乳腺癌术后乳房重建的要素

2010年NCCN指南已经将乳腺癌术后乳房重建纳入乳腺癌综合治疗的一部分。乳房重建不但可修复乳腺癌根治术后胸壁的缺损,重塑胸壁外形,避免因长期使用外置假体给生活带来的不便;同时也能增强患者自信,避免因乳房缺失造成的心理压力。针对患者而言,是否实施乳房重建及重建材料、方式和时间的选择,首先应充分尊重患者的意愿,并考虑其体型特征、全身情况、肿瘤治疗计划及重建效果等综合因素。     

血液滤过治疗重症急性胰腺炎的疗效观察

目的观察血液滤过(HF)在重症急性胰腺炎(SAP)治疗中的作用。方法对比分析30例SAP,其中15例接受HF治疗,APACHEⅡ评分为16.26±4.36,从发病到开始HF时间(1.7±0.43)d,HF治疗时间为(27.8±1.0)h。为12~24h不间断滤过,采用低分子肝素抗凝。另15例SAP未接受HF治疗APACHEⅡ评分为14.46±3.86。结果15例接受HF治疗病人有2例死亡(13.3%),1例因脑死亡放弃治疗,12例治愈出院。另外15例未接受HF治疗病人有3例死亡(20%),12例治愈出院。接受HF治疗的15例SAP病人在HF后96h内心率,呼吸频率、尿量、动脉血氧分压、电解质及腹胀、腹痛等自觉症状较HF治疗前和未接受HF治疗病人有明显改善,所有病人均能良好耐受HF治疗,治疗中未出现明显不良反应。结论HF能明显改善SAP患者的呼吸、心率、尿量、电解质、血氧饱和度及腹痛、腹胀等,治疗中血液动力学稳定,无明显不良反应。     

4′,5,7-三羟基黄酮,芹菜配基对人乳腺癌细胞生长和侵袭潜力的影响

目的探讨透明质酸酶（Hyaluronidase，Hyase）抑制剂4′，5，7-三羟基黄酮，芹菜配基（Apigenin）对人乳腺癌细胞生长、增殖及侵袭潜力的影响。方法通过体外侵袭模型观察Apigenin对人乳腺癌细胞穿透Matrigel（人工基底膜）能力的影响；MTT法和流式细胞仪检测Apigenin对人乳腺癌细胞株生长和增殖的影响。结果8株人乳腺癌细胞的侵袭潜力存在明显差异。加用Apigenin后其侵袭潜力均明显降低（P〈0．05），并与Apigenin存在量效关系；Apigenin对MDA-MB-435S和T47D细胞株的生长抑制作用均呈浓度依赖性；流式细胞仪显示Apigenin阻滞人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和ZR-75-30生长于G2／M期（P〈0．05）。结论Apigenin可抑制人乳腺癌细胞的增殖和Hyase的表达，并可降低人乳腺癌细胞株的侵袭潜能。     

REGgamma基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

目的:探讨蛋白酶体激活因子REGgamma(REGγ)基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的作用.方法:构建真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ,通过脂质体转染将REGγ基因导入MCF-7,以G418(800mg/L)连续筛选获得稳定高表达REGγ基因的细胞株,以转染空载体和未转染细胞作为对照.分别利用MTT法及免疫细胞化学方法检测各组细胞PCNA的表达分析REGγ基因对细胞增殖的影响;以Caspase-3分光光度法及AnnexinV-FITC的流式细胞仪(FCM)来检测细胞凋亡的变化;以透射电镜(TEM)观察细胞超微结构的改变.结果:获得稳定转染且高表达REGγ的细胞株.经Western Blot检测转染REGγ基因的细胞(实验组),其REGγ蛋白表达明显高于对照组细胞(P＜0.05);未转染组、空载体组和实验组细胞的倍增时间分别为34.6、35.1、26.7h.提示实验组细胞倍增时间缩短;MTT法绘制生长曲线提示实验组细胞生长明显加速;免疫细胞化学检测PCNA结果显示,未转染组、空载体组和实验组细胞的染色灰度值分别为89.61±14.32、87.95±16.38、133.47±8.14,表明实验组细胞PCNA表达明显增强(P＜0.01);Caspase-3分光光度法检测显示,实验组细胞的OD值普遍低于对照组(P＜0.05);Annexin V-FITC的FCM检测显示,实验组细胞的凋亡率明显低于对照组(P＜0.01);TEM观察实验组细胞表现为核仁肥大,线粒体、高尔基体丰富或扩张,未见凋亡小体形成.结论:REGγ基因具有促进乳腺癌MCF-7细胞增殖并抑制其凋亡的作用.     

靶向Livin的siRNA提高MDA-MB-231细胞对阿霉素敏感性的可能机制

目的:采用RNA干扰技术下调Livin基因的表达,观察其提高乳腺痛细胞对阿霉素化疗的敏感性及机制.方法:构建3个靶向Livin的siRNA真核表达载体,转染乳腺癌细胞MDA-MB-231后,通过实时定量PCR,Western Blot技术检测干扰前后Livin和Caspage-3的表达;采用MTT法检测细胞增殖的变化以及细胞对阿霉素的半数抑制浓度(IC50),流式细胞法检测细胞周期,TUNEL法检测其诱导细胞对阿霉素化疗增敏作用,并观察细胞超微结构变化.结果:成功构建了针对Livin基因的3个特异性siRNA表达载体,si-Livin2对Livin的mRNA和蛋白抑制效率最高,分别为76.4%和70.2%.同时Cagpase-3的mRNA和蛋白表达升高约157.1%和38.6%(P<0.05).si.Livin2转染48 h后,与未转染组相比,细胞增殖活力受到抑制,si-Livin2联合阿霉素使细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05),显著提高了细胞对阿霉素敏感性,其凋亡率达到(38.35±2.64)%,IC50降低为(2.46±0.87)mg/L,差异具有统计学意义(P<0.05).透射电镜下可见细胞胞质浓缩,染色质聚集为小团块,电子密度增高.结论:靶向Livin siRNA真核表达载体可以有效地下调MDA-MB-231细胞Livin基因的表达,并且通过上调Cagpage-3的表达抑制细胞增殖,显著增强其对阿霉索的敏感性.     

人REGγcDNA克隆及其稳定转染细胞株的建立

目的:构建真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ的稳定转染细胞株,为进一步深入研究REGγ的功能奠定基础.方法:提取MCF-7细胞的总RNA为模板,通过RT-PCR获取全长REGγcDNA,经限制性内切酶EcoR I、EcoR V酶切后与PcDNA3.1连接构建重组体,冉经内切酶酶切及DNA序列分析鉴定重组体构建正确.以Lipofectamine2000将重组体导入HBL-100细胞,南G418筛选出稳定转染细胞株.结果:经免疫细胞化学和RT-PCR检测并证实稳定转染细胞株中有REGγ的高表达.结论:真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ构建成功,并经抗生素筛选获得了稳定高表达REGγ的细胞株,为进一步研究REGγ的功能奠定了基础.     

中法医学生临床实习的差异及启示

通过将法国阿尔萨斯地区肿瘤中心（Cenre Paul Strauss）医学生的临床实习情况与中国医学生的临床实习进行对比,分析它们的差异,提出几点启示。     

人乳腺癌细胞株透明质酸酶基因的表达及其意义

目的检测人乳腺癌细胞透明质酸酶(hyaluronidase,Hyase)基因的表达.方法应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别测定9株人乳腺癌细胞的透明质酸酶基因表型,并与透明质酸酶的表达作对比分析.结果 9株人乳腺癌细胞均表达透明质酸酶基因的HYAL-1亚型,且存在差异性,不表达PH-20亚型.结论 HYAL-1为人乳腺癌细胞株透明质酸酶的主要基因表型.     

透明质酸酶及基质金属蛋白酶-9在人乳腺癌侵袭与转移中的意义

目的研究透明质酸酶(HAase)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在人乳腺癌侵袭与转移中的意义。方法应用组织匀浆、酶连吸附测定法及免疫组化等方法测定HAase和MMP-9在人乳腺癌中的表达和其病理特征比较。结果①乳腺癌组织学分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组HAase的分别为4.89±2.55、8.03±2.66、12.00±3.96 mU/g(n=10,20,3),Ⅲ级组>Ⅱ级组>Ⅰ级组(P<0.05)。乳腺癌有腋淋巴结转移组HAase表达(8.27±3.26 mU/g,n=23)明显高于无腋淋巴结转移组(5.53±2.82 mU/g,n=10)(t=-2.305,P=0.028)。②MMP-9阳性率在淋巴结转移组为(78.3%,18/23),明显高于无淋巴结转移组(30.0%,3/10)(P=0.016)。③MMP-9阳性组(n=21)HAase(8.57±3.12)mU/g明显高于阴性组(n=12)(5.47±2.85)mU/g(t=2.830,P=0.008)。结论HAase和MMP-9一样,与人乳腺癌侵袭与转移有关。