索拉非尼治疗晚期肝细胞性肝癌的耐受性研究

目的 探讨索拉非尼在临床治疗晚期原发性肝癌中的耐受性、安全性及相关疗效.方法 对2008年11月至2009年11月间于我院诊断晚期原发性肝癌接受索拉非尼治疗的患者的相关临床数据进行分析,应用t检验及x2检验.结果 本研究16例患者,平均生存时间12.37个月.治疗前Child评分A级者11例、B级3例、C级2例;治疗3个月后,治疗前A级患者中4例进展至B级,B级中2例进展至C级.治疗前MELD平均值为5.31,治疗后1个月为5.38(P＞0.05),治疗后3个月为6.67(P＞0.05).治疗前Child A级的患者平均总生存期为14.00个月,B/C级患者为8.80个月(P＞0.05).根据BCLC分期,B级患者的平均生存时间为13.70个月,C/D级患者的平均生存时间为10.17个月.结论 索拉非尼治疗可延长晚期肝细胞性肝癌的总生存期,并且在不同肝功能状态的患者中均耐受性良好.     

反转录病毒载体介导猪MHCⅡ分子在猪骨髓细胞中的表达

目的构建猪MHC Ⅱ分子的反转录病毒表达载体，建立产生病毒颗粒的包装细胞株，体外转导小型猪骨髓细胞并观察目的基因的表达情况，为研究小型猪转导同种异体MHC Ⅱ分子对于肝脏移植特异性免疫耐受的诱导提供实验基础和实验材料。方法利用基因重组技术将目的基因SLA-DRB^dd、SLA-DQA^dd和SLA-DQB^dd克隆到反转录病毒载体pLNCX2上，通过脂质体转染包装细胞AmphoPack^TM-293细胞，从G418筛选阳性克隆细胞培养上清中获得了有感染性的病毒颗粒；并对体外培养的猪骨髓细胞进行了感染，采用Nothern杂交和逆转录．聚合酶链反应（RTPCR）等方法检测了目的基因在骨髓细胞中的表达。结果经过酶切和测序验证已成功构建了MHC Ⅱ分子的反转录病毒表达载体，在转染AmphoPack^TM-293细胞后可以产生有感染性的重组病毒颗粒，稳定的CFM-GFG418抗性率为6％～11％，RT结果显示抗性细胞中有目的基因的RNA转录产物存在，而转染空载体的对照组没有。结论重组有目的基因的逆转录病毒载体pLNCX2经过包装细胞AmphoPack^TM-293产生的病毒颗粒可以有效地将猪MHC Ⅱ分子转导入猪的骨髓细胞并获得长期稳定的表达。     

缺氧预适应抑制内皮细胞冷缺氧/温复氧损伤

目的 研究缺氧预适应对内皮细胞冷缺氧／温复氧损伤的作用及可能机制。方法 培养的内皮细胞ECV-304分成4组，A组，对照组；B组，冷缺氧／温复氧（A／R）组95％N2／5％a=）2缺氧装置中用4℃UW液保存24h；C组，缺氧预适应组（APC），内皮细胞在缺氧前遭受4个循环短时间缺氧／复氧；D组，缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）抑制组：缺氧预适应前，细胞培养液中加入5μmol／L的HIF-1α抑制剂NS398，余同C组。缺氧结束后，各组37℃5％CO2 95％空气中复氧6h。分别以逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法、Western blot法检测各组HIF-1α mRNA和蛋白表达，内皮细胞保护作用通过细胞存活率（台盼蓝拒染法）、LDH释出率及ICAM-1的表达判定。结果 缺氧预适应明显上调HIF-1α mRNA和蛋白表达，显著抑制冷保存内皮细胞缺氧／复氧损伤，表现为更高的细胞存活率，更少的LDH释出和ICAM-1的表达。而HIF-1α抑制剂可逆转这种保护作用。结论 缺氧预适应能有效地抑制冷保存内皮细胞缺氧／复氧损伤，这种细胞保护作用可能是通过HIF-1α介导的。     

肝移植病人术后急性肾功能衰竭18例临床分析

目的:探讨影响肝移植术后发生急性肾功能衰竭的原因及处理方法。方法:回顾性分析我院91例肝移植病人中发生与未发生术后急性肾功能衰竭病人的临床资料,采用单因素分析和Logistic回归模型进行多因素分析。结果:肾衰组病人1年生存率低于对照组;与术后发生早期急性肾功能衰竭的有关因素包括术前血清肌酐、总胆红素、总手术时间、术中出血量、输血量、术中输液总量、术中尿量。术前血清肌酐高和术中尿量是术后早期急性肾功能衰竭发生的独立影响因素。移植术后发生急性肾功能衰竭的病人ICU留置时间延长,术后住院时间延长,住院费用升高。结论:肝移植术后有较高的急性肾功能衰竭发生率,对术后少尿、血清肌酐水平升高的病人及早实施肾脏替代等治疗能有效降低其发病率和死亡率。     

肝移植治疗慢性重型肝炎手术时机的选择(附59例临床分析)

目的:探讨慢性重型肝炎行肝移植术的合适手术时机。方法:总结2003年9月～2005年7月我科收治的59例慢性重型肝炎病人的临床资料,有52例行肝移植术,7例未行肝移植术,并就病人肝移植手术时机的选择和预后作回顾性分析。结果:本组59例慢性重型肝炎病人,肝移植组的1年存活率为83.3%,明显高于内科综合治疗组的14.3%(P<0.01)。肝移植组中,术前终末期肝病模型(MELD)评分≥16分病人的1年生存率为76.5%,明显低于MELD评分<16分病人的89.5%(P<0.05);术前MELD评分≥16分的病人平均手术时间(7.3±2.6)h,明显长于MELD评分<16分的(5.4±1.5)h(P<0.05);术前MELD评分≥16分病人的术中失血量和输血量分别为(4860±1980)ml和(5240±2160)ml,明显多于MELD评分<16分病人的(1780±670)ml和(2110±790)ml(P<0.01);术前MELD评分≥16分病人的术后呼吸支持时间I、CU留置时间和住院时间分别为(5.3±2.2)d(、6.1±2.7)d和(31.7±11.6)d,明显长于MELD评分<16分病人的(3.2±2.1)d(、3.4±2.0)d和(23.8±7.5)d(P<0.05);术前MELD评分≥16分病人的平均住院费用为(36.9±9.3)万元,明显高于MELD评分<16分病人的(23.2±5.2)万元(P<0.05);术前MELD评分≥16分病人的术后各种感染及肾功能衰竭并发症的发生率分别为71.4%和23.8%,明显高于MELD评分<16分病人的35.4%和3.2%(P<0.01)。结论:慢性重型肝炎病人术前MELD评分≥12分并<16分时是比较合适的手术时机,而术前MELD评分≥16分的病人手术预后明显较差。     

应用MELD与CTP评分预估乙型肝炎患者肝移植后早期临床结果的比较分析

目的 探讨术前终末期肝病模型(MELD)评分和Child-Turcotte-Pugh(CTP)评分预估乙型肝炎患者肝移植后早期临床结果 的价值.方法 以31例接受首次肝移植、原发病为慢性乙型肝炎、肝硬化的患者为对象,术前对其进行MELD评分和CTP评分,并计算术前1个月和术前即时MELD评分的差值(△MELD).均采用背驮式肝移植术式.观察患者的术中情况,统计受者术后6个月存活率以及各类并发症的发生率,分析3种评分与它们的相关关系.结果 31例中,MELD评分<25分者21例,≥25分者10例;△MELD值<5分者23例,≥5分者8例;术前CTP评分为A级者5例,B级者5例,C级者21例.术前MELD评分<25分者和≥25分者的6个月存活率分别为85.7%和50.0%(P<0.05);△MELD值<5分者和≥5分者的6个月存活率分别为91.3%和25.0%(P<0.01);CTP分组中,A、B、C级间6个月存活率的差异无统计学意义.MELD评分<25分者和△MELD值<5分者的手术耗时明显短于评分较高者(P<0.05,P<0.01),其术中少浆血的需要量也显著减少(P<0.01);在术中大出血和低血压的发生率上,△MELD值<5分者明显低于≥5分者(P<0.01;P<0.05).术前MEID评分<25分者术后败血症和腹腔感染发生率明显低于≥25分者(P<0.05,P<0.05);△MELD值<5分者术后急性肾功能衰竭、胆漏、败血症和腹腔感染发生率明显低于≥5分者(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01).经多因素回归分析,仅有△MELD值与受者术后存活率呈负相关.结论 术前MELD评分能较好地预测慢性乙型肝炎患者肝移植术后的早期临床结果 ;术前MELD评分≥25分和△MELD≥5分,患者肝移植后的存活率低,并发症的发生率较高,预后较差.     

锰苯甲酸卟啉干预活性氧在小肝移植物缺血再灌注损伤中的作用及其意义

目的 观察锰苯甲酸卟啉(MnTBAP)对SD大鼠小肝移植物模型缺血再灌注损伤的治疗及保护作用.方法 采用二袖套法建立供肝/标准肝体积比(GV/SV)≤30%的小肝移植物大鼠模型,将大鼠随机分为A:假手术组(n=24),B:对照组(n=24),C:MnTBAP治疗组(n=24),于复流后3、6、12、24 h各取6只处死取材,检测各组大鼠肝组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA表达、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、肝功能指标和肝细胞凋亡间的状态.结果 与假手术组比较,对照组肝组织TNF-α mRNA及MDA、MPO含量显著升高(P<0.01),肝丙氨酸转氨酶(ALT)活性显著升高(P<0.01),肝细胞凋亡明显增多(P<0.01);而MnTBAP治疗组的肝组织MDA、MPO含量较对照组显著降低(P<0.05),肝细胞凋亡减少,且在术后6、12、24 h,肝TNF-α mRNA表达均下降(P<0.05),血清ALT水平也明显降低(P<0.01).结论 MnTBAP可以抑制中性粒细胞的呼吸爆发,降低肝组织TNF-α mRNA表达、减轻细胞膜损伤程度,对缺血肝损伤有良好的保护作用.     

索拉非尼联合X线立体定位放疗治疗肝细胞癌的疗效评价

目的 探讨靶向药物索拉非尼联合射波刀在临床治疗无法手术切除的肝细胞癌患者中的安全性及初步疗效.方法 回顾性分析自2009年1月至2011年2月间诊断为肝细胞癌、无法接受手术根治性治疗而接受索拉非尼联合射波刀的10例患者的相关临床数据.结果 本研究中共10例患者入组,生存时间为(15.5±5.38)个月,中位疾病进展时间7个月.随访至2011年8月,根据BCLC分期,B级患者的生存时间为(16.67±6.56)个月,C级患者的生存时间为(13.75±2.87)个月(P=0.433).治疗前肿瘤总直径为(6.96±2.75)cm,治疗后6个月为(6.55±3.04)cm;治疗前AFP值(933.8±1333.72) μg/L,治疗后为(119.2±182.76) μg/L,(P=0.082),5例患者AFP水平较治疗前下降超过50%.结论 索拉非尼联合射波刀治疗可延长无法手术切除的肝细胞癌患者的总生存期,能有效抑制局部肿瘤生长,同时联合治疗的耐受性良好.     

用医用高分子塑料制造的手术牵开器的研究

目的 观察医用外科软组织扩张器的力学特性及临床应用结果.方法 应用拉力测试装置对医用外科软组织扩张器和金属腹部牵开器进行力学实验,测量在不同的初始牵引力下,牵引器在持续牵引过程中随时间发生的牵引力变化及位移变化.再通过临床对照研究,比较医用外科软组织扩张器与传统的金属牵开器的临床应用结果.结果 力学实验结果提示,随时间的延长,医用外科软组织扩张器的残留牵引力逐渐递减,在牵引1h后,残留牵引力较基础牵引力平均减少了10％ - 13％；而金属腹部牵开器的牵引力在牵引过程中没有发生变化.临床试验中,共120例患者入组,试验组及对照组各60例.试验组50/60例(83.3％)手术使用后,外科医生对术野显露的评价为非常满意,10/60例(16.7％)评价为满意,平均使用效果评分为4.83分；对照组为35/60例(58.3％)评价非常满意,评分4.58分(P＜0.05).而在围手术期临床结果分析中,试验组与对照组患者在术中出血量、术后胸腔积液发生率和住院天数上结果相似,差异无统计学意义.两组患者围手术期疼痛评分最高值在试验组及对照组患者中分别为(2.60±0.65)分和(4.10±0.45)分(P＜0.05),至术后6个月,两组患者慢性疼痛发生率分别为20/60(33.3％)和44/60(73.3％),持续时间分别为(1.80±1.19)个月和(3.70±1.84)个月(P＜0.01).试验组在术后所用的器械清理时间平均为(5.0 ±2.3)min；而对照组为(370.0±5.8) min(P＜0.01).结论 医用外科软组织扩张器在临床使用中评价良好,临床收益与传统的腹部牵开器相似,但减少了术后伤口感染的机会,并显著降低了患者术后的疼痛程度并减少了术后疼痛时间.     

受体猪表达供体MHCⅡDRβ分子对肝移植物存活的影响

目的 通过回输表达供体部分MHCⅡDRβ分子的自体骨髓细胞，观察受体对供体肝移植物的排斥情况。方法 将供体猪MHCⅡDRβ分子进行克隆，并通过基因重组技术将其克隆到反转录病毒载体pLNCX2上，经过细胞学操作获得有感染性的病毒颗粒；体外感染受体骨髓细胞，并将感染后的骨髓细胞回输给受体，随后采用Nothern杂交和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）等方法检测供体基因的表达，并通过MLR反应检测受体对供体的免疫排异反应；之后进行全肝脏移植实验，观测移植物的排异反应。结果 实验组6头受体全部有外源基因的表达；进行回输后受体免疫功能都基本回复，MLR检测显示受体对供体的反应性明显下降，而对第三方的有较强的排异反应；进行移植后实验组中的5头移植物存活良好，而对照组于12～18周先后死亡，两者差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 猪受体在接受供体肝脏移植前，如果用供体的部分MHCⅡDRβ分子进行修饰并在体内进行表达，可以明显延长移植物的存活时间。