丁基苯酞对帕金森模型小鼠中脑黑质多巴胺能神经元数及TH、TNF-α蛋白表达的影响

目的研究丁基苯酞(dl-3n-butylphthalide,NBP)对由MPTP诱导的C57BL/6小鼠帕金森模型中脑黑质多巴胺能神经元数及TH、TNF-α蛋白表达的影响,进一步探讨其保护机制。方法 24只C57BL/6小鼠,随机分成3组:正常对照组,MPTP组,NBP治疗组。MPTP腹腔注射法制备帕金森模型,免疫组织化学法观察中脑黑质TH阳性神经元细胞数,蛋白质印迹法观察中脑黑质TH、TNF-α蛋白含量的变化。结果 (1)与正常对照组比较,MPTP组可见帕金森病小鼠中脑黑质TH阳性神经元明显减少(P0.01);与MPTP组比较,NBP治疗组帕金森病小鼠中脑黑质TH阳性神经元数目明显增加(P0.01);(2)与正常对照组比较,MPTP组帕金森病模型小鼠中脑黑质TH蛋白表达减少(P0.01),而TNF-α蛋白表达增加(P0.05);(3)与MPTP组比较,NBP治疗组帕金森病模型小鼠中脑黑质TH蛋白表达明显增加(P0.01),而TNF-α蛋白表达减少(P0.05)。结论丁基苯酞可能通过提高中脑黑质中TH的含量及减少TNF-α炎性介质表达发挥对MPTP所致C57BL/6小鼠帕金森模型的神经元保护作用。     

胰岛淀粉样多肽对高糖刺激下INS-1细胞凋亡及其相关基因表达的影响

目的探讨高糖刺激下转染过表达人胰岛淀粉样多肽基因的大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)细胞凋亡的影响及其相关基因表达。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测高糖刺激后INS-1及转染人胰岛淀粉样多肽的INS-1细胞(h IAPP/INS-1)上清液的胰岛素水平;利用Hoechst33258染色检测细胞凋亡百分率;采用RTPCR方法检测高糖刺激培养后的Bcl2、Bax m RNA的水平。结果高糖刺激下,与未转染人胰岛淀粉样多肽INS-1细胞相比较,h IAPP/INS-1细胞胰岛素分泌功能显著下降,凋亡细胞比例明显增加,抗凋亡基因Bcl2 m RNA表达水平下调,促凋亡基因Bax m RNA表达水平上调,Bcl2/Bax比例明显降低。结论人胰岛淀粉样多肽上调促凋亡基因表达和抑制抗凋亡基因表达可能与糖尿病的发生发展相关。     

神经生长因子与运动神经再生

神经生长因子是周围神经再生微环境中的重要物质成份之一，在神经再生过程中具有重要的生物学功能。近年来的研究表明，神经生长因子除可维持交感、感觉神经元的存活及促进其轴突生长外，对运动神经元也具有潜在的生物学效应。尤其是随着神经生长因子在运动神经轴突内逆行运输的证实，神经生长因子及其同族物质对运动神经元的营养作用、促进轴突再生作用及其作用机理的研究已引起国内外学者的重视。本文仅就神经生长因子与运动神经再生的研究现状进行综述，供同行参考。     

锌转运体8与小鼠睾丸间质细胞睾酮生成相关

目的锌转运体8(ZnT8)与胰岛素等激素的分泌有关,但其在睾丸的功能尚不清楚,本实验旨在探讨ZnT8在小鼠睾丸的分布与功能。方法通过免疫组织化学技术检测成年雄性小鼠睾丸ZnT8的分布;乳鼠腹腔注射hCG(human chorionic gonadotrophin,人绒毛膜促性腺激素),注射5d后,检测乳鼠睾丸ZnT8的分布;化学发光法检测乳鼠血清睾酮水平。结果 ZNT8主要分布在成年雄鼠睾丸间质细胞,hCG处理乳鼠在血清睾酮升高的同时伴有睾丸间质细胞ZnT8表达增加。结论 ZnT8的功能可能与小鼠睾丸间质细胞睾酮合成有关。     

APP/PS1转基因小鼠脑内铁死亡参与阿尔茨海默病病理改变的研究

目的 研究APP/PS1转基因小鼠脑内铁死亡与阿尔茨海默病病理改变的相关性.方法 选择不同月龄的野生型C57BL/6和APP/PS1小鼠,利用普鲁士蓝染色检测小鼠脑内铁累积情况;采用蛋白免疫印迹、免疫组织化学染色和免疫组织荧光法观察铁运输、储存、调节和铁死亡相关蛋白的表达及分布情况.结果 野生型小鼠海马和前额叶中铁死亡标志性蛋白随月龄增加而降低;与野生型对照相比,APP/PS1小鼠海马中长链脂酰辅酶A合成酶4显著升高(P＜0.001),且在β-淀粉样斑块处呈现明显富集现象,溶质载体家族7成员11、谷胱甘肽过氧化物酶和铁死亡抑制蛋白1的蛋白表达显著降低(P＜0.001);APP/PS1小鼠皮层、海马、嗅球和小脑有明显的铁蓄积,海马中铁转运、储存蛋白表达异常和铁调节蛋白功能紊乱.结论 APP/PS1小鼠脑内铁死亡与铁代谢功能紊乱、铁死亡相关蛋白表达异常密切相关,可能参与AD病理改变.     

固定后保存于缓冲液的人肝材料ATP酶活性的光电镜枸橼酸铅法的改良

肝脏是人体消化，解毒，免疫，代谢的重要器官。近年来肝癌、肝硬化、肝炎等各种肝脏疾病严重影响人们的生理和生存。ATP酶是肝脏的重要功能酶之一，对肝脏ATP酶的研究，有助于对肝脏的了解。以往关于酶组化研究方法的报导，几乎无1例不是要求取新鲜材料。而对固定后保存于缓冲液内的材料的酶活性存在时间的研究甚少，为解决这一问题，我们对固定后保存于缓冲液内的人肝材料的ATP酶活性应用枸橼酸铅法的改良法进行光电镜的系列实验探讨。     

ZnT7及游离锌离子在小鼠室管膜和脉络丛细胞的分布

目的 研究锌转运体7（ZnT7）和游离锌离子在小鼠脊髓室管膜和脉络丛上皮细胞中的分布.方法 应用ZnSe金属自显影技术（AMG）检测硒酸钠注射1.5h后小鼠脊髓室管膜细胞及脑室脉络丛上皮细胞的游离锌离子;应用免疫组织化学SABC法检测小鼠脊髓室管膜细胞及脑室脉络丛上皮细胞中ZnT7的表达.结果 光镜下观察AMG染色的切片,小鼠脊髓室管膜细胞及脑室脉络丛上皮细胞中均有游离锌离子的分布;免疫组织化学结果表明,脊髓室管膜细胞及脉络丛上皮细胞中均有ZnT7的表达,且与游离锌离子分布区域基本一致.结论 锌离子可能在脊髓室管膜细胞及脉络丛上皮细胞内发挥重要作用,脊髓室管膜细胞及脉络丛上皮细胞可能在脑脊液锌转运过程中发挥重要的作用.     

骨质疏松大鼠椎间盘的超微结构研究

目的:观察骨质疏松大鼠椎间盘中髓核组织的超微结构改变,探讨其发病机理.方法:6月龄雌性SD大鼠64只,实验组32只,行双侧卵巢切除术;对照组32只,行假手术.术后3个月两组分别以Prodigy骨密度仪作大鼠腰椎骨密度值(BMD)测定;同时分别处死5只大鼠,摘取子宫组织,进行病理学检查;术后3个月分别取两组大鼠L4-L5椎间盘,应用电镜技术,对取出的髓核组织进行超微结构观察.结果:术后3个月大鼠腰椎BMD,实验组和对照组之间有非常显著性的差异(P＜0.01);同时实验组子宫病理学检查和对照组比较,明显萎缩.证实骨质疏松模型建立的成功.电镜结果显示:(1)软骨细胞减少,多呈不同程度地退变、死亡,细胞外用致密颗粒增多.(2)胶原纤维发生不同程度的变性、融合、扭结或钙化,胶原纤维束间裂隙增大.(3)弹力纤维数量减少,伴老化、变性.结论:骨质疏松大鼠椎间盘都有不同程度的退变.     

低粘度Spurr树脂包埋剂在TEM生物样品制备过程中的应用

Spurr等人推荐使用一种低粘度的环氧树脂包埋剂,并通过对植物的根、果实等进行包埋及超薄切片,指出这是一种良好的植物样品包埋剂,此后一些文献将这种包埋剂称为Spurr树脂包埋剂。我室