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1.
丙酮酸脱氢酶激酶-1在人结肠癌中的表达及意义   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的检测丙酮酸脱氢酶激酶-I(pyruvate dehydrogenase kinase-I,PDK1)在人结肠癌组织和细胞中的表达。探讨抑制PDK1对结肠癌细胞活性的影响。方法应用RT-PCR、荧光定量PCR和免疫荧光法、Western blot检测结肠癌组织、癌旁组织以及4种人结肠癌细胞PDK1基因的表达情况。在PDK1抑制剂(dichloroacetate,DCA)的诱导下,通过MTT法观察结肠癌细胞活性。结果PDK1基因在结肠癌组织中表达较癌旁组织中高;在4种人结肠癌细胞中明显表达。抑制PDK1能抑制结肠癌细胞增殖活性,抑制效应随药物浓度而递增,其中90 mmol/L DCA的活性细胞率分别为(23.90±2.79)%、(5.90±1.31)%、(32.82±4.50)%和(29.72±3.03)%。结论PDK1基因在结肠癌组织和细胞中高表达,在癌旁组织中低表达,抑制PDK1明显抑制结肠癌细胞增殖活性,PDK1可望成为结肠癌有效治疗靶点。  相似文献   
2.
目的探讨以丙酮酸脱氢酶激酶-1(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 1,PDK-1)为靶标的短发夹RNA(shRNA)与化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠癌LS174T细胞的促凋亡作用。方法针对PDK-1序列设计3段干扰序列及1个阴性对照,分别构建pGenesil.1-PDK-1重组质粒表达载体及pGenesil.1-NC阴性对照载体,利用脂质体分别将质粒转染入LS174T,并用G418对细胞进行药物筛选,并通过Real-time PCR和Western blot检测有干扰序列的有效性。MTT实验检测5-FU对干扰组和对照组细胞生长、增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 Real-time PCR和Western blot证实3个干扰组均抑制PDK-1表达,其中最大敲减效率超过70%。MTT实验结果显示,经5-FU同样处理48 h后,PDK-1干扰的LS174T细胞生长抑制率较对照组显著增高(P<0.05);流式细胞仪结果显示,干扰组细胞凋亡率较对照组增高(P<0.05)。结论 PDK-1 shRNA能特异性下调LS174T细胞中PDK-1的表达,PDK-1干扰联合5-FU可促进结肠癌细胞化疗诱导凋亡。  相似文献   
3.
核受体PXR与耐药相关基因在结肠癌中的表达及意义   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的检测核受体PXR和耐药相关基因在人结肠癌中表达,初步探讨其相互关系在肿瘤免疫和肿瘤耐药中意义。方法分别用RT-PCR和western blot方法检测PXR、MRP2、MRP3、ABCG2、MDR1和CYP3A4在17例结肠癌组织中的表达,并进行半定量统计分析。结果与相应正常组织相比,结肠癌组织中PXR、MRP2和MRP3 mRNA水平和蛋白水平均显著增强(P<0.05)。而结肠癌组织中ABCG2、MDR1和CYP3A4 mRNA水平与相应正常组织相比没有显著差异。在癌组织和正常组织中,MRP3 mRNA水平与PXR mRNA水平呈正相关性(P<0.05)。结论 PXR、MRP2和MRP3可能在结肠癌耐药中具有重要作用,PXR调控MRP3表达可能涉及其耐药机制。  相似文献   
4.
目的:用基于TEM-8(tumor endothelialmarker-8)真核表达的颗粒性疫苗免疫荷结肠癌小鼠,探讨该疫苗的免疫治疗作用。方法:用阳离子肽[K]16-tat49-57与带有负电荷的真核表达质粒结合成颗粒性疫苗,用透射电镜和免疫印迹法鉴定,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测疫苗所诱导的特异性CTL分泌IFN-γ,并对荷瘤Balb/c小鼠进行免疫治疗后,观察荷瘤体积和小鼠生存率,用免疫组化方法(抗CD31)观察肿瘤组织血管生长情况,并计算肿瘤微血管密度。结果:在电荷比为r=2的制备条件下,所构建的颗粒性疫苗进行电镜扫描,显示疫苗能形成颗粒,转染COS-7细胞后可有效介导TEM-8蛋白表达。ELISPOT检测显示在体内疫苗能有效激发抗原特异性CTL效应,可诱导CTL产生IFN-γ等细胞因子,肿瘤治疗实验证实,颗粒性疫苗能有效抑制肿瘤的生长速度,提高荷瘤小鼠的生存率,与对照组相比差异有统计学意义,P<0.05。结论:基于TEM-8的新型抗肿瘤血管生成疫苗能有效激发出特异性CTL应答,并在荷瘤小鼠模型中有效抑制肿瘤血管生成,提高荷瘤小鼠的生存率,为新型结肠癌治疗性疫苗的设计提供了新思路。  相似文献   
5.
目的:研究重组人血管内皮抑制素(Endostar,恩度)对淋巴管内皮细胞的作用及淋巴管生成的影响。方法:磁珠分选小儿包皮真皮淋巴管内皮细胞进行培养,并在光镜下观察和采用细胞特异性标记物检测。设立对照组和恩度实验组,应用免疫荧光法和体外三维培养法来判定恩度对淋巴管内皮细胞有无抑制作用。结果:恩度实验组淋巴管内皮细胞骨架中微丝排列极性减弱或消失,微管无明显改变。恩度实验组淋巴管内皮细胞体外形成管状分支数量及管状结构形成能力较对照组明显下降(P<0.05)。结论:重组人血管内皮抑制素(恩度)对淋巴管内皮细胞的细胞骨架和体外成管能力有明显的抑制作用。  相似文献   
6.
目的 制备、鉴定基于肿瘤抗原TEM-8(tumor endothelial marker-8)的复合颗粒性疫苗,研究其在体外激发CTL杀伤活性.方法 在特定的条件下将阳离子肽和DNA制备成复合颗粒性的结构,以透射电镜、DNA阻滞试验、DNaseI保护试验、Western blot等对该疫苗进行制备和鉴定,同时进行体外激发CTL杀伤活性的标准(51)~Cr释放实验.结果 在NaCl浓度为87.5 mmol/L、电荷比为2的制备条件下,电镜扫描结果显示该疫苗能形成颗粒;Western blot鉴定其可有效介导TEM-8蛋白表达;该疫苗有明显的杀伤毒性,杀伤率为59.7%,与对照组性比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功制备了基于肿瘤抗原TEM-8的复合颗粒性疫苗,其在体外能够有效激发出特异性CTL应答.  相似文献   
7.
目的分析护航编队官兵长航前后血脂及血清钙、镁含量的变化及其之间的关系,为控制血脂及预防高脂血症提供新的方法。方法于长航前3 d及后3 d分别抽血,检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、载脂蛋白A-1(ApoA-1)和载脂蛋白B(ApoB)及血清钙、镁浓度,并用统计学方法进行分析。结果长航后TC、TG、LDLC、ApoB均较长航前升高,血清钙、HDLC和ApoA-1较前降低;血清钙与TC、LDLC呈明显负相关,与HDLC正相关,与其他因素相关性不大;血清镁与TC、TG呈明显正相关,与HDLC负相关,与其他因素相关性不大。结论护航官兵在长航期间容易出现血脂异常,而血清钙、镁浓度是该变化的重要影响因素,在官兵长航过程中适当调整钙和镁的摄入有助于控制血脂水平。  相似文献   
8.
目的 探讨紫杉醇(paclitaxel,PTX)、PTX脂质体(paclitaxel liposome,L-PTX)和白蛋白结合型PTX(albumin bound paclitaxel,nab-PTX)在头颈肿瘤中的疗效。方法 采用回顾性研究,收集整理2017年1月-2018年6月69例宁波市医疗中心李惠利医院头颈恶性肿瘤患者的临床资料,其中31例PTX联合卡铂治疗为PTX组,26例L-PTX联合卡铂治疗为L-PTX组,12例nab-PTX联合卡铂治疗为nab-PTX组。比较3组患者近期临床疗效以及不良反应情况。结果 Nab-PTX组患者的近期疗效优于PTX组(66.67%vs 32.26%,χ2=4.209,P=0.040)。L-PTX组患者中性粒细胞减少发生率高于PTX组(χ2=4.079,P=0.043),白细胞减少发生率高于PTX组(χ2=4.422,P=0.035)和nab-PTX组(χ2=5.640,P=0.018);nab-PTX组患者脱发、恶心呕吐、腹泻等不良反应发生率低于PTX组(χ2=5.530,P=0.019;χ2=6.423,P=0.011;χ2=4.438,P=0.035)和L-PTX组(χ2=5.025,P=0.025;χ2=5.025,P=0.025;χ2=5.088,P=0.024),周围神经炎发生率低于PTX组(χ2=4.711,P=0.030)。结论 Nab-PTX联合卡铂治疗头颈肿瘤的近期疗效显著,患者不良反应明显减少。  相似文献   
9.
童晶涛  陆妙珍  毛发江 《现代实用医学》2020,32(1):12-14,18,I0001
目的探讨CX3趋化因子受体1(CX3CR1)及表皮生长因子受体(EGFR)在非小细胞肺癌(NSCLC)骨转移的发生和预后中的作用。方法收集124例NSCLC患者作为观察对象,对患者的临床资料进行分析,检测血清CXLCR1、CX3CL1水平;同时检测原发肿瘤组织的EGFR突变情况。结果低CX3CR1组与高CX3CR1组骨转移、临床分期及其他脏器转移差异均有统计学意义(均P<0.05);低CX3CL1组与高CX3CL1组骨转移、临床分期及其他脏器转移差异均有统计学意义(均P<0.05);EGFR突变阳性组与阴性组骨转移、其他脏器转移及病理类型差异均有统计学意义(均P<0.05);CX3CRl、CX3CL1高表达和EGFR突变呈正相关(均P<0.01);CX3CRl高表达与CX3CL1高表达间也呈正相关(P<0.01);EGFR突变状态相同时,CX3CR1高表达患者的生存时间较短(P<0.05)。结论 CX3CR1及EGFR与NSCLC骨转移密切相关,与NSCLC骨转移患者预后相关,可能作为NSCLC骨转移早期诊断及不良预后的预测因子。  相似文献   
10.
目的 探讨短发夹RNA(shRNA)靶向沉默α2, 8-唾液酸转移酶4(ST8SIA4)表达对乳腺癌BT549细胞侵袭、迁移的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)和Western blotting检测乳腺癌BT549细胞和乳腺正常上皮MCF-10A细胞中ST8SIA4 mRNA和蛋白水平。采用LipofectamineTM2000向BT549细胞随机转染成功构建的靶向沉默ST8SIA4表达的shRNA载体片段(沉默组)或无义shRNA片段(对照组),转染48 h后采用QPCR检测ST8SIA4 mRNA水平,Western blotting检测ST8SIA4、磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)、神经纤毛蛋白2(NRP2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况,Transwell实验和划痕实验分别检测细胞的侵袭和迁移能力。结果 与MCF-10A细胞相比,BT549细胞的ST8SIA4 mRNA和蛋白水平均升高(P<0.05)。转染48 h后,沉默组的ST8SIA4 mRNA和蛋白水平分别为0.19±0.02和0.13±0.02,均低于对照组的0.98±0.11和0.52±0.05(P<0.05);沉默组的侵袭细胞数、迁移率及p-Akt、NRP2和TNF-α蛋白相对表达量分别为(39.5±4.2)个、(16.9±1.3)%、0.22±0.03、0.31±0.04和0.27±0.06,均低于对照组的(91.3±8.5)个、(38.4±3.9)%、0.58±0.07、0.55±0.05和0.46±0.05,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ST8SIA4基因在乳腺癌BT549细胞中高表达,沉默其表达可抑制侵袭和迁移过程,可能与上调p-Akt、NRP2和TNF-α蛋白表达有关。  相似文献   
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