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1.
目的探讨促红细胞生成素肝细胞受体A3(EphA3)参与肝癌细胞侵袭的作用机制。方法培养人肝细胞HL-7702和肝癌细胞株HepG2和NHCC97H。采用siRNA干扰的方法抑制肝癌细胞中EphA3的表达。设立未处理组(未处理肝癌细胞),对照组(加入对照siRNA)和siRNA干扰组(加入siRNA干扰EphA3)。用RT-PCR和Westernblot法检测EphA3的表达;用Transwell小室检测不同处理后的HepG2和MHCC97H细胞的侵袭能力;采用Westernblot和ELISA法检测VEGF蛋白表达和活力的变化情况。多组比较采用单因素方差分析,组间比较采用LSD—f检验。结果HL-7702、HepG2和MHCC97H中EphA3mRNA的相对表达量分别为0.94±0.13、1.76±0.16和3.62±0.14;EphA3蛋白的相对表达量分别为0.96±0.12、1.59±0.11和3.82±0.11,非肿瘤细胞与肝癌细胞中EphA3表达比较,差异有统计学意义(t=2.511,6.437;2.321,6.895,P〈0.05)。RT—PCR法检测HepG2细胞系中未处理组、对照组、siRNA干扰组EphA3mRNA的相对表达量分别为0.95±0.11、0.96±0.12和0.31±0.15,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=4.051,P〈0.05);MHCC97H细胞中EphA3mRNA的相对表达量分别为0.97±0.16、0.95±0.14和0.40±0.11,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=5.237,P〈0.05);Westernblot法检测3组HepG2细胞中EphA3蛋白的相对表达量分别为0.97±0.16、0.95±0.15和0.32±0.17,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=4.145,P〈0.05);MHCC97I-I细胞中EphA3蛋白的相对表达量分别为0.95±0.11、0.96±0.12和0.38±0.17,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=4.327,P〈0.05)。采用体外侵袭实验,检测3组穿透的细胞数量,HepG2细胞系细胞数量分别为(111±4)个/10HPF、(109±5)个/10HPF和(51±3)个/IOHPF,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=7.582,P〈0.05);MHCC97H细胞系细胞数量分别为(402±6)个/10HPF、(397±7)个/10HPF和(152±7)个/10HPF,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=9.479,P〈0.05)。Westernblot法检测HepG2细胞系中3组VEGF蛋白的相对表达量分别为0.98±0.11、0.96±0.13和0.57±0.11,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=3.167,P〈0.05);Westernblot法检测MHCC97H细胞系中3组VEGF蛋白的相对表达量分别为0.97±0.14、0.98±0.12和0.34±0.15,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=4.278,P〈0.05)。ELISA法检测HepG2细胞系中3组VEGF蛋白的相对活力OD值分别为0.96±0.15、0.94±0.11和0.47±0.13,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=3.981,P〈0.05);NHCC97H细胞中VEGF蛋白的相对活力OD值分别为n98±0.12、0.97±0.12和0.38±0.14,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(t=4.059,P〈0.05)。结论EphA3可能是通过调控VEGF蛋白表达和活性来实现肝癌细胞的侵袭,提示EphA3可作为肝癌治疗的新靶点。 相似文献
2.
4.
5.
目的 研究RhoA基因在肝细胞肝癌中的表达及其与肝癌临床病理特征的关系.方法 应用实时荧光定量RT-PCR与Western blot同步检测64例肝细胞肝癌及对应癌旁组织中RhoA mRNA及蛋白的表达情况,分析RhoA基因的表达与肝细胞肝癌临床病理参数的关系.结果 肿瘤组织中RhoA mRNA的表达量明显高于癌旁组织(t=3.445,P=0.0006),RhoA mRNA肝癌中的表达水平与肿瘤病理分期密切相关,在门静脉受侵犯(t=2.667,P=0.009)、有微卫星灶(t=2.172,P=0.038)和pTNM分期较晚(Ⅲ和Ⅳ期,t=2.551,P=0.013)的患者中明显升高.Western blot结果显示肿瘤组织中RhoA蛋白的水平明显高于癌旁组织(t=3.532,P=0.0002),RhoA蛋白的含量在门静脉受侵犯(t=2.087,P=0.042)、有微卫星灶(t=2.254,P=0.031)和pTNM分期较晚(Ⅲ和Ⅳ期;t=2.812,P=0.007)的患者中明显升高.RhoA在肝癌组织中高表达,其表达量与肿瘤侵袭能力、门静脉癌栓以及肿瘤分期相关.结论 RhoA基因可能成为一种新的肿瘤标志物,用于判断良恶性、肿瘤转移能力和估计预后. 相似文献
6.
当今医学教育需要培养学生的自学能力,从而适应不断变化的医疗服务的需求.以问题为基础学习教学方法有助于培养学生的创新思维和自学能力.第四军医大学西京医院借鉴国内外医学教育经验,根据本校的实际情况,在外科学教学中实施了以问题为基础学习(problem-based learning,PBL)教学方法,取得了初步成效.实践证明,PBL教学方法有利于调动学生的学习积极性,培养学生的临床思维和逻辑思维能力,是一种有益的教学方法. 相似文献
7.
肿瘤组织的构成非常的复杂,包括肿瘤细胞、多种非肿瘤细胞(炎症细胞、纤维母细胞、髓系细胞等)、细胞外基质、脉管系统、各种细胞因子等[1]。这些复杂成分在肿瘤组织周围可以形成一个动态的、利于肿瘤细胞生长的微环境,即肿瘤微环境。而细胞外基质的降解与微环境的稳态有密切的关系。在肿瘤组织,异常的基质降解可以导致肿瘤组织炎症发生、无序生长、 相似文献
8.
9.
肝移植术后出凝血功能的调控 总被引:18,自引:1,他引:17
目的:探讨肝移植术后出凝血功能的调控方法及意义。方法:通过11 例活体肝部分移植术病例,介绍术后出凝血功能的监测指标及调控方法。结果:肝移植术后出凝血功能调控的目标为维持血压、脉搏相对稳定,控制下列指标在一定范围内。 Hb :90 ~110g/ L, Ht:25 % 上下, P L T:30 ~50 ×109/ L, P T:15 ~20s , A C T:150 ~200s,调控手段是依据上述指标补充凝血因子或使用扩血管剂或抗凝剂。结论:本研究所介绍的方法能有效防止肝移植术后的出血和血栓形成。 相似文献
10.