内膜转运蛋白编码基因PEG-344在肺炎克雷伯菌毒力鉴别中的应用

 目的 评估新型标志物PEG-344在高毒力肺炎克雷伯菌以及经典肺炎克雷伯菌毒力鉴别中的应用价值。方法 收集2020—2021年某院血流感染患者血标本分离的肺炎克雷伯菌,采用大蜡螟毒力试验结果作为金标准进行分组,将菌株分为高毒力组和经典组;进一步进行黏液丝试验、wzi基因测序和毒力基因检测_p(rmpA、_prmpA2、PEG-1631、PEG-589、PEG-344)。结果 共收集肺炎克雷伯菌36株,根据大蜡螟毒力试验结果将其分为高毒力组16株,经典组20株;高毒力组黏液丝阳性菌株占87.50%(14株),经典组黏液丝阳性菌株占15.00%(3株);毒力基因PEG-344检测的灵敏度、特异度高于经典的独立标志物_prmpA、_prmpA2。除1株经典组wxwh3(wzi-2)菌株PEG-344阳性以外,其余菌株PEG-344结果与毒力分组完全一致。结论 内膜转运蛋白编码基因PEG-344能更准确地鉴别高毒力菌株,及时提醒临床合理用药,为临床医生优化诊疗方案提供依据。     

检出3株携带新型基因盒组合形式Ⅰ类整合子的铜绿假单胞菌

目的 研究整合子介导铜绿假单胞菌耐药及多重耐药的机制。方法 整合子PCR法扩增整合子的可变区;联合限制性片段长度多态性分析（RFLP）和DNA测序技术分析整合子可变区的耐药基因。结果 98株南京地区铜绿假单胞菌中有35株（35．7％）整合子可变区扩增阳性,扩增片段大小1．0-4．0kb。共检出6种不同的可变区,含有编码对氨基糖苷类、β-内酰胺类和磺胺类抗菌药耐药的基因,其中有3例为新型基因盒组合形式,包括aadA6-orfD、aadB-blaP1和aadB-aac（6′）-Ⅱa-blaCARB-8,Genbank基因号分别为DQ 091179、DQ 141316和DQ 288251。结论 整合子参与了铜绿假单胞菌的耐药和多重耐药,主要携带氨基糖苷类耐药基因,首次报道了3种携带新型基因盒组合形式的Ⅰ类整合子。     

癌胚抗原在结核性和恶性胸腔积液中鉴别诊断的价值

胸腔积液是临床上一个常见的体征.可由许多肺部或肺部以外的疾病引起.其中肿瘤和结核是胸腔积液最常见的病因.癌胚抗原(CEA)是近年来常用的肿瘤标志物,本文通过检测血清及胸腔积液中的CEA来探讨其鉴别诊断的价值.     

血浆1,3-β-D葡聚糖的检测在深部真菌感染诊断中的应用价值

目的探讨血浆1,3-β-D葡聚糖的检测(G试验)对深部真菌感染的诊断价值。方法收集2014年1-12月该院的共420例受试者血浆,其中深部真菌感染者226例,非真菌感染者88例,健康体检者(对照组)106例。采用MB-80微生物动态快速检测系统及GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒定量检测血浆1,3-β-D葡聚糖的水平,应用受试者工作特征曲线(ROC)对G试验进行评估。结果深部真菌感染组的葡聚糖水平明显高于对照组,而非真菌感染者与对照组间比较葡聚糖水平差异无统计学意义(P0.05)。结合ROC曲线分析,G试验的最佳临界值为25.33pg/mL,其敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为84.90%、70.83%、72.0%、84.10%(P0.05)。结论血浆1,3-β-D葡聚糖检测是一种实用且有效的深部真菌感染的诊断方法。     

大蜡螟感染模型在肺炎克雷伯菌毒力研究中的应用北大核心CSCD

目的 评价肝脓肿相关肺炎克雷伯菌的大蜡螟感染模型,建立肺炎克雷伯菌毒力检测的新方法.方法 收集无锡市第二人民医院2016年1月至2017年12月分离肝脓肿相关肺炎克雷伯菌12株,痰液、尿液中分离的20株肺炎克雷伯菌作为经典非高毒力肺炎克雷伯菌（经典组）;所有菌株进行黏液丝试验,PCR检测肺炎克雷伯菌常见的高毒力的荚膜血清型（K1、K2、K5、K16、K20、K54、K57）,大蜡螟毒力试验测定同一时间段不同血清荚膜型的80％致死量（80％lethal dose,LD80）以及在同一浓度下达到80％幼虫死亡的时间（80％lethal time,LT80）.结果 肝脓肿组荚膜血清型主要为K1、K2、K5、K20、K57,分别占41.7％（5/12）、8.3％（1/12）、8.3％（1/12）、8.3％（1/12）、33.4％（4/12）;经典组未检出高毒力荚膜血清型.肝脓肿组黏液丝试验阳性率为75％（9/12）,经典组的黏液丝试验的阳性率为10％（2/20）.大蜡螟毒力试验显示在浓度为1×105 CFU/ml至1×108 CFU/ml时,不同的菌株对大蜡螟幼虫的致死率呈现浓度依赖性,接种12 h后,K1、K57组的死亡幼虫数量显著高于K2、K5、K20组及经典组;接种96 h肝脓肿组的LD80分别为：1×106 CFU/ml（K1、K57）;1×107 CFU/ml（K2、K5、K20）.结论 我院分离的肝脓肿相关肺炎克雷伯菌均为高毒力菌株,大蜡螟模型菌液接种后12 h可进行肺炎克雷伯菌毒力的检测.     

感染碳青霉烯耐药的肠杆菌科细菌患者全因死亡的Meta分析

目的:评价耐碳青霉烯肠杆菌科细菌感染患者全因死亡风险?方法:检索Pubmed数据库?Embase数据库,并辅以文献追溯?手工检索,检索时间为2001年1月1日至2015年12月31日?纳入同时含有碳青霉烯耐药肠杆科细菌(CRE)及碳青霉烯敏感的肠杆菌细菌(CSE)的临床特征及预后的研究?采用Stata14.0软件进行文献数据进行分析,并评价Meta分析结果的稳定性和发表偏倚?结果:16项研究符合纳入标准,包括2 916例患者(CRE感染797例,CSE 2 119例)?根据纳入研究的设计类型分为队列研究?病例对照研究;根据感染患者细菌检出的标本类型分为血流感染组亚组?综合感染类型亚组(包括尿液?血液?痰等)?队列研究组的CRE感染全因死亡的相对危险度(risk ratio,RR)为2.44(95%CI:1.96~3.03,I2=16.1%,Pheterogeneity=0.312);血流感染亚组的RR为2.07(95%CI:1.59~2.69,I2=0.0%,Pheterogeneity=0.511);综合感染类型亚组的RR为3.35(95%CI:2.25~4.99,I2=0.0%,Pheterogeneity=0.868)?病例对照组的比值比(odds ratio,OR)为2.30(95%CI:1.49~3.55,I2=53.5%,Pheterogeneity=0.018);血流感染亚组的OR为2.85(95%CI:1.66~4.90,I2=60.8%,Pheterogeneity=0.018);综合感染类型亚组的OR为1.46(95%CI:0.73~2.90,I2=25.2%,Pheterogeneity=0.261)?结论:CRE患者病死率明显高于CSE患者,血流感染与患者死亡是密切相关的?     

Carba NP试验及Carba NP-direct试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌的临床意义

目的：评价Carba NP试验及Carba NP-direct试验对碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌碳青霉烯酶检测的临床价值。方法：收集南京医科大学附属无锡市第二人民医院2013年1月至2015年12月临床分离的各种标本耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科细菌112株,同时选取碳青霉烯敏感的菌株100株作为对照组。所有菌株进行碳青霉烯酶耐药基因PCR检测、改良Hodge试验(MHT试验)、Carba NP试验(CNPt)以及Carba NP-direct(CNPt-d)试验检测。结果：碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌共112株,92株携带blaKPC-2;8株携带blaNDM-1;1株携带blaVIM-2;1株携带blaIMP-4;10株不携带碳青霉烯酶基因;未检测到携带D组碳青霉烯酶基因的肠杆菌科细菌。以PCR检测的结果为标准,Carba NP试验、Carba NP-direct试验诊断菌株是否产碳青霉烯酶的敏感性和特异性均100%;改良Hodge试验诊断菌株是否产碳青霉烯酶敏感性为96%,特异性为98%。Carba NP试验及Carba NP-direct试验均在2 h内完成检测。结论：Carba NP试验和Carba NP-direct试验均能快速、准确筛查出产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌。Carba NP-direct试验相比Carba NP试验成本低、反应快、结果更明确,可作为表型确认实验和耐药监测的手段。     

大肠埃希菌在尿路感染的分布及耐药分析

目的分析大肠埃希菌在尿路感染中的分布特点及耐药现状,为临床合理用药提供参考。方法采用法国生物梅里埃公司VITEK2-Compact微生物分析仪进行细菌鉴定和药敏分析。对2008年4月—2010年4月住院及门诊尿路感染患者尿培养分离出的652例大肠埃希菌进行药敏分析,同时进行ESBLs检测。结果尿路感染大肠埃希菌中产ESBLs大肠埃希菌检出率为38%。药敏结果显示,大肠埃希菌对丁胺卡那霉素、呋喃妥因、美洛培南、亚胺培南等耐药率低,对青霉素类和环丙沙星、左旋氧氟沙星及庆大霉素耐药率大于60%。ESBLs阳性耐药率明显高于ESBLs阴性。病房标本分离菌株耐药率明显高于门诊。结论尿路感染中大肠埃希菌的耐药严重,尤是ESBLs阳性菌株,应加强耐药监测,指导临床合理用药,减缓耐药菌株出现。     

变栖克雷伯菌全基因组测序及毒力特征分析

目的 对变栖克雷伯菌进行全基因组测序及大蜡螟毒力实验,为变栖克雷伯菌分子毒力特征研究提供参考。方法 收集江南大学附属中心医院2021年1—12月从患者血液中分离的变栖克雷伯菌共3株,进行菌种鉴定及全基因组测序;通过大蜡螟感染模型中大蜡螟幼虫lgLD50的差异来进行变栖克雷伯菌毒力分析。结果 3株变栖克雷伯菌均可通过Vitek MS V3.2完成菌种鉴定,质谱图谱的8 250 m/z处均有特征峰。黏液丝实验显示wxkv2055黏液丝实验阳性。wxkv2055和wxkv2031仅对氨苄西林耐药,对其他抗生素均敏感,wxkv2096对氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、阿米卡星、庆大霉素、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑耐药。全基因组测序显示,3株菌的GC含量为56.8%～57.2%,荚膜血清型包括KL14、KL16、KL34,O抗原分型包括O5、O3/O3a,MLST分型包括1169、595、718,wxkv2055携带1个23.81kb的IncHI1B型毒力质粒。大蜡螟毒力模型分析显示,wxkv2055的lgLD50低于wxkv2031和wxkv2096,差异均有统计学意义（均P<0.05）,wx...     

2017无锡市第二人民医院细菌耐药性监测

目的了解无锡市第二人民医院临床分离菌对常用抗菌药物的敏感性和耐药性。方法采用自动化仪器法进行鉴定及药敏感性试验,根据CLSI 2017结果判断。结果收集2017年1-12月共分离5618株细菌,其中革兰阴性菌4276株(76.1%),革兰阳性菌1342株(23.9%)。甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌的检出率为41.4%,MRSA对利福平、呋喃妥因、奎奴普丁/达福普汀、利奈唑胺的耐药率均低于10%,无万古霉素耐药株。屎肠球菌对检测药敏的药物的耐药率均显著高于粪肠球菌,均有少数万古霉素耐药株。ESBL阳性两率在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中平均为45.2%、28.9%。肠杆菌科细菌对亚胺培南及美罗培南的耐药率分别为9.5%及4.2%,克雷伯菌属对亚胺培南及美罗培南的耐药率分别为20.4%及9.2%。鲍曼不动杆菌对美罗培南和亚胺培南的耐药率为54.1%和51.6%。结论临床分离菌对常用抗菌药物的耐药率仍不断增长,提供准确高效的鉴定药敏结果、加强监测及合理使用抗生素迫在眉睫。