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目的:建立高效液相色谱法测定养咽合剂中黄芩苷含量的方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸-三乙胺(60∶40∶0.2∶0.2),进样量为10μl,检测波长为274 nm,流速为1.0ml·min-1,柱温30℃.结果:黄芩苷在2.4~15.0 μg ·ml-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r =0.999 4),平均加样回收率为101.60%,RSD=0.84%(n=9).结论:本方法简便、准确、分离效果好,可用于养咽合剂中黄芩苷的含量测定. 相似文献
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目的:为便于人干扰素γ功能研究,制备6His修饰的人干扰素γ。方法:采用一步反向PCR扩增编码人干扰素γ的cDNA序列,克隆到质粒pUC19,测序鉴定正确后构建于pQE80L表达质粒,BamHI和HindⅢ双酶切,行1.2%琼脂糖凝胶电泳鉴定;SDS—PAGE和Western blot检测表达的目的蛋白,Ni^2+-NTA柱纯化蛋白,酶联免疫吸附测定纯化的目的蛋白。结果:一步反向PCR扩增得到编码人干扰素1eDNA片段,测序结果正确,SDS—PAGE和Western blot分析显示His修饰的人干扰素γ在大肠杆菌中获得了高效表达,SDS—PAGE证实目的蛋白具有较高纯度,酶联免疫吸附测定出目的蛋白。结论:本法成功制备了6His肽修饰的人干扰素γ。 相似文献
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针对单克隆抗体MGb1的重组抗独特型抗体的筛选与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 利用噬菌体呈现技术筛选针对抗胃癌单克隆抗体(简称单抗)MGb1的重组抗独特型抗体(抗-Id),为研制胃癌重组抗-Id瘤苗提供候选分子。方法 以单克隆抗体MGb1免疫Balb/c小鼠,取脾分离mRNA。RT-PCR分别扩增抗体VL和VH cDNA,经linker DNA连接形成ScFv DNA。将scFv DNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7感染后,获得重组噬菌体抗体ScFv文库。以单抗MGb1对文库进行4轮淘选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现抗-Id scFv的噬菌体单克隆,进而经竞争ELISA对其所属抗-Id类型进行初步鉴定。结果 VL和VH cDNA分别约为320和340bp,ScFv DNA约为750bp。抗体ScFv文库经四轮淘选后,在随机筛检的50个克隆中得到18个呈现抗-Id ScFv的噬菌体单克隆。在18个克隆中,有4个呈现β或γ型抗-Id ScFv。结论 经重组噬菌体抗体技术成功地筛选到了针对单抗MGb1的噬菌体呈现型抗-Id ScFv,从而为进一步获得能诱导抗胃癌免疫的抗-Id ScFv奠定了基础。 相似文献
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RP-HPLC法测定复方氧氟沙星鱼肝油乳剂中氧氟沙星和甲硝唑的含量 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:建立反相高效液相色谱法测定复方氧氟沙星鱼肝油乳剂中甲硝唑和氧氟沙星的含量.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsii C18柱(250mm×4.6mm,5μm), 流动相为甲醇-1%醋酸铵(40∶60),流速1.0mL·min-1, 检测波长293nm.结果:甲硝唑在3.0~30.0μg·mL-1范围内线性关系良好,回归方程:Y=0.123 30 1.833 75X,r=0.999 9(n=5),平均回收率100.33%,RSD=1.49%(n=9);氧氟沙星在2.0~20.0μg·mL-1范围内线性关系良好,回归方程:Y=0.157 53 0.623 53X,r=0.999 9(n=5),平均回收率100.31%,RSD=1.19%(n=9).结论:该方法灵敏度高;专属性好;操作简便;重现性好. 相似文献
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目的:了解我院静脉药物配置中心成立前后发生的静脉输注用药相关不良反应情况,评估静脉药物配置中心建立对降低静脉输注用药相关不良反应的影响。方法:收集我院2007~2009年药品不良反应报告1164例次,检索静脉榆注用药相关不良反应报告,按患者的性别和年龄,药物种类,静脉输注用药相关不良反应的临床表现及占药品不良反应的比例进行统计分析。结果:2007~2009年静脉输注用药相关不良反应占药品不良反应的比例分别为:55.00%,37.03%,7.23%,2009年较2007年有显著性降低(P=0.011)。结论:我院建立静脉药物配置中心可有效降低静脉输注用药相关不良反应的发生率。 相似文献