桃儿七化学成分和细胞毒性研究

目的 研究桃儿七Podophyllun hexandrum药材的化学成分及其细胞毒性。方法 采用硅胶柱色谱-高效液相色谱分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构;用L929、HepG2、NCI-H460 3种癌细胞测定各化合物的IC50。结果 从桃儿七中分离鉴定了7个四氢柰类木脂素化合物：鬼臼毒素(1)、苦鬼臼毒素(2)、鬼臼毒酮(3)、苦鬼臼毒酮(4)、异苦鬼臼毒酮(5)、去氧鬼臼毒素(6)、去氧苦鬼臼毒素(7);7个化合物对L929的IC50为0.0035～14.145 3μg/mL,对HepG2的IC50为0.003 7～1.497 5μg/mL,对NCI-H460的IC50为0.005 3～1.699 8 μg/mL。结论 化合物7是首次从该植物中分离得到,化合物6的细胞毒性最强。     

柴胡注射液对LPS发热模型大鼠解热药效的研究

目的 研究柴胡注射液对脂多糖(LPS)诱导的雄性SD大鼠实验性发热模型的解热作用.方法 腹腔注射(iP) LPS(100 μg/kg)建立大鼠发热模型,考察柴胡注射液(5、2.5、1.25 mL/kg)对该发热模型大鼠体温的影响,记录给药后0.5、l、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、8h各组大鼠的体温,绘制平均升温曲线.结果 腹腔注射LPS(100μg/kg)后,模型组大鼠呈明显的三相热,升温峰值(1.69℃)出现在造模后4h;肌肉注射(im)柴胡注射液(5、2.5、1.25 mL/kg)能显著降低上述发热模型大鼠体温,持续时间为7～8h;各时间点的平均升温值显示,柴胡注射液解热作用呈较好的剂量依赖性.结论 柴胡注射液对LPS大鼠发热模型有良好的解热作用,其解热作用呈较好的剂量依赖性.     

细菌内毒素不同给药方式对家兔致热规律的研究

 目的 研究细菌内毒素不同给药方式对家兔致热的规律,计算出发热的阈值,为注射剂质量控制提供参考。方法 按照我国2010年版《中国药典》规定的热原检查方法,家兔采用不同给药方式注射5个不同剂量组的细菌内毒素,记录并绘制升温曲线图,通过曲线拟合计算出家兔体温升高0.6 ℃时发热的阈剂量。结果 家兔皮下注射细菌内毒素的发热阈剂量为45.24 EU·kg-1,最大升温时间位于3.0～4.5 h,升温维持时间位于0.5～4.0 h;肌内注射发热阈剂量为25.97 EU·kg-1,最大升温时间位于2.5～4.5 h,升温维持时间位于0.5～3.0 h;鞘内注射发热阈剂量为1.8 EU·kg-1,最大升温时间位于4.0～5.5 h,升温维持时间位于0.3～1.5 h。结论 细菌内毒素不同给药方式对家兔致热的规律有较大差别。     

鬼臼毒素及其衍生物对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管生成的影响

目的:建立鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验模型,观察鬼臼毒素及其衍生物对CAM新生血管生成的影响。方法:鸡胚孵育7d后,将无水乙醇溶解的鬼臼毒素及其衍生物的明胶海绵载体植入CAM上,并孵化72h。剪下CAM,解剖镜下拍照,计数血管,分析其对于血管生成的影响。结果:去氧鬼臼毒素、苦鬼臼毒酮、苦鬼臼毒素和鬼臼毒素具有明显抑制CAM血管生成作用,鬼臼毒酮和异苦鬼臼毒素抑制作用不明显。结论:鬼臼毒素及其衍生物抗肿瘤活性可能与其抑制新生血管的作用有关。     

柴胡注射液体外抑制PGE2释放的生物活性测定法

目的: 建立rrIL-1β体外干扰下丘脑神经细胞释放PGE₂离体模型,考察柴胡注射作用下该模型中PGE₂含量与药物作用浓度的相关性。 方法: 体外培养下丘脑神经细胞,加入rrIL-1β(40 μg·L^-1)刺激并于不同时间点收集细胞液,ELISA法检测各时间点收集的细胞液中PGE₂含量;体外培养下丘脑神经细胞,加入rrIL-1β刺激后,各组加入不同浓度柴胡注射液,ELISA法检测细胞上清液中PGE₂含量变化,分析加样浓度与对PGE₂抑制率的线性关系。 结果: rrIL-1β能刺激体外培养的下丘脑神经细胞释放PGE₂,并在10 h时达到峰值;柴胡注射液能够显著干扰离体模型中PGE₂的释放(P<0.01,P<0.05),且干扰作用与柴胡注射液作用浓度呈一定的线性相关(r=0.911,P<0.01)。 结论: rrIL-1β能够干扰体外培养的下丘脑神经细胞释放PGE₂,且对PGE₂的抑制生成作用与药物浓度相关性较好。     

舒血宁注射液对急性血瘀模型大鼠血液流变学及血栓形成的影响

目的:研究舒血宁注射液对急性血瘀模型大鼠血液流变学及体内血栓形成各项指标的影响。方法:采用皮下注射盐酸肾上腺素复加冰水浴造成大鼠急性血瘀模型,观察舒血宁注射液对急性血瘀模型大鼠血液流变学指标、血小板聚集及电刺激颈总动脉致体内血栓形成影响。结果:舒血宁注射液能延长血瘀模型大鼠成栓时间和凝血时间(PT、APTT),缩短成栓长度,抗血小板聚集,降低全血黏度及血浆粘度。结论:舒血宁注射液能够改善急性血瘀模型大鼠血液流变学,对抗其体内血栓的形成。     

舒血宁注射液对大鼠心肌缺血的保护作用

目的:观察舒血宁注射液对垂体后叶素( Pit)诱导的急性心肌缺血的保护作用.方法:筛选出70只肢体Ⅱ导心电反应较敏感的大鼠分成7组,空白组,模型组,金纳多17.5 mg·kg -,注射液组,硝酸甘油注射液2.5 mg·kg -1,组,舒血宁注射液的高、中、低剂量组17.5,8.75,4.38 mg· kg -1,每组10只,大鼠尾静脉分别注射各组药物,给药10 min后,采用大鼠舌下静脉注射垂体后叶素(Pit)1 u·kg-1,造成急性心肌缺血模型,通过心电图观察注射垂体后叶素后不同时间点的肢体Ⅱ导联心电图ST段、T波、心率的变化,大鼠心肌缺血阳性率及心律失常发生率的改变,考察舒血宁注射液对血清中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK),心肌梗死面积及梗死率的影响.结果:舒血宁注射液对pit所致急性心肌缺血大鼠心电图及心率的变化均有明显的改善作用,降低心肌缺血阳性率和心律失常发生率,显著降低血清中LDH,CK,MDA的含量,增加血清中SOD的活性,降低心肌的梗死面积及梗死率.结论:舒血宁注射液对pit致大鼠急性心肌缺血具有较明显的保护作用.     

常用大鼠发热模型研究

目的 探讨干酵母、2,4-二硝基酚、脂多糖(LPS)、细菌内毒素引起SD大鼠实验性发热的过程和特点,比较不同浓度外致热原对大鼠发热过程的影响.方法 建立大鼠干酵母(2 g/kg、1 g/kg)、2,4-二硝基酚(30mg/kg、15 mg/kg)、LPS(100 μg/kg、20 μg/kg)、细菌内毒素(120 EU/kg、60 EU/kg)发热模型,记录不同时间点大鼠升温值,绘制各模型平均升温曲线,比较不同大鼠发热模型的发热特点.结果 皮下注射干酵母混悬液,注射后2～3h开始升温,6～7h达峰值,升温持续20 h;皮下注射2,4-二硝基酚溶液,注射后20 min开始升温,1～1.5h达峰值,升温持续3～5h;腹腔注射LPS、细菌内毒素,注射后30 min开始升温,此后升温曲线表现为双相热或三相热,升温持续5～8h.结论 不同外致热原所致SD大鼠发热的过程和特点不同;外致热原浓度不同,所致大鼠发热过程和特点不同.解热试验中,应根据受试药物本身特点选用合适的大鼠发热模型.     

柴胡注射液对LPS发热大鼠解热机制的研究

目的:研究柴胡注射液对LPS发热模型大鼠血清中细胞因子和下丘脑中升温介质的影响。方法:腹腔注射LPS(100ug/kg)建立大鼠发热模型,监测不同时间点柴胡注射液对LPS发热模型大鼠体温影响;模型升温峰值时收集指标,ELISA法检测血清中细胞因子(TNF-α、IL-1β、cAMP、PGE2)、下丘脑中升温介质(cAMP、PGE2)含量变化。结果:柴胡注射液(5ml/kg、2.5ml/kg、1.25ml/kg)能显著降低LPS发热模型大鼠的体温,且量效关系较显著;柴胡注射液各剂量组能显著抑制发热模型大鼠血清中IL-1β、TNF-α、cAMP、PGE2增加和下丘脑中cAMP、PGE2的释放。结论:柴胡注射液对LPS发热模型大鼠有较好的解热作用,其解热效果可能与其抑制外周IL-1β、PGE2增加和下丘脑cAMP、PGE2释放有关。     

水蛭、脉血康对急性血瘀模型大鼠血液流变学及凝血功能的影响

目的：观察水蛭和脉血康对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响,以及对凝血功能的作用。方法：大鼠连续给药两周后,采用皮下注射盐酸肾上腺复合冰浴的方法复制大鼠急性血瘀模型,通过测定全血黏度,血浆黏度,红细胞压积（Hct）,红细胞变形指数和红细胞聚集指数,观察水蛭和脉血康对血液流变学的影响;通过测定凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）和凝血酶时间（TT）,纤维蛋白原（Fibg）的含量,血小板聚集率,凝血因子FⅡ、FⅤ、FⅦ、FⅧ、FⅩ的活度来观察对凝血系统的影响。结果：水蛭能够显著降低血瘀模型大鼠全血黏度、血浆黏度和血小板聚集率,抑制FⅡ的活度,延长APTT和TT;脉血康能够降低全血黏度和血小板聚集率,延长凝血时间APTT和TT。结论：水蛭和脉血康均有显著改善血液流变学和凝血功能的作用。