

四种检测法在乙腈沉淀法去除血清蛋白中的比较

目的比较四种方法在乙腈沉淀法去除血清蛋白中的检测效果,建立一种能快速检测去蛋白率的方法。方法用乙腈沉淀法去除血清蛋白,分别应用四种不同的检测分析方法,方法Ⅰ通过真空冻干;方法Ⅱ通过真空干燥;方法Ⅲ通过设立对照调零;方法Ⅳ通过挥干乙腈,分析血清蛋白的去除率。结果方法Ⅰ和方法Ⅱ耗时长、设备要求高;方法Ⅲ耗时最短、方法简便;方法Ⅳ耗时较短、但容易产生实验误差,方法Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的蛋白去除率结果比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,与方法Ⅳ比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论方法Ⅲ为最佳的分析测定分析方法,可用于快速方便了解乙腈的去蛋白率。     

四川地区一般人群不同月份维生素D营养状况的初步分析

目的探讨四川地区一般人群血清25-羟基维生素D(25OHD)水平和维生素D的营养状况,并分析其在不同性别、年龄和月份的变化情况。方法对14 645例来源于四川地区的一般人群,通过电化学发光法检测其血清25OHD水平,定义血清25OHD30ng/mL为正常;20ng/mL≤25OHD≤30ng/mL为不足;25OHD 20ng/mL为缺乏。根据性别和年龄进行分组,分别统计各组25OHD水平、维生素D营养状况,并分析其不同月份的变化趋势。结果受试者血清25OHD平均水平为(22.12±10.95)ng/mL;维生素D缺乏、不足和正常的比例分别为50.45%、32.14%和17.41%;男性组维生素D缺乏明显低于女性组,男性维生素D正常率明显低于女性组,男性组人群血清25OHD水平高于女性组;18岁、≥60岁、45～60岁和18～45岁人群组维生素D缺乏率分别为29.02%、47.37%、55.91%和64.57%;1月人群维生素D正常率最低(8.34%),7月最高(26.02%),1—7月人群维生素D正常率逐渐升高,7月之后呈下降趋势;2月人群血清25OHD水平最低为(17.43±9.99)ng/mL,7月份达到最高(25.56±11.67)ng/mL。结论四川地区一般人群血清25OHD水平偏低,维生素D不足和缺乏在人群中非常普遍,尤其是在18～45岁人群和女性人群中,不同月份人群25OHD水平和缺乏率差异较大。     

羟基喜树碱抑制肺癌A549细胞的体外增殖并下调Bcl-2基因的表达

目的研究羟基喜树碱对肺癌A549细胞生长抑制、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法羟基喜树碱处理A549细胞后用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色观察细胞形态学变化,琼脂糖凝胶检测DNA片段化,用流式细胞仪测定其对细胞周期影响。利用Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2的表达变化。结果 A549细胞经羟基喜树碱作用,提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带。经AO/EB染色,荧光显微镜下观察到早期凋亡细胞细胞核被染成绿色,呈碎片状,晚期凋亡细胞核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状,细胞周期S期由20%升高到60%。经1μmol/L羟基喜树碱处理24 h后,流式细胞术显示A549细胞的凋亡率为18.11%,明显高于对照组细胞凋亡率(0.09%,P<0.05)。经羟基喜树碱作用后,A549细胞Bcl-2基因表达下调70%(P<0.05)。结论羟基喜树碱可以明显抑制A549细胞增殖,诱导其凋亡,并下调Bcl-2基因表达,提示Bcl-2下调参与了羟基喜树碱对A549细胞的抑制作用。     

凝固酶阴性葡萄球菌生物被膜形成及耐药性分析

目的分析临床血培养报阳的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)生物被膜形成能力及耐药性特征。方法收集某院临床血培养报阳的CNS 126株,采用96孔聚苯乙烯培养板分析生物被膜形成能力,聚合酶链反应(PCR)法检测细菌耐药基因mecA,并分析菌株的耐药情况。结果 126株CNS中,87株(占69.04%)生物被膜阳性,105株(83.33%)携带mecA基因。CNS对青霉素、苯唑西林及红霉素的耐药率均80%,未发现对利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀、万古霉素和替加环素耐药的菌株;耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)对环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星、青霉素、利福平和复方磺胺甲口恶唑的耐药率均高于甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球(MSCNS)(均P0.05)。对苯唑西林敏感的CNS中,有2株mecA检测阳性。结论临床血液来源的CNS具有较高的生物被膜形成能力,绝大部分为MRCNS,且表现为多重耐药;存在耐药表型与基因型不一致的菌株。     

psm-mec 在临床分离表皮葡萄球菌中的分布和表达

目的：探讨 psm-mec 基因在临床分离表皮葡萄球菌中的分布和表达,为进一步分析 psm-mec 的功能奠定基础。方法收集临床分离并经过全自动微生物鉴定系统准确鉴定的表皮葡萄球菌165株,通过 PCR 扩增esp 和mecA 基因准确鉴定和区分甲氧西林敏感表皮葡萄球菌(MSSE)和甲氧西林耐药表皮葡萄球菌(MRSE)。扩增 psm-mec 、fudoh 和 p221片段确认 psm-mec 携带菌株,通过 DNA 序列比对分析 psm-mec 及其上游序列的变化。构建 p221重组质粒制备定量检测 psm-mec 的标准品,提取携带 psm-mec MRSE 总 RNA,采用荧光定量 RT-PCR分析临床分离 MRSE psm-mec 转录水平。结果83.64%的临床分离表皮葡萄球菌为 MRSE,其中29株携带 psm-mec 基因,携带率为17.58%,且仅分布于 MRSE 中。所有菌株 psm-mec 开放读码框序列无突变,仅4.34%菌株在psm-mec 基因上游存在 G>A 的点突变。临床分离携带 psm-mec 菌株均表达此基因,其表达水平在103~107拷贝之间,G>A 点突变不影响 psm-mec 转录表达。结论psm-mec 仅分布和表达于临床分离 MRSE 中,G>A 点突变不影响 psm-mec 表达。