乌头叶面细菌、真菌DGGE分析条件的建立与优化

目的:筛选并优化适用于分析乌头叶面细菌、真菌多样性的变性梯度凝胶电泳(DGGE)实验条件。方法:采用Touch Down-PCR技术扩增乌头叶面细菌16 S r DNA V3区域和真菌18 S r DNA~5.8 S r DNA序列,利用该扩增产物对乌头叶面细菌、真菌DGGE电泳条件进行优化。采用DGGE垂直电泳法筛选凝胶变性梯度,时间间隔法优化电泳时间。结果:乌头叶面细菌DGGE最佳分析条件为变性剂梯度30%~65%(Gel 10%),电泳温度60℃,电压120 V,电泳时间7 h。乌头叶面真菌DGGE最佳分析条件为变性剂梯度25%~45%(Gel 8%),电泳温度60℃,电压120 V,电泳时间10 h。结论:利用以上优化条件能有效分离乌头叶面细菌16 S r DNA V3区及真菌18 S r DNA~5.8 S r DNA序列,为乌头叶面细菌,真菌的群落结构PCR-DGGE分析提供可靠的技术支撑。     

临床基因检测报告规范与基因检测行业共识探讨CSCD

二代测序技术（next generation sequencing,NGS）在临床的应用为广泛开展遗传病的基因检测、病因诊断、治疗及预防奠定了基础,但同时也伴随着一系列的问题,其中很重要的一个环节就是基因检测报告缺乏统一或基本的标准。首届“临床基因检测标准与规范专题研讨会”于2017年10月28日在深圳召开,来自全国138家机构的250多位遗传学专家、临床专家及第三方检测机构的代表共同探讨了遗传病基因检测报告的标准和规范问题。本文根据此次研讨会专家的意见和建议,就遗传病基因检测报告的原则、规范以及基因检测行业的发展进行了讨论,并发布了临床基因检测报告规范共识,以促进检测报告的规范化和标准化,推进我国基因检测行业的健康有序地发展。     

浸浴结合银离子敷料治疗大面积烧伤患者残余创面的疗效

目的 观察浸浴结合银离子敷料治疗大面积烧伤患者残余创面的疗效. 方法 2008年1月-2012年2月笔者单位收治90例大面积烧伤后期残余创面患者,按照随机数字表法分为对照组45例和试验组45例,对照组患者浸浴后创面外用磺胺嘧啶银纱布处理,试验组患者浸浴后以银离子敷料覆盖创面.用药后21 d,评定2组患者的治愈率.观察治疗过程中患者的不良反应.用药前及用药后7、14、21 d,分离与鉴定细菌,并计算创面细菌清除率.对数据进行x2检验和t检验.结果 用药后21 d,对照组与试验组患者的创面治愈率分别为62.22％(28/45)、86.67％(39/45),组间比较差异有统计学意义(x 2=7.067,P＜0.05).用药后2组患者均未见明显不良反应.用药前及用药后7、14 d,2组患者均检出金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌等.试验组患者用药后7、14 d细菌清除率分别为50.0％、71.4％,明显高于对照组(x2值分别为8.067、5.896,P＜0.05或P＜0.01).用药后21 d,2组患者细菌清除率均为100.0％. 结论 浸浴疗法结合银离子敷料治疗烧伤后残余创面能有效控制创面感染,显著提高治愈率.     

非清髓预处理后自体外周血造血干细胞移植治疗难治性重症肌无力远期疗效观察

目的观察体外纯化的自体外周血CD34+细胞移植于经非清髓预处理方案治疗的难治性重症肌无力(MG)患者的远期疗效。方法回顾性分析浙江中医药大学附属第一医院血液科2005年2月至2010年2月期间经纯化的自体外周血CD34+细胞移植治疗5例难治性MG患者资料。采用FAC预处理方案:磷酸氟达拉滨30mg·m-2·d-1,共4d;抗胸腺细胞球蛋白2.5mg·kg-1·d-1或抗淋巴细胞球蛋白30mg·kg-1·d-1,共4d;环磷酰胺50～60mg·kg-1·d-1,共2d。结果 5例患者均获造血、免疫重建,无移植相关死亡。全部患者均随访至2012年2月,中位随访时间44(24～84)个月,其中肌力正常,恢复正常生活、工作,脱离药物治疗4例,另1例移植后12个月因疾病复发而再次应用小剂量泼尼松、溴吡斯的明维持治疗患者目前肌无力症状控制良好,生活自理。结论 FAC预处理方案应用于纯化的自体外周血CD34+细胞移植治疗难治性MG远期疗效较好,患者的耐受性良好,值得进一步临床研究。+     

Maspin蛋白和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在膀胱癌中的表达及意义

目的研究诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白和maspin蛋白在尿路上皮癌中的表达及其意义。方法采用免疫组织学SP法检测54例尿路上皮癌和18例正常膀胱组织中以上两种蛋白的表达。结果两种蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表达与在正常膀胱黏膜中表达比较,均有显著性意义（均P〈0.01）。iNOS蛋白表达与maspin蛋白表达间存在负相关（r=-0.992,P〈0.05）,但与TCCs分级无关。maspin表达与浸润性膀胱尿路上皮癌呈负相关性。结论 iNOS的高表达和maspin蛋白低表达是膀胱癌预后不良的指征。     

归芍地黄丸中山茱萸的定性定量方法研究

摘 要 目的： 建立归芍地黄丸中山茱萸的定性和定量测定方法。方法: 采用TLC对归芍地黄丸中山茱萸进行定性鉴别,并采用HPLC测定山茱萸中莫诺苷、 马钱苷的含量。结果: TLC色谱斑点清晰,分离度好,专属性强;莫诺苷对照品在0.010～2.620 μg范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为102.75％,RSD为1.40％（n=6）。马钱苷对照品在0.009～2.170 μg范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为103.59%,RSD为1.10%（n=6）。结论:本方法准确、简单、可行,重复性好,可有效控制该制剂中山茱萸的质量。     

低中度近视患者眼压、角膜中央厚度与角膜球差及非球面性的关系

ObjectiveTo investigate the correlation between intraocular pressure （IOP） and central corneal thickness （CCT） and corneal spherical aberration as well as asphericity. MethodsThis was a cross-sectional study. Two hundred and sixteen eyes in 108 mild-to-moderate myopia patients were examined with the Pentacam HR anterior segment tomographer. The aspheric coefficient （Q value） and corneal spherical aberration results from the different quadrants in both the anterior and posterior corneas （including superior， inferior， nasal， temporal， horizontal and vertical directions） and the data 6， 7， 8 and 9 mm eccentric diameters were obtained. IOP and CCT were measured by a non-contact tonometer and A-scan ultrasonic corneal pachymeter， respectively. Patients were divided into 2 groups based on the degree of myopia. The relationship between the IOP with and without CCT and corneal spherical aberration as well as asphericity were analyzed. Data was processed using a Pearson correlation analysis， independent samples t test and one-way ANOVA. ResultsIOP was significantly correlated with anterior corneal asphericity （r=-0.30， P<0.05 for right eyes； r=-0.34， P<0.05 for left eyes）， but was not significantly correlated with anterior corneal spherical aberration in the mild myopia group. In the moderate myopia group， although IOP was significantly correlated with anterior corneal spherical aberration （r=0.31， P<0.05 for right eye； r=0.37， P<0.01 for left eye）， there was no significant correlation with anterior corneal Q value. CCT was only significantly correlated with the temporal corneal Q value （r=0.47， P<0.01 for right eyes； r=0.29， P<0.05 for left eyes）. ConclusionIOP induced a decrease in anterior corneal asphericity in mild myopes， however， it was positively correlated with anterior corneal spherical aberration. The reason for the difference may be related to the compensation mechanism of the cornea itself.     

CD25单抗在无血缘关系造血干细胞移植中的作用研究

目的探讨CD25单抗在无血缘关系造血干细胞移植(UHSCT)中对干细胞植入和移植物抗宿主病(GVHD)的作用。方法27例UHCST中,移植后1、4 d给予CD25单抗1 mg/kg。结果27例中,除1例早期死亡外,26例患者造血全部重建。17例发生急性GVHD,其中Ⅱ度以上急性GVHD 6例(23%)。复发3例,严重感染3例。26例可评价患者中,19例无病生存(73%)。结论CD25单抗在UHSCT中对保证干细胞植入和预防GVHD有肯定的作用,白血病复发并不增加。此研究为UHCST和HLA不合的造血干细胞移植提供一个可选择的途径。     

脑脊液抗体指数检测在儿童神经系统感染相关疾病中的应用

循证医学研究发现很多神经系统疾病与病毒感染之间存在一定相关性。随着临床检验技术的发展很多方法能证明这种关系,如PCR检测脑脊液中的病毒核酸、脑脊液中多种病毒AI的检测、外周血清转化与病毒在活化、PCR检测外周血病毒含量等,