基因捕获联合高通量测序技术在甲基丙二酸血症诊断中的应用

目的 探讨新一代基因测序平台(HiSeq2000)在甲基丙二酸血症(MMA)诊断中的价值.方法 1.采集已经临床确诊的9例MMA患儿外周血并提取DNA,将设计好的基因捕获探针与患儿DNA文库混合,然后利用基因捕获联合高通量测序分析技术对有机酸代谢相关的48个基因全部外显子区域进行测序.2.获得原始数据,去除接头和过滤低质量数据,对数据进行SNP、InDel等分析,并采用Sanger测序方法对异常位点进行测序验证.3.气相色谱-质谱联用分析技术对尿液标本的有机酸测定及其他辅助检查.结果 1.突变基因:7例存在MMACHC基因突变,7例患儿中共检测出7种突变,包括c.482G＞A、c.567_568insT、c.609G＞A、c.440_ 441del、c.80A＞G、c.315C＞G、c.90G＞A,其中c.440_441 del为未见报道突变;1例存在甲基丙二酰辅酶A变位酶(MUT)基因突变,均为内含子异常,分别是c.754-1G＞C、c.1677-1G＞A,其中c.754-1G＞C为未见报道突变;1例未检测到突变.2.临床症状:9例患儿均存在智力运动发育迟缓,伴抽搐3例,反复顽固性代谢性酸中毒、头痛及面瘫、反复性溶血各1例.脑电图异常9例,头颅磁共振异常8例,尿液中甲基丙二酸水平均升高(273.4 ～146 022.8倍),血同型半胱氨酸水平增高8例(27.13～ 396.84 μmol/L,正常＜20 μmol/L).3.Sanger测序验证:均符合新一代测序平台结果,无假阳性存在.结论 1.进一步证明c.609G＞A突变位点为中国MMA合并同型半胱氨酸血症患儿的热点突变位点.MMA基因突变类型较多,与临床症状无明显相关性.2.推测MMACHC基因c.440_441 del突变及MUT基因c.754-1G＞C突变为新发突变.3.基因捕获联合高通量基因测序技术一次性捕获突变基因数量大,获取疾病的遗传信息量广,具有高通量、高灵敏度、高效等特点,适合于MMA患儿检测,也可为其他儿科临床常见遗传性疾病的检测提供参考.     

非哺乳期乳腺炎的磁共振诊断

目的：探讨非哺乳期乳腺炎（ NPM）的磁共振影像学表现及其磁共振诊断价值。方法收集43例经活检或手术病理证实NPM患者的临床和磁共振资料,回顾性分析其磁共振表现特点。结果43例NPM均为单侧乳腺发病,T2WI上病灶以低信号（17例）或高低混杂信号（22例）为主,21例病灶可见灶周水肿,11例病灶增强后可见簇状小环形强化,皮肤增厚者10例,动态增强曲线主要为Ⅰ型（7例）或Ⅱ型（33例）,43例中16例有腋窝淋巴结肿大,其中13例判断为良性淋巴结。结论磁共振上NPM的一些征象,如病灶周围水肿,簇状小环形强化,动态增强曲线Ⅰ、Ⅱ型,淋巴结转移征象少,有助于其正确诊断。     

某省基层部队医务人员突发公共卫生事件应对能力及其影响因素

[目的]了解某省基层部队医务人员突发公共卫生事件应对能力,并探讨其影响因素,为提高基层部队卫勤机构突发公共卫生事件应对能力提供科学依据。[方法]按该省基层部队等级不同采用多阶段分层整群抽样方法,抽取卫勤机构医务人员作为研究对象,进行突发公共卫生事件应对能力问卷调查,并对影响应对能力的相关因素进行logistic回归分析。[结果]共发放636份问卷,收回有效问卷606份,有效回收率95.3%。基层部队医务人员对突发公共卫生事件相关问题知晓率为98.3%,仅74.9%能够准确判断突发公共卫生事件,应对能力合格率为38.4%。应对能力的可能影响因素主要为：突发公共卫生事件危机意识（OR=3.741,95%CI：2.844~4.921）;参加救助培训（OR=2.427,95%CI：1.597~3.690）;参加应急演练（OR=1.822,95%CI：1.207~2.751）;年龄（OR=1.465,95%CI：1.165~1.843）;学历（OR=1.423,95%CI：1.085~1.867）。[结论]该省基层部队医务人员突发公共卫生事件整体应对能力不能满足实际需要;须加强人才培养,开展应急演练和专业技术培训,提高危机风险意识,提升应对突发事件整体实力。     

胸背动脉穿支皮瓣对手背软组织缺损的修复效果

目的研究胸背动脉穿支皮瓣对手背软组织缺损的修复效果。方法选择88例手背软组织缺损病人作为研究对象,比较病人治疗前和治疗后6个月的手功能评定量表,并分析病人的手术时间、术中出血量、住院时间、供区创面愈合时间、受区创面愈合时间、皮瓣存活率及术后并发症。结果88例病人治疗后6个月的对指、对掌、手指内收及外展等评分及手功能评定总分高于治疗前（P < 0.05~P < 0.01）。88例病人的手术时间（95.32±10.59）min,术中出血量（305.21±26.87）mL,住院时间（10.53±1.65）d,供区创面愈合时间（7.26±0.95）d,受区创面愈合时间（8.47±1.16）d。88例病人中85例皮瓣存活,存活率96.59%;其余3例中,2例皮瓣发紫,经积血引流、血管扩张药治疗后改善,1例皮瓣部分坏死,二次清创及再次移植皮瓣后存活。术后发生3例血运障碍,1例血肿,1例感染,2例瘢痕增生严重,并发症发生率7.95%。结论手背软组织缺损采取胸背动脉穿支皮瓣修复,能显著提高病人的手功能,且皮瓣存活率高,适合在临床中深入研究使用。     

当归补血汤对免疫抑制合并隐孢子虫感染小鼠的治疗作用的研究

目的探讨当归补血汤（Angelicae Sinensis Decoction for Supplementing Blood,ASDSB）对免疫抑制合并隐孢子虫感染的小鼠的治疗作用。方法建立免疫抑制合并隐孢子虫感染模型,随后用ASDSB治疗,并设对照组。每日计数小鼠粪便中卵囊数量,测定外周血T细胞亚群、血清可溶性白细胞介素-2受体（SIL-2R）和肠液分泌型免疫球蛋白A（sIgA）的水平,并进行肠组织病理检测。结果与模型组相比较,大剂量ASDSB组的小鼠粪便卵囊排出数量明显减少（P〈0．01）,肠粘膜损伤较模型组轻,并且可以提高免疫抑制小鼠的CD4^＋T水平,促进肠道粘膜sIgA的产生,降低外周血sIL-2R水平。结论大剂量ASDSB对免疫抑制合并隐孢子虫感染的小鼠的治疗作用是通过提高机体免疫功能发挥的。     

病案风险“3A标识方法”的控制

发生医疗纠纷、诉讼时举证不能，往往与实施医疗行为的过程中资料收集不准确、不全面导致的病案缺陷有关，故病案缺陷是医疗风险的重要因素，规范管理是预防医疗纠纷的基础。为防范病案缺陷，我们提出“病案风险”这一概念，并实行“3A标识方法”控制，体会如下。     

胎盘组织匀浆上清对BALB／c小鼠脾脏DC生物学特征的影响

目的通过观察胎盘组织匀浆上清（PTHS）对小鼠脾脏树突状细胞（DC）生物学特征的影响。探讨妊娠免疫耐受的机制。方法分离妊娠及正常BALB／C小鼠脾脏单个核细胞,诱导分化为树突状细胞,经PTHS作用后,流式细胞仪检测树突状细胞的表面标志和抗原摄取能力,MTr法检测其同种异基因淋巴细胞刺激能力。ELISA方法检测其产生的细胞因子水平。结果妊娠小鼠脾脏树突状细胞的生物学特征与正常对照小鼠比较差异无统计学意义,而经PTHS作用后的妊娠小鼠及正常对照小鼠的脾脏CDIIb＋树突状细胞明显降低。而CD8α＋树突状细胞明显增高（P〈0．01）;树突状细胞的抗原摄取能力及刺激同种异基因的淋巴细胞反应的能力也明显低于正常小鼠（P〈0．01）;PTHS作用后的树突状细胞产生较高水平的IL-10和较低水平的IL-12,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PTHS可向下调节BALB／c小鼠脾脏树突状细胞的生物学特征,可能与妊娠免疫抑制有关。     

恶性血液肿瘤脊柱骨髓弥漫性浸润的动态对比增强MR灌注成像

目的 评价动态对比增强MR灌注成像对恶性血液肿瘤脊柱骨髓弥漫性浸润性病变的诊断价值. 资料与方法 经骨髓组织活检确诊的恶性血液肿瘤26例和20例正常对照者行腰椎动态对比增强MR灌注成像检查.计算峰值增强百分率(Emax)、增强斜率(ES)和到达峰值时间(TTP). 结果 脊柱骨髓弥漫性恶性浸润组与正常对照组间的Emax、ES和TTP均具有显著差异(P<0.01).骨髓轻度浸润和中度浸润之间的Emax、ES和TTP均具有显著差异(P<0.05).骨髓轻度浸润和重度浸润之间的Emax、ES和TTP均具有显著差异(P<0.01).骨髓中度浸润和重度浸润之间的Emax、ES和TTP无显著差异(P>0.05).Emax、ES和骨髓浸润程度之间具有正相关性(P<0.01),TTP和骨髓浸润程度之间具有负相关性(P<0.01). 结论 动态对比增强MR灌注成像可以判断恶性血液肿瘤是否出现脊柱骨髓弥漫性浸润,灌注参数可以反映骨髓肿瘤细胞浸润程度.     

甲状腺功能对急性心肌梗死患者预后及左心室功能的影响研究

目的探讨甲状腺功能对急性心肌梗死患者预后及左心室功能的影响。方法选取笔者所在医院2009年6月～2011年6月收治的老年急性心肌梗死患者60例。对症治疗后,比较预后不良组与好转组的血清甲状腺激素水平及左心室功能情况。另外选择45例健康体检者作为对照组。结果与健康对照组比较,老年急性心肌梗死患者血清T4、T3、FT3含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。第3周和第5周末,预后不良组血清T4、T3和FT3明显低于好转组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。血清FT4及TSH组间比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。预后不良组LAD、LVDs和LVDd水平均明显高于好转组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组EF明显低于好转组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。AMI患者不同心肌梗死部位的血清T4、T3水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论监测血清甲状腺激素水平的变化对判断急性心肌梗死患者预后及左心室功能有一定意义。