面神经损伤与修复对大鼠面神经核内信号转导子和转录激活子3活性的影响

目的:探讨面神经损伤与修复条件下,面神经核运动神经元信号转导子和转录激活子3的活性以及DNA结合活性的变化。方法:实验于2004-07/10在解放军第三○三医院神经科实验室完成,选择成年雄性SD大鼠40只,随机分为2组,每组20只。单纯面神经切断组:大鼠左侧面神经切断后不予吻合处理。面神经切断后吻合组:大鼠左侧面神经切断后给予端端吻合。两组大鼠右侧面神经(健侧)作为对照。检测成年大鼠面神经切断和即刻端端吻合后面神经核内信号转导子和转录激活子3以及DNA结合活性的变化,运用抗磷酸化转导子和转录激活子3抗体做免疫印迹以及电泳迁移率改变的实验。结果:参加试验2组40只大鼠,在实验过程中,2组各有2只动物死亡,最终进入结果分析为2组,每组18只。①两组面神经核内抗磷酸化转导子和转录激活子3含量:两组健侧面神经核内抗磷酸化转导子和转录激活子3含量较低,术后第7天,两组转导子和转录激活子3磷酸化水平均较健侧增加,其增加值分别为100.9%和97.0%,两者与健侧均具有显著差异(t=-35.223,-39.778,P<0.05)。两组抗磷酸化转导子和转录激活子3含量较接近(P>0.05)。②两组面神经核内转导子和转录激活子3DNA结合活性:两组健侧面神经核抽提物的DNA结合活性较低,术后7d,两组转导子和转录激活子3DNA结合活性显著增加,其增加值分别为118.3%和116.0%(t=-185.726,-172.800,P<0.05)。两组之间转导子和转录激活子3DNA结合活性接近(P>0.05)。结论:面神经损伤可以诱导损伤侧面神经核运动神经元的信号转导子和转录激活子3磷酸化以及DNA结合活性增加,经端端吻合修复损伤面神经,上述两指标亦增加,两者增加幅度基本一致。提示面神经损伤后面神经核运动神经元内由信号转导子和转录激活子3介导的细胞因子的信号转导作用增加。     

八年制人体解剖学教学的特征与实践

<正>八年制医学教育属精英教育,具有更高的教学目标和新型的教学模式。对于其人体解剖学教学,我国一些学者[1-3]提出了一些设想和建议。我校该学制的目标是培养具有宽厚的理论与人文基础、良好的实践与创新能力、优秀的思维及科研品质,能够适应信息化条件下局部战争需要的临床医学高级专门人才。单独编班上课,每班次20～30人,学员素质高,学习接受能力强。     

多肽修饰可促进心血管植入材料的内皮化

背景：将多肽类生物信息分子应用于心血管植入材料的表面修饰,人工模拟细胞外基质功能蛋白,可以促进材料的内皮化。 目的：回顾近年来关于多肽修饰在心血管植入材料内皮化方面的相关研究,为相关研究提供新的实验思路。 方法：应用计算机检索1990年1月至2013年12月PubMed数据库中有关多肽修饰促进材料内皮化方面的研究,检索关键词为“peptides,surface modification,endothelialization”,根据纳入排除标准选择,最终选择43篇文献进行综述。 结果与结论：选择来源于细胞外基质功能蛋白的短肽表面修饰各类材料,既能促进内皮细胞的黏附,也能避免直接引入天然细胞外基质成分的缺陷。非特异性多肽主要包括RGD和YIGSR等,此类多肽均能促进包括内皮细胞在内多种细胞类型的黏附。特异性多肽主要包括REDV、CAG和SVVYGLR等,这些多肽可选择性促进内皮细胞的黏附和扩展。应用此类多肽表面修饰,可特异性促进材料的内皮化。联合应用几种多肽或联合特异性多肽与其他一些生物信息分子也许是未来应用多肽修饰促进心血管植入材料内皮化的理想方案。     

细胞外基质材料的安全性能

背景:组织工程医疗产品最终要植入体内,植入产品的生物相容性决定其能否长期在体内发挥正常的功能.因此安全性评价是决定组织工程医疗产品最终能否应用于临床的重要环节.目的:从细胞的毒性试验、与血液的相互作用实验、植入后局部反应试验、免疫学评价等方面,介绍对细胞外基质材料进行安全性评价的方法.方法:以"组织工程(tissue-engineering),细胞外基质(Extracellular Matrix),生物相容性(Biocompatibility),安全性评价(afety Evaluation)"为检索词,应用计算机检索维普数据库,Pubmed数据库,Elsevier数据库有关文章.纳入与细胞外基质材料安全性评价方法密切相关的文献,排除重复性研究.结果与结论:共检索到218篇文献,排除无关重复的文献,保留22篇文献进行综述.目前对于细胞外基质材料还没有整体的安全性评价方法,对于生物材料成分的结构和功能特性及生物相容性进行评价主要依据ISO 10993系列医疗器械生物学评价方法.随着细胞外基质材料的广泛应用,对细胞外基质的安全性评价会越来越受到重视,许多问题还有待探讨.     

个案报道的撰写有助于医学生综合素质的培养

对于1名普通的医科大学的解剖学专业的教师而言,如何依靠自身的专业特点,利用一切可以利用的契机,充分调动学生的主观能动性,从而更好地提升医学生综合素质的培养,即成为必须进行深入探讨的课题.     

离心作用测定细胞与材料间的粘附力及其初步应用

目的：介绍一种简单易行的检测细胞与材料间黏附力的方法。方法：本方法的建立基于离心力在转速一定时与半径成正比的原理。医用石膏制备培养皿固定装置，于培养皿底制备材料薄膜（包括有PLGA，PLGA COLI，PLGA COL I FN），待大鼠骨骼肌卫星细胞悬液与其作用一定时间后，一定转速开动离心机。测定未脱落细胞斑的半径R,取均值。结果：上述三种材料表面未脱落大鼠骨骼肌卫星细胞圆斑半径（R）分别为7.96、15.11、26.10mm，三组间有显著性差异。结论：（1）R的变化可反映细胞与材料间粘附力的改变。（2）利用离心作用检测细胞与材料间的粘附力是可行的，尤其适用于同一种细胞与不同材料间粘附力的比较。（3）COL I和FN的使用可以增加大鼠骨骼肌卫星细胞与PLGA间的粘附。     

角膜缘干细胞移植治疗兔眼表碱烧伤的实验研究

目的 :探讨眼表碱烧伤后行角膜缘干细胞移植术的疗效 ,并与单纯行角膜移植术组作比较。方法 :在 16只兔双眼上制作碱烧伤模型 ,1d后 ,右眼行异体板层角膜缘干细胞移植术 ,左眼行异体板层角膜移植术 ,术后观察 6月 ,根据术眼的角膜新生血管分级、植片的混浊度、水肿度来计算移植排斥反应指数 (RI) ,以RI值判断植片的存活情况。结果 :行异体板层角膜缘干细胞移植术的 16眼中有 14眼RI <9,治愈率达 87.5 % ;行单纯异体板层角膜移植的 16眼中 6眼RI值 <9,有效率 3 7.5 % ;两者相比有显著性差异 (P <0 .0 0 1)。两组的新生血管数、植片的混浊度、水肿度及RI值均有显著性差异。结论 :含干细胞的异体角膜缘移植治疗眼表碱烧伤的疗效明显优于单纯异体角膜移植 ,是一种较有效的方法。     

平行结构支架材料对大鼠成肌细胞α-肌动蛋白的影响

目的：根据大鼠成肌细胞骨骼肌α-肌动蛋白mRNA的表达变化，初步探讨借助支架材料的有序排列构建具有理想方向性组织工程化骨骼肌的可行性。方法：将医用可吸收缝合线平行折叠并制备成类圆柱体状，与大鼠成肌细胞L6体外复合培养。以18s RNA为内参照，运用半定量RT-PCR检测大鼠成肌细胞骨骼肌α-肌动蛋白mRNA在体外培养早期的变化。结果：随着体外培养时间的延长，大鼠骨骼肌α-肌动蛋白的mRNA表达水平逐渐升高，并于体外培养第4d，维持在相对稳定的水平。结论：大鼠成肌细胞与具有平行结构支架材料体外复合培养早期，骨骼肌α-肌动蛋白的基因表达与骨骼肌再生有一定程度的吻合。     

线粒体凋亡途径参与表皮膜蛋白1诱导的细胞调亡

目的:探讨人表皮膜蛋白1(hEMP1)诱导细胞凋亡的信号途径.方法:构建包含hEMP1基因编码框的真核表达载体pcDNA3.1( )-EMP1,瞬转HEK293细胞后荧光倒置相差显微镜、流式细胞术检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活力以及线粒体膜电位的变化.结果:荧光倒置相差显微镜、流式细胞术结果显示,过表达EMP1后细胞Caspase-3、Caspasc-9活力显著增强.线粒体膜电位改变增多,而Caspase-8的活力变化不明显.结论:线粒体凋亡途径参与hEMP1诱导的细胞凋亡.     

与甲壳素缝线体外复合培养大鼠成肌细胞株L6细胞的形态学

目的：探讨甲壳素作为骨骼肌组织工程支架材料的可行性。 方法：实验于2002-06／12在南方医科大学应用解剖学研究所完成。大鼠成肌细胞株L6与甲壳素医用缝合线体外复合培养。倒置相差显微镜下观察细胞的形态和排列情况。并分别在体外复合培养的第1，2，3，4，5，6天，取出细胞支架复合体，扫描电镜观察成肌细胞的形态和排列情况。 结果：①扫描电子显微镜观察显示，甲壳素医用可吸收缝线的表面比较粗糙。②倒置相差显微镜下可见大鼠L6细胞与甲壳素制备的医用可吸收缝合线间黏附良好，细胞沿缝线排列呈现串珠样，并可以见到细胞聚集现象。③扫描电子显微镜观察，接种24h后，细胞主要为圆球形，随后细胞迁移、伸展、并见突起；第3天，成肌细胞主要为梭形，并见融合趋势；4d后，细胞沿材料纵轴排列并相互融合，并见肌小管样结构形成及细胞外基质分泌。 结论：甲壳素具有作为支架以构建组织工程化骨骼肌的潜能，支架的平行排列有助于工程化骨骼肌纤维良好方向性的形成。