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1.
目的 观察3种不同中医治法对大鼠肝癌半乳糖凝集素(GAL-3)表达的调控差异以及GAL-3在人肝癌细胞增殖中的作用,以探讨肝癌治疗的新靶点.方法 将72只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、喃氟啶组(喃氟啶8.33 mg/100g)、清热解毒组(清热解毒方1.5 g/100g)、活血化瘀组(活血化瘀方1.27g/100g)、健脾理气组(健脾理气方1.75g/100g),每组12只,除正常组外,其余各组大鼠采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌,各组均给药6周,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)GAL-3的表达.根据人GAL-3基因编码区设计2个siRNA靶点,并构建重组质粒转染SMMC-7721人肝癌细胞株,分为空白组、阴性组、GAL-3 RNAi组,实时定量PCR检测各组GAL-3 mRNA的表达,MTT法检测各组转染后24 h、72h、144h细胞增殖.结果 模型组GAL-3基因表达显著增加,健脾理气组能下调其表达;转染72h后GAL-3 RNAi组GAL-3 mRNA表达量明显降低;转染144h后,GAL-3 RNAi组肝癌细胞的生长增殖得到了明显的抑制(P<0.01).结论 GAL-3基因在肝癌组织中高表达,健脾理气方能显著下调该基因表达. 相似文献
2.
目的:观察昆明种H22肝癌小鼠邪毒壅盛证与气虚证肿瘤组织细胞凋亡通路基因表达特征,探讨中医同病异证发生的物质基础。方法:采用小鼠计量化辨证方法,筛选出瘤早期邪毒壅盛证与气虚证同病异证H22肝癌小鼠,采用Affymetrix GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array检测肿瘤组织细胞凋亡通路相关基因表达的特征。结果:依据KEGG数据库细胞凋亡通路,筛选出芯片数据中匹配的33个基因,发现(1)TNF-α和IL-1依赖的细胞凋亡信号通路总体上不利于邪毒壅盛证小鼠肿瘤细胞的凋亡;(2)IL-3依赖的细胞凋亡信号通路总体上反似有利于邪毒壅盛证小鼠肿瘤细胞凋亡;而(3)线粒体介导的细胞凋亡信号通路,邪毒壅盛证小鼠一致表达下调,提示不利于其细胞凋亡。结论:邪毒壅盛肝癌小鼠肿瘤细胞恶性增殖程度高,可能与线粒体介导的细胞凋亡信号通路系列相关基因表达轻度抑制有关。 相似文献
3.
背景:探讨中医学综合实验课程引入PBL教学模式的教学效果。方法:观察我校选修该课程的2004级、2005级中医七年制2个本科生班学生,在PBL教学结束后发放并回收问卷调查表。结果:(1)大多数学生对该课程采用PBL教学产生了浓厚的兴趣,堂课气氛十分活跃。(2)71%.100%学生认为该课程引入PBL教学有利于其能力的培养,但是尚有一定比例(0.29%)学生不认可。(3)与传统教学相比较,PBL教学最大优点是提高了学生自主学习的积极性,增强了学生的中医科研思维能力,提升了学生的表达沟通能力。(4)值得注意的是,PBL教学形式相对复杂,学生负担增加,难以完全理解与消化所查阅的中医科研前沿文献。结论:中医学综合实验课程引入PBL教学模式达到预期教学目标,但如何探索PBL教学与传统教学相结合的新模式,值得进一步研究。 相似文献
4.
目的:观察正常气虚小鼠下丘脑-垂体-睾丸轴与睾酮合成调节相关基因的转录特征。方法:采用小鼠标准化诊法和辨证方法,筛选出正常气虚小鼠与正常小鼠,采用GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测其下丘脑-垂体-睾丸轴有关基因的转录水平。结果:与正常对照小鼠比较,正常气虚小鼠下丘脑Gnrh1表达略增;垂体上Gnrh受体上调,但Cga、Fshb和Lhb下调;睾丸Cyp11a1、Cyp17a1、Hsd3b1、Hsd3b6等与睾酮合成相关酶一致上调。结论:正常小鼠出现气虚证时,垂体促性腺激素表达量略减,而睾丸合成睾酮的系列关键酶的表达活跃,这构成了正常气虚证小鼠下丘脑-垂体-睾丸轴的特征。 相似文献
5.
目的:观察不同气虚证小鼠甲状腺G蛋白信号通路及功能激素基因表达的特征.方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,观察正常小鼠、肿瘤气虚证荷瘤小鼠甲状腺G蛋白信号通路及相关基因表达特征.结果:不同气虚小鼠垂体TSH与甲状腺TSH受体(TSHR)表达量均增加,但正常气虚证小鼠甲状腺G蛋白通路的腺苷酸环化酶(AC)和蛋白激酶A(PKA)未见相应的表达量增加;而肿瘤气虚证小鼠则相应增加、活跃,发生响应,Ras基因亦如是.结论:正常气虚小鼠甲状腺G蛋白通路中大多基因表达不活跃可能是其部分物质基础,而荷瘤小鼠气虚证系因实致虚,因此表现与正常气虚证不同,即甲状腺尚处于代偿状态. 相似文献
6.
目的:观察同病异证H22肝癌小鼠甲状腺机能及激素合成相关基因表达特征。方法:采用标准化诊法技术在接种同样H22腹水癌细胞数的昆明种小鼠中,筛选出不同组别的同病异证肿瘤小鼠,以ELISA法检测血清甲状腺激素水平,以RTqPCR法检测激素合成相关基因mRNA水平的改变。结果:①筛选出濒危组、邪毒组、邪中组、邪微组,及邪中兼气虚组(简称气虚组)等5个同病异证组小鼠。②甲状腺激素T3在肿瘤早期有升高趋势,邪盛衰度增加则出现下降;T4在肿瘤发生后迅速出现抑制。③激素合成相关基因Tshr、Tpo、Nis、Tg等基因转录水平总体表现出邪盛衰度低者表达量相对较高,高者表达量相对较低的趋势。结论:肿瘤发生后,邪盛衰度与荷瘤小鼠甲状腺机能抑制程度有关,邪毒微弱时呈代偿状态,加重后转而出现失代偿状态,是因实致虚,同时激素合成关键基因亦发生相应变化,从而影响甲状腺激素水平。 相似文献
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目的观察不同中医治法对大鼠肝癌TrxR1表达的调控差异,以及TrxR1在人肝癌细胞增殖中的作用。方法将84只雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组以及实验组,除正常组外均采用DEN诱发大鼠肝癌,实验组分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)TrxR1表达的差异;设计2个人TrxR1基因siRNA靶点,将重组质粒通过脂质体转染入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测转染前后细胞生长增殖情况、Real-time-PCR检测该基因的表达差异。结果芯片结果显示,TrxR1基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,益气健脾治法明显下调其表达;采用MTT法筛选到一个TrxR1基因RNA干扰有效靶序列,脂质体转染144 h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;实时荧光定量PCR检测表明,转染72h后该基因的表达量明显降低。结论肝癌细胞恶性增殖有赖于TrxR1基因的高表达,益气健脾方药能显著下调该基因表达。 相似文献
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大鼠和小鼠辨证论治方法和标准是具有中医药行业特色的方法和标准,其建立有助于满足中医药辨证论治研发的需要。本文介绍了建立大鼠和小鼠辨证论治标准所开展的系列研发工作,发现:(1)大鼠和小鼠可以用于模拟中医临床的诊法和辨证,可以采集到大量的四诊信息,满足辨证论治的需要;(2)利用大鼠和小鼠可以实现诊法和辨证的标准化、计量化,所建立的方法便于实验操作与普及;(3)正常大鼠和小鼠存在体质和证候的差异,常见疾病大鼠和小鼠会自发形成证候,发生证候的兼夹和演变,与人类近似;(4)证候存在复杂的物质基础,涉及神经内分泌免疫网络各组织基因表达与剪接的差异;(5)利用大鼠和小鼠可以开展个体化辨证论治及计量化疗效比较与评价。该方法和标准的主要用途包括:(1)证候模型动物的证候属性鉴定;(2)中医基础学科的研究,如藏象理论、证候的物质基础、辨证论治方法和作用机制、中医诊断学等研究;(3)中医临床学科的研究,如辨证论治疗效的比较与评价、辨证论治方案的优化、防治未病的研究;(4)中药学科的研究,如中药药性的研究、中药和方剂的药理研究等。 相似文献