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目的 探讨包含88A的卷曲螺旋结构域蛋白GIV是否对脑缺血再灌注损伤模型中的神经炎症应答反应有影响。方法 构建C57BL/6小鼠的大脑中动脉栓塞再灌注模型(MACO/R)及BV2小胶质细胞的氧糖剥夺/复氧模型(OGD 6 h+R 24 h),TTC染色检测小鼠的脑梗死面积;Longa神经生物学评分评价小鼠的神经功能缺损程度;ELISA检测小鼠外周血及细胞培养物上清液中白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的释放水平、Western blot检测小鼠梗死灶周围皮质区组织中卷曲螺旋结构域蛋白(GIV)、TREM2及TLR4的蛋白表达;不同浓度(1、5、10μg/ml)的脂多糖(LPS),刺激BV2细胞24 h建立神经炎症模型,qRT-PCR检测IL-6、TNF-α、IL-1β的mRNA水平、Western blot检测GIV的表达;运用siRNA干扰技术敲低GIV基因的表达后进行OGD/R培养处理;ELISA检测细胞培养基上清液中IL-6和TNF-α的释放浓度;Western blot检测GIV的敲低效率。结果 成功构建的MCAO/R及OGD/R模型均激活了神经炎症应答反应,诱... 相似文献
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目的:建立原代培养的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞体系.方法:取新生24 ~48 h的SD大鼠,无菌操作取出大脑皮层,剪碎后用胰酶消化、机械吹打制成分散细胞悬液,网筛过滤,将细胞悬液接种培养7~9d;置于摇床(37℃、250 r/min振摇6h),弃掉含脱离细胞的细胞悬液,去除小胶质细胞及少突胶质细胞,细胞传代,进行GFAP细胞免疫荧光鉴定.结果:成功分离和培养原代星形胶质细胞,GFAP免疫荧光鉴定星形胶质细胞比例在95%以上.结论:采用该培养方法能够成功的建立原代SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞体系,为研究神经系统疾病及其相关疾病提供了可靠的细胞模型. 相似文献
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nm23—H1/NDPK的发性胆囊癌生物学行为的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
采用抗nm23-H1/NDPK单克隆抗体进行免疫组织化学SP法染色,检测原发性胆囊癌43例,胆囊腺瘤10例,慢性胆囊炎45例,其中nm23-H1/NDPK表达阳性率依序为48.8%、90.0%、77.8%,原发性胆囊癌表达阳性率低于胆囊良性病变(P〈0.05)。nm23-H1/NDPK的原发性胆囊癌的表达:按Nevin分期,早期高于晚期(P〈0.05),高分化癌高于低分化癌(P〈0.05),未发生 相似文献
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nm23H1/NDPK的表达与人类多种恶性肿瘤转移潜能呈负相关,本组采用免疫组化SP法研究nm23H1/NDPK在原发性胆囊癌中的表达及其意义。1.材料与方法:收集原发性胆囊癌43例,胆囊腺瘤10例、慢性胆囊炎45例组织标本,均经10%甲醛固定,... 相似文献
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目的:帕金森病(Parkinson’s disease,PD)最主要的病理变化是中脑黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元的变性死亡,但其病理机制仍然不清楚。硫辛酸是丙酮酸脱氢酶的辅助因子,具有抗氧化性和线粒体保护功能,对PD 具有一定的治疗效果。本研究旨在探索硫辛酸是否通过抑制致凋亡因子(apoptosis inducing factor,AIF)介导的非Caspase 凋亡通路对多巴胺能神经元发挥神经保护功能。方法:6-OHDA 诱导建立单侧损毁的PD 大鼠模型后,给予硫辛酸干预;通过行为学、NueN 和TH 免疫染色观察硫辛酸的保护作用;通过Western Blot、免疫组化、激光共聚焦检测硫辛酸是否可以抑制AIF 介导非Caspase 依赖性凋亡通路对DA 能神经元具有保护作用。6-OHDA 诱导PC-12 细胞损伤建立PD 细胞模型,给予LA 干预;通过CCK-8、流式和线粒体膜电位检测硫辛酸的保护作用;通过Western Blot 和激光共聚焦检测硫辛酸是否可以抑制AIF 介导非Caspase 依赖性凋亡通路对多巴胺能神经元具有保护作用。结果:在PD 模型大鼠上,硫辛酸能够显著缓解
PD 模型大鼠行为学的改变,显著减缓PD 模型大鼠黑质区神经元的丢失;同时,硫辛酸也显著抑制PD模型大鼠黑质区AIF 的线粒体释放和细胞核转移。在PD细胞模型上,硫辛酸能够抑制6-OHDA诱导的PC12 细胞凋亡,显著抑制6-OHDA 诱导的PC12 线粒体通透性转变;同时,硫辛酸也显著抑制PC12 细胞模型AIF 的线粒体释放和细胞核转移。结论:硫辛酸能够通过抑制AIF 介导的非Caspase 凋亡通路对多巴胺能神经元发挥神经保护功能。 相似文献
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